Do mesmo xeito que un cociñeiro usa un coitelo, un científico necesita habilidades de pipeteado. Un cociñeiro experimentado pode ser capaz de cortar unha cenoria en tiras, aparentemente sen pensalo, pero nunca está de máis ter en conta algunhas pautas de pipeteado, independentemente da experiencia do científico. Aquí, tres expertos ofrecen os seus mellores consellos.
«Hai que ter coidado de ter a técnica correcta ao dispensar líquido manualmente», afirma Magali Gaillard, directora sénior de xestión de carteiras da liña de negocios MLH de Gilson (Villiers-le-bel, Francia). «Algúns dos erros máis comúns ao pipetear están relacionados co uso descoidado das puntas das pipetas, un ritmo ou tempo inconsistente e unha manipulación inadecuada da pipeta».
Ás veces, un científico incluso selecciona a pipeta incorrecta. Como dixo Rishi Porecha, xestor de produtos globais deRaininInstruments (Oakland, California) afirma que «algúns erros comúns ao pipetear inclúen non usar a pipeta do volume correcto para unha tarefa específica e usar unha pipeta de desprazamento de aire para manexar líquidos non acuosos». Con fluídos viscosos, sempre se debe usar unha pipeta de desprazamento positivo.
Antes de abordar os procedementos específicos de pipetado, convén ter en conta algúns conceptos xerais. «Cada vez que os usuarios de pipetas comezan a traballar durante o día, deben ter en conta que experimento están a realizar, con que líquidos están a traballar e que rendemento desexan antes de escoller unha pipeta», di Porecha. «Sendo realistas, ningún laboratorio ten todas as pipetas que un usuario podería desexar, pero se un usuario bota unha ollada ás ferramentas dispoñibles no laboratorio e no departamento, pode ter unha mellor idea de que pipetas existentes implementar nun ensaio ou de que pipetas podería querer mercar».
As características dispoñibles nas pipetas actuais van máis alá do propio dispositivo. Os avances na manipulación de líquidos permitiron que os usuarios conecten agora a súa pipeta á nube. Con esta conectividade, un usuario pode descargar protocolos ou crear protocolos personalizados. Os datos de pipeteado mesmo poden capturarse na nube, o que é unha forma de identificar calquera erro e mellorar o proceso de pipeteado, especialmente mediante o seguimento da precisión continua, ou da falta dela.
Co equipo axeitado na man, o seguinte reto é acertar cos pasos.
Clave do éxito
Cunha pipeta de desprazamento de aire, os seguintes pasos aumentan a probabilidade de medir con precisión e repetidamente un volume específico:
- Axuste o volume na pipeta.
- Prema o émbolo.
- Mergulle a punta á profundidade correcta, que pode variar segundo a pipeta e a punta, e deixe que o émbolo chegue suavemente á súa posición de repouso.
- Agarde aproximadamente un segundo para que o líquido entre nopropina.
- Coloque a pipeta, mantida a un ángulo de 10–45 graos, contra a parede da cámara receptora e prema suavemente o émbolo ata o primeiro tope.
- Agarde un segundo e logo prema o émbolo ata o segundo tope.
- Deslice a punta pola parede do recipiente para retirar a pipeta.
- Deixe que o émbolo volva á súa posición de repouso.
Data de publicación: 12 de decembro de 2022