Što su krioviale?
Kriogene bočice za skladištenjesu male, cilindrične posude s poklopcem dizajnirane za pohranu i očuvanje uzoraka na ultraniskim temperaturama. Iako su se tradicionalno ove bočice izrađivale od stakla, sada se mnogo češće izrađuju od polipropilena zbog praktičnosti i troškova. Krioviale su pažljivo dizajnirane da izdrže temperature do -196 ℃ i da prime širok raspon vrsta stanica. One variraju od dijagnostičkih matičnih stanica, mikroorganizama, primarnih stanica do uspostavljenih staničnih linija. Osim toga, mogu se pohranjivati i mali višestanični organizmi.kriogene bočice za pohranu, kao i nukleinske kiseline i proteini koji se moraju skladištiti na kriogenim temperaturama skladištenja.
Kriogene bočice za pohranu dolaze u raznim oblicima, a pronalaženje ispravne vrste koja zadovoljava sve vaše potrebe osigurat će održavanje integriteta uzorka bez preplaćivanja. Pročitajte naš članak kako biste saznali više o ključnim razmatranjima kupnje pri odabiru prave kriogene bočice za vašu laboratorijsku primjenu.
Svojstva kriogene bočice koju treba uzeti u obzir
Vanjski vs unutarnji navoji
Ljudi često donose ovaj izbor na temelju osobnih preferencija, ali zapravo postoje ključne funkcionalne razlike koje treba uzeti u obzir između dvije vrste navoja.
Mnogi laboratoriji često se odlučuju za bočice s unutarnjim navojem kako bi smanjili prostor za pohranu epruveta i omogućili bolje pristajanje u kutije za zamrzavanje. Unatoč tome, možete smatrati da je opcija s vanjskim navojem bolja opcija za vas. Smatra se da nose manji rizik od kontaminacije zbog dizajna koji još više otežava ulazak bilo čega osim uzorka u bočicu.
Bočice s vanjskim navojem općenito se preferiraju za genomske primjene, ali obje opcije se smatraju prikladnima za biobankarstvo i druge primjene visokog protoka.
Još jedna stvar koju treba uzeti u obzir kod navoja – ako vaš laboratorij koristi automatizaciju, možda ćete morati razmotriti koji se navoj može koristiti s hvataljkama instrumenata.
Volumen pohrane
Kriogene bočice dostupne su u raznim veličinama kako bi pokrile većinu potreba, ali uglavnom se kreću od 1 mL do 5 mL.
Ključno je osigurati da vaša kriobočica nije prepunjena i da ima dodatnog prostora u slučaju da uzorak nabubri tijekom zamrzavanja. U praksi to znači da se laboratoriji odlučuju za bočice od 1 mL kada pohranjuju uzorke od 0,5 mL stanica suspendiranih u krioprotektantu i bočice od 2,0 mL za 1,0 mL uzorka. Još jedan savjet kako ne biste prepunili bočice jest korištenje kriobočica s graduiranim oznakama, što će osigurati da spriječite bilo kakvo bubrenje koje bi moglo uzrokovati pucanje ili curenje.
Navojni čep u odnosu na preklopni čep
Vrsta poklopca koji odaberete ovisi uglavnom o tome hoćete li koristiti tekući dušik ili ne. Ako ćete ga koristiti, trebat će vam krioepruvete s navojnim čepom. To osigurava da se ne mogu slučajno otvoriti zbog nepravilnog rukovanja ili promjena temperature. Osim toga, navojni čepovi omogućuju lakše vađenje iz kriogenih kutija i učinkovitije skladištenje.
Međutim, ako ne koristite tekući dušik i trebate praktičniji poklopac koji se lakše otvara, tada je preklopni poklopac bolja opcija. To će vam uštedjeti puno vremena jer se puno lakše otvara, što ga čini posebno korisnim u operacijama s većim protokom i onima koje koriste šaržne procese.
Sigurnost pečata
Najbolji način za osiguranje sigurnog brtvljenja jest provjeriti jesu li čep i boca krioepruvete izrađeni od istog materijala. To će osigurati da se istovremeno skupljaju i šire. Ako su izrađeni od različitih materijala, tada će se skupljati i širiti različitim brzinama kako se temperatura mijenja, što će dovesti do pukotina i potencijalnog curenja te posljedične kontaminacije.
Neke tvrtke nude dvostruke podloške i prirubnicu za najvišu razinu sigurnosti uzorka na kriobočicama s vanjskim navojem. Kriobočice s O-prstenom smatraju se najpouzdanima za kriobočice s unutarnjim navojem.
Staklo vs. plastika
Radi sigurnosti i praktičnosti, mnogi laboratoriji sada koriste plastiku, obično polipropilen, umjesto toplinski zatvarajućih staklenih ampula. Staklene ampule danas se smatraju zastarjelim izborom jer se tijekom procesa zatvaranja mogu pojaviti nevidljive rupice, koje prilikom odmrzavanja nakon skladištenja u tekućem dušiku mogu uzrokovati njihovu eksploziju. Također nisu toliko prikladne za moderne tehnike označavanja, što je ključno za osiguravanje sljedivosti uzorka.
Samostojeće u odnosu na zaobljena dna
Kriogene bočice dostupne su kao samostojeće sa zvjezdastim dnom ili kao zaobljene. Ako trebate postaviti bočice na površinu, odaberite samostojeću verziju.
Sljedivost i praćenje uzoraka
Ovo područje kriogenog skladištenja često se zanemaruje, ali praćenje i sljedivost uzoraka ključni su aspekti koje treba uzeti u obzir. Kriogeni uzorci mogu se čuvati dugi niz godina, tijekom kojih se osoblje može mijenjati, a bez pravilno vođenih evidencija mogu postati neidentificirani.
Obavezno odaberite bočice koje omogućuju što jednostavniju identifikaciju uzorka. Stvari na koje biste trebali paziti uključuju:
Velika područja za pisanje za bilježenje dovoljno detalja kako bi se zapisi mogli pronaći ako se bočica nalazi na pogrešnoj lokaciji – obično su dovoljni identitet stanice, datum zamrzavanja i inicijali odgovorne osobe.
Barkodovi za pomoć u upravljanju uzorcima i sustavima praćenja
Kape u boji
Napomena za budućnost – razvijaju se ultra-otporni čipovi koji bi, kada se ugrade u pojedinačne krioepruvete, potencijalno mogli pohraniti detaljnu toplinsku povijest, kao i detaljne informacije o seriji, rezultate ispitivanja i drugu relevantnu dokumentaciju o kvaliteti.
Osim razmatranja različitih specifikacija dostupnih bočica, potrebno je razmotriti i tehnički proces skladištenja kriobočica u tekućem dušiku.
Temperatura skladištenja
Postoji nekoliko metoda kriogenog skladištenja uzoraka, a svaka radi na određenoj temperaturi. Mogućnosti i temperatura na kojoj rade uključuju:
Tekuća faza LN2: održavati temperaturu od -196 ℃
LN2 u parnoj fazi: sposobni su za rad na određenim temperaturnim rasponima između -135°C i -190°C, ovisno o modelu.
Zamrzivači s dušikovim parama: -20°C do -150°C
Vrsta stanica koje se pohranjuju i preferirana metoda pohrane istraživača odredit će koju od tri dostupne opcije vaš laboratorij koristi.
Međutim, zbog izuzetno niskih temperatura koje se koriste, neće sve epruvete ili dizajni biti prikladni ili sigurni. Materijali mogu postati izuzetno krhki na izuzetno niskim temperaturama, a korištenje bočice koja nije prikladna za upotrebu na odabranoj temperaturi moglo bi uzrokovati lomljenje ili pucanje posude tijekom skladištenja ili odmrzavanja.
Pažljivo provjerite preporuke proizvođača o pravilnoj uporabi jer su neke kriogene bočice prikladne za temperature do -175 °C, neke -150 °C, a druge samo 80 °C.
Također je vrijedno napomenuti da mnogi proizvođači navode da njihove kriogene bočice nisu prikladne za uranjanje u tekuću fazu. Ako se ove bočice pohranjuju u tekućoj fazi prilikom vraćanja na sobnu temperaturu, te bočice ili njihovi čepovi mogu se slomiti zbog brzog porasta tlaka uzrokovanog malim curenjima.
Ako se stanice pohranjuju u tekućoj fazi tekućeg dušika, razmislite o pohranjivanju stanica u prikladnim kriogenim bočicama toplinski zatvorenim u kriofleksnim cijevima ili pohranjivanju stanica u hermetički zatvorenim staklenim ampulama.
Vrijeme objave: 25. studenog 2022.