Mitä kryopullot ovat?
Kryogeeniset säilytyspullotovat pieniä, korkillisia ja sylinterimäisiä astioita, jotka on suunniteltu näytteiden säilyttämiseen ja säilömiseen erittäin alhaisissa lämpötiloissa. Vaikka perinteisesti nämä injektiopullot on valmistettu lasista, nykyään ne valmistetaan paljon yleisemmin polypropeenista mukavuus- ja kustannussyistä. Kryopullot on suunniteltu huolellisesti kestämään jopa -196 ℃:n lämpötiloja ja soveltumaan monenlaisille solutyypeille. Nämä vaihtelevat diagnostisista kantasoluista, mikro-organismeista, primaarisoluista vakiintuneisiin solulinjoihin. Näiden lisäksi voi olla myös pieniä monisoluisia organismeja, joita säilytetään sisälläkryogeeniset säilytyspullotsekä nukleiinihappoja ja proteiineja, jotka on säilytettävä kryogeenisissä säilytyslämpötiloissa.
Kryogeenisiä säilytyspulloja on saatavilla useissa eri muodoissa, ja oikean tyypin löytäminen, joka täyttää kaikki tarpeesi, varmistaa näytteen eheyden maksamatta liikaa. Lue artikkelimme saadaksesi lisätietoja tärkeimmistä ostoon liittyvistä näkökohdista valittaessa oikeaa kryopulloa laboratoriosovellukseesi.
Kryogeenisen injektiopullon ominaisuudet, jotka on otettava huomioon
Ulkoiset vs. sisäiset kierteet
Ihmiset tekevät usein tämän valinnan henkilökohtaisten mieltymysten perusteella, mutta näiden kahden lankatyypin välillä on itse asiassa keskeisiä toiminnallisia eroja, jotka on otettava huomioon.
Monet laboratoriot valitsevat usein sisäkierteitettyjä injektiopulloja minimoidakseen putkien säilytystilan ja sopiakseen paremmin pakastelaatikoihin. Tästä huolimatta ulkokierteitetty vaihtoehto voi olla sinulle parempi vaihtoehto. Niiden kontaminaatioriski on pienempi niiden rakenteen vuoksi, joka vaikeuttaa muiden kuin näytteen pääsyä injektiopulloon.
Ulkokierteitetyt injektiopullot ovat yleensä parempia genomi-sovelluksissa, mutta kumpaakin vaihtoehtoa pidetään sopivana biopankkitoimintaan ja muihin suuren läpimenon sovelluksiin.
Vielä yksi asia, joka on otettava huomioon kierteittämisessä – jos laboratoriossasi käytetään automaatiota, sinun on ehkä mietittävä, mitä kierteitä voidaan käyttää instrumenttitarrainten kanssa.
Tallennustilavuus
Kryogeenisiä injektiopulloja on saatavilla eri kokoisina useimpien tarpeiden kattamiseksi, mutta useimmiten niiden tilavuus on 1–5 ml.
Tärkeintä on varmistaa, ettei kryopulloa täytetä liikaa ja että siinä on ylimääräistä tilaa siltä varalta, että näyte turpoaa jäädytyksen aikana. Käytännössä tämä tarkoittaa, että laboratoriot valitsevat 1 ml:n pullot säilyttäessään 0,5 ml:n kryosuoja-aineeseen suspendoituja solunäytteitä ja 2,0 ml:n pullot 1,0 ml:n näytettä varten. Toinen vinkki pullojen ylitäyttämisen välttämiseksi on käyttää kryopulloja, joissa on asteittaiset merkinnät. Tämä estää turpoamisen, joka voi aiheuttaa halkeilua tai vuotoa.
Kierrekorkki vs. läppäkorkki
Valitsemasi korkin tyyppi riippuu pääasiassa siitä, käytätkö nestemäistä typpeä vai et. Jos käytät, tarvitset kierrekorkilla varustettuja kryopulloja. Tämä varmistaa, etteivät ne voi poksahtaa auki vahingossa väärän käsittelyn tai lämpötilan muutosten vuoksi. Lisäksi kierrekorkit helpottavat laatikoiden osien nostamista ja tehostavat varastointia.
Jos et kuitenkaan käytä nestemäistä typpeä ja tarvitset kätevämmän ja helpommin avattavan kannen, läppäkansi on parempi vaihtoehto. Tämä säästää paljon aikaa, koska se on paljon helpompi avata, mikä tekee siitä erityisen hyödyllisen suuren läpimenon ja eräprosesseja käyttävissä toiminnoissa.
Sinetin turvallisuus
Paras tapa varmistaa tiivis tiivistys on varmistaa, että kryopullon korkki ja pullo on valmistettu samasta materiaalista. Tämä varmistaa, että ne kutistuvat ja laajenevat samaan aikaan. Jos ne on valmistettu eri materiaaleista, ne kutistuvat ja laajenevat eri nopeuksilla lämpötilan muuttuessa, mikä johtaa rakoihin ja mahdolliseen vuotoon ja siitä johtuvaan kontaminaatioon.
Jotkut yritykset tarjoavat kaksoisaluslevyjä ja laippaa ulkokierteisissä kryoputkissa parhaan mahdollisen näytteen suojauksen saavuttamiseksi. O-rengaskryoputkia pidetään luotettavimpina sisäkierteisissä kryoputkissa.
Lasi vs. muovi
Turvallisuuden ja mukavuuden vuoksi monet laboratoriot käyttävät nykyään muovia, yleensä polypropeenia, lämpösaumattavien lasiampullejen sijaan. Lasiampulleja pidetään nykyään vanhentuneena vaihtoehtona, koska sulkemisprosessin aikana voi muodostua näkymättömiä neulanreikiä, jotka voivat räjähtää sulatettaessa nestemäisessä typessä säilytyksen jälkeen. Ne eivät myöskään sovellu yhtä hyvin nykyaikaisiin merkintätekniikoihin, jotka ovat avainasemassa näytteen jäljitettävyyden varmistamisessa.
Itsestään seisova vs. pyöreäpohjainen
Kryogeenisiä injektiopulloja on saatavana sekä tähtipohjaisina että pyöristettyinä. Jos sinun on asetettava injektiopullosi pinnalle, varmista, että valitset itseseisovan mallin.
Jäljitettävyys ja näytteen seuranta
Tämä kryogeenisen varastoinnin osa-alue usein unohdetaan, mutta näytteiden seuranta ja jäljitettävyys on ratkaisevan tärkeä näkökohta. Kryogeenisiä näytteitä voidaan säilyttää useita vuosia, ja tänä aikana henkilökunta voi vaihtua, ja ilman asianmukaisesti ylläpidettyjä tietoja näytteistä voi tulla tunnistamattomia.
Varmista, että valitset pulloja, jotka tekevät näytteen tunnistamisesta mahdollisimman helppoa. Huomioi muun muassa seuraavat asiat:
Suuret kirjoitusalueet riittävien tietojen kirjaamiseksi, jotta tiedot löytyvät, jos injektiopullo sijaitsee väärässä paikassa – yleensä solun tunnistetiedot, pakastuspäivämäärä ja vastuuhenkilön nimikirjaimet riittävät.
Viivakoodit näytteenhallinta- ja seurantajärjestelmien avuksi
Värilliset korkit
Huomio tulevaisuuteen – kehitteillä on erittäin kylmänkestäviä siruja, jotka yksittäisiin kryopulloihin asennettuina voisivat mahdollisesti tallentaa yksityiskohtaisen lämpöhistorian sekä yksityiskohtaiset erätiedot, testitulokset ja muut asiaankuuluvat laatua koskevat asiakirjat.
Saatavilla olevien injektiopullojen erilaisten ominaisuuksien huomioon ottamisen lisäksi on pohdittava myös kryopullojen nestemäisessä typessä säilyttämisen teknistä prosessia.
Säilytyslämpötila
Näytteiden kryogeeniseen säilytykseen on useita säilytysmenetelmiä, joista jokainen toimii tietyssä lämpötilassa. Vaihtoehtoja ja niiden käyttölämpötilaa ovat:
Nestemäinen faasi LN2: pidä lämpötila -196 ℃:ssa
Höyryfaasi LN2: pystyvät toimimaan tietyillä lämpötila-alueilla -135 °C ja -190 °C välillä mallista riippuen.
Typpihöyrypakastimet: -20 °C - -150 °C
Tallennettavista soluista ja tutkijan suosimasta säilytysmenetelmästä riippuu, mitä kolmesta käytettävissä olevasta vaihtoehdosta laboratoriosi käyttää.
Käytettyjen erittäin alhaisten lämpötilojen vuoksi kaikki putket tai mallit eivät kuitenkaan ole sopivia tai turvallisia. Materiaalit voivat muuttua erittäin hauraiksi erittäin matalissa lämpötiloissa, ja jos käytetään injektiopulloa, joka ei sovellu käytettäväksi valitsemassasi lämpötilassa, astia voi särkyä tai haljeta varastoinnin tai sulatuksen aikana.
Tarkista huolellisesti valmistajien suositukset asianmukaisesta käytöstä, sillä jotkut kryogeeniset injektiopullot soveltuvat jopa -175 °C:n lämpötiloihin, jotkut -150 °C:n ja toiset vain 80 °C:n lämpötiloihin.
On myös syytä huomata, että monet valmistajat ilmoittavat, että heidän kryogeeniset injektiopullonsa eivät sovellu upotettaviksi nestefaasiin. Jos näitä injektiopulloja säilytetään nestefaasissa huoneenlämpötilaan palatessa, ne tai niiden korkkien tiivisteet voivat rikkoutua pienten vuotojen aiheuttaman nopean paineen nousun vuoksi.
Jos soluja säilytetään nestemäisessä typessä, harkitse solujen säilyttämistä sopivissa kryogeenisissä injektiopulloissa, jotka on kuumasinetöity kryoflex-letkuun, tai solujen säilyttämistä hermeettisesti suljetuissa lasiampulleissa.
Julkaisun aika: 25.11.2022