अपनी प्रयोगशाला के लिए सही क्रायोजेनिक स्टोरेज शीशी का चयन कैसे करें

क्रायोवायल क्या हैं?

क्रायोजेनिक भंडारण शीशियाँछोटे, ढक्कनदार और बेलनाकार कंटेनर होते हैं जिन्हें अल्ट्रा-लो तापमान पर नमूनों को संग्रहीत करने और संरक्षित करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। हालाँकि पारंपरिक रूप से ये शीशियाँ कांच से बनाई जाती रही हैं, लेकिन अब वे सुविधा और लागत कारणों से पॉलीप्रोपाइलीन से अधिक सामान्यतः बनाई जाती हैं। क्रायोवियल को -196 डिग्री सेल्सियस तक के तापमान को झेलने और विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं को समायोजित करने के लिए सावधानीपूर्वक डिज़ाइन किया गया है। ये निदान स्टेम कोशिकाओं, सूक्ष्मजीवों, प्राथमिक कोशिकाओं से लेकर स्थापित कोशिका रेखाओं तक भिन्न होते हैं। इसके अलावा, छोटे बहुकोशिकीय जीव भी हो सकते हैं जिन्हें इसके भीतर संग्रहीत किया जाता हैक्रायोजेनिक भंडारण शीशियाँ, साथ ही न्यूक्लिक एसिड और प्रोटीन जिन्हें क्रायोजेनिक भंडारण तापमान स्तर पर संग्रहीत करने की आवश्यकता होती है।

क्रायोजेनिक स्टोरेज वायल कई अलग-अलग रूपों में आते हैं, और सही प्रकार का चयन करना जो आपकी सभी ज़रूरतों को पूरा करता है, यह सुनिश्चित करेगा कि आप बिना ज़्यादा भुगतान किए नमूने की अखंडता बनाए रखें। अपने प्रयोगशाला अनुप्रयोग के लिए सही क्रायोवियल का चयन करते समय प्रमुख खरीद विचारों के बारे में अधिक जानने के लिए हमारे लेख को पढ़ें।

क्रायोजेनिक शीशी के विचारणीय गुण

बाह्य बनाम आंतरिक धागे

लोग अक्सर व्यक्तिगत पसंद के आधार पर यह चुनाव करते हैं, लेकिन वास्तव में दोनों प्रकार के धागों के बीच विचार करने के लिए महत्वपूर्ण कार्यात्मक अंतर हैं।

कई प्रयोगशालाएँ अक्सर ट्यूब भंडारण स्थान को कम करने के लिए आंतरिक रूप से थ्रेडेड शीशियों का विकल्प चुनती हैं ताकि फ्रीजर बॉक्स में बेहतर फिट हो सके। इसके बावजूद, आप विचार कर सकते हैं कि बाहरी रूप से थ्रेडेड विकल्प आपके लिए बेहतर विकल्प है। उन्हें कम संदूषण जोखिम उठाने वाला माना जाता है, क्योंकि उनके डिज़ाइन के कारण नमूने के अलावा किसी भी चीज़ का शीशी में प्रवेश करना और भी कठिन हो जाता है।

बाह्य रूप से थ्रेडेड शीशियों को आमतौर पर जीनोमिक अनुप्रयोगों के लिए पसंद किया जाता है, लेकिन बायोबैंकिंग और अन्य उच्च थ्रूपुट अनुप्रयोगों के लिए कोई भी विकल्प उपयुक्त माना जाता है।

थ्रेडिंग पर विचार करने के लिए एक अंतिम बात - यदि आपकी प्रयोगशाला स्वचालन का उपयोग करती है, तो आपको यह विचार करने की आवश्यकता हो सकती है कि उपकरण ग्रिपर के साथ किस थ्रेड का उपयोग किया जा सकता है।

भंडारण मात्रा

क्रायोजेनिक शीशियां अधिकांश आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए विभिन्न आकारों में उपलब्ध हैं, लेकिन ज्यादातर उनकी क्षमता 1 एमएल से 5 एमएल के बीच होती है।

मुख्य बात यह सुनिश्चित करना है कि आपका क्रायोवियल अधिक भरा न हो और यदि नमूना जमने के दौरान फूल जाता है, तो अतिरिक्त जगह उपलब्ध हो। व्यवहार में, इसका मतलब है कि प्रयोगशालाएँ क्रायोप्रोटेक्टेंट में निलंबित 0.5 एमएल कोशिकाओं के नमूनों को संग्रहीत करते समय 1 एमएल की शीशियों का विकल्प चुनती हैं, और 1.0 एमएल नमूने के लिए 2.0 एमएल की शीशियाँ चुनती हैं। अपनी शीशियों को अधिक न भरने के लिए एक और सुझाव यह है कि आप स्नातक चिह्नों वाले क्रायोवियल का उपयोग करें, जो सुनिश्चित करेगा कि आप किसी भी सूजन को रोकें जो दरार या रिसाव का कारण बन सकती है।

स्क्रू कैप बनाम फ्लिप टॉप

आप किस प्रकार का टॉप चुनते हैं यह मुख्य रूप से इस बात पर निर्भर करता है कि आप लिक्विड फेज नाइट्रोजन का उपयोग करेंगे या नहीं। यदि आप कर रहे हैं, तो आपको स्क्रू कैप्ड क्रायोवियल की आवश्यकता होगी। यह सुनिश्चित करता है कि वे गलत तरीके से इस्तेमाल या तापमान में बदलाव के कारण गलती से खुल न सकें। इसके अतिरिक्त, स्क्रू कैप क्रायोजेनिक बॉक्स से आसानी से निकालने और अधिक कुशल भंडारण की अनुमति देते हैं।

हालाँकि, यदि आप लिक्विड स्टेज नाइट्रोजन का उपयोग नहीं कर रहे हैं और आपको अधिक सुविधाजनक टॉप की आवश्यकता है जिसे खोलना आसान हो, तो फ्लिप टॉप बेहतर विकल्प है। यह आपका बहुत समय बचाएगा क्योंकि इसे खोलना बहुत आसान है, जो इसे उच्च थ्रूपुट संचालन और बैच प्रक्रियाओं का उपयोग करने वालों में विशेष रूप से उपयोगी बनाता है।

सील सुरक्षा

सुरक्षित सील सुनिश्चित करने का सबसे अच्छा तरीका यह सुनिश्चित करना है कि आपकी क्रायोवियल कैप और बोतल दोनों एक ही सामग्री से बनी हों। इससे यह सुनिश्चित होगा कि वे एक साथ सिकुड़ें और फैलें। यदि वे अलग-अलग सामग्रियों का उपयोग करके बनाए गए हैं, तो वे तापमान में परिवर्तन के साथ अलग-अलग दरों पर सिकुड़ेंगे और फैलेंगे, जिससे अंतराल और संभावित रिसाव और परिणामस्वरूप संदूषण हो सकता है।

कुछ कंपनियाँ बाहरी रूप से थ्रेडेड क्रायोवियल पर उच्चतम स्तर की नमूना सुरक्षा के लिए दोहरे वॉशर और फ्लैंज प्रदान करती हैं। आंतरिक रूप से थ्रेडेड क्रायोवियल के लिए ओ-रिंग क्रायोवियल को सबसे विश्वसनीय माना जाता है।

कांच बनाम प्लास्टिक

सुरक्षा और सुविधा के लिए, कई प्रयोगशालाएँ अब हीट-सील करने योग्य ग्लास ऐम्प्यूल्स के बजाय प्लास्टिक, आमतौर पर पॉलीप्रोपाइलीन का उपयोग करती हैं। ग्लास ऐम्प्यूल्स को अब पुराना विकल्प माना जाता है क्योंकि सीलिंग प्रक्रिया के दौरान अदृश्य पिनहोल लीक विकसित हो सकते हैं, जो तरल नाइट्रोजन में भंडारण के बाद पिघलने पर विस्फोट का कारण बन सकते हैं। वे आधुनिक लेबलिंग तकनीकों के लिए भी उपयुक्त नहीं हैं, जो नमूना ट्रेसिबिलिटी सुनिश्चित करने के लिए महत्वपूर्ण है।

स्वयं खड़ा बनाम गोल तल

क्रायोजेनिक शीशियाँ तारे के आकार के तल के साथ या गोल तल के साथ स्व-खड़े होने के रूप में उपलब्ध हैं। यदि आपको अपनी शीशियों को किसी सतह पर रखने की आवश्यकता है तो स्व-खड़े होने वाली शीशियों का चयन करना सुनिश्चित करें

ट्रेसिबिलिटी और नमूना ट्रैकिंग

क्रायोजेनिक भंडारण के इस क्षेत्र को अक्सर अनदेखा कर दिया जाता है, लेकिन नमूना ट्रैकिंग और ट्रेसेबिलिटी पर विचार करना एक महत्वपूर्ण पहलू है। क्रायोजेनिक नमूनों को कई वर्षों तक संग्रहीत किया जा सकता है, इस अवधि के दौरान कर्मचारी बदल सकते हैं और उचित रूप से बनाए गए रिकॉर्ड के बिना वे पहचाने जाने योग्य नहीं रह सकते हैं।

सुनिश्चित करें कि आप ऐसी शीशियाँ चुनें जो नमूने की पहचान को यथासंभव आसान बना सकें। आपको निम्नलिखित बातों पर ध्यान देना चाहिए:

पर्याप्त विवरण दर्ज करने के लिए बड़े लेखन क्षेत्र ताकि यदि कोई शीशी गलत स्थान पर स्थित हो तो रिकॉर्ड ढूंढा जा सके - आमतौर पर कोशिका की पहचान, जमे रहने की तिथि और जिम्मेदार व्यक्ति के नाम के पहले अक्षर पर्याप्त होते हैं।

नमूना प्रबंधन और ट्रैकिंग प्रणालियों में सहायता के लिए बारकोड

रंगीन टोपियां

भविष्य के लिए एक नोट - अतिशीत-प्रतिरोधी चिप्स विकसित किए जा रहे हैं, जिन्हें व्यक्तिगत क्रायोवायल में फिट करने पर, संभावित रूप से विस्तृत तापीय इतिहास के साथ-साथ विस्तृत बैच जानकारी, परीक्षण परिणाम और अन्य प्रासंगिक गुणवत्ता दस्तावेज भी संग्रहीत किए जा सकेंगे।

उपलब्ध शीशियों की विभिन्न विशिष्टताओं पर विचार करने के अलावा, क्रायोवायल को तरल नाइट्रोजन में संग्रहीत करने की तकनीकी प्रक्रिया पर भी विचार किए जाने की आवश्यकता है।

भंडारण तापमान

नमूनों के क्रायोजेनिक भंडारण के लिए कई भंडारण विधियाँ हैं, जिनमें से प्रत्येक एक विशिष्ट तापमान पर संचालित होती है। विकल्प और वे तापमान जिस पर वे संचालित होते हैं, उनमें शामिल हैं:

तरल चरण LN2: -196℃ का तापमान बनाए रखें

वाष्प चरण LN2: मॉडल के आधार पर -135°C और -190°C के बीच विशिष्ट तापमान सीमाओं पर काम करने में सक्षम हैं।

नाइट्रोजन वाष्प फ्रीजर: -20°C से -150°C

संग्रहित की जाने वाली कोशिकाओं का प्रकार और शोधकर्ता की पसंदीदा भंडारण विधि यह निर्धारित करेगी कि आपकी प्रयोगशाला उपलब्ध तीन विकल्पों में से किसका उपयोग करेगी।

हालांकि, अत्यधिक कम तापमान के कारण सभी ट्यूब या डिज़ाइन उपयुक्त या सुरक्षित नहीं होंगे। अत्यंत कम तापमान पर सामग्री अत्यंत भंगुर हो सकती है, आपके द्वारा चुने गए तापमान पर उपयोग के लिए उपयुक्त नहीं होने वाली शीशी का उपयोग करने से भंडारण या विगलन के दौरान बर्तन टूट सकता है या दरार पड़ सकती है।

उचित उपयोग के लिए निर्माताओं की सिफारिशों को ध्यानपूर्वक जांच लें, क्योंकि कुछ क्रायोजेनिक शीशियां -175°C, कुछ -150°C तथा अन्य केवल 80°C जैसे न्यूनतम तापमान के लिए उपयुक्त होती हैं।

यह भी ध्यान देने योग्य है कि कई निर्माता कहते हैं कि उनकी क्रायोजेनिक शीशियाँ तरल अवस्था में डुबाने के लिए उपयुक्त नहीं हैं। यदि इन शीशियों को कमरे के तापमान पर वापस आने पर तरल अवस्था में संग्रहीत किया जाता है, तो ये शीशियाँ या उनकी कैप सील छोटे रिसाव के कारण दबाव के तेज़ निर्माण के कारण टूट सकती हैं।

यदि कोशिकाओं को द्रव नाइट्रोजन के द्रव चरण में भंडारित किया जाना है, तो कोशिकाओं को क्रायोफ्लेक्स ट्यूबिंग में ऊष्मा-सील करके उपयुक्त क्रायोजेनिक शीशियों में भंडारित करने पर विचार करें, या कोशिकाओं को वायुरोधी रूप से बंद कांच की शीशियों में भंडारित करने पर विचार करें।