Mikropipeta zuzena erabiltzen ari zara? - 2021eko otsailaren 3a - Lukas Keller - Zientzia Biologikoen Berrien Artikulua

Laborategiko profesionalek orduak eman ditzakete egunero mikropipeta bat eskuan, eta pipetatzearen eraginkortasuna hobetzea eta emaitza fidagarriak bermatzea askotan erronka bat da. Aplikazio jakin baterako mikropipeta egokia aukeratzea funtsezkoa da laborategiko lanaren arrakastarako; ez du soilik edozein esperimenturen errendimendua bermatzen, baita eraginkortasuna handitzen ere. Pipetatze-lan-fluxuaren beharrak ulertzeak erabiltzaileei pipeta zehatzak eta errepikagarriak hautatzeko aukera ematen die, baina beste faktore asko ere kontuan hartu behar dira pipetatze-emaitzak hobetzeko eta esperimentuen arrakasta bermatzeko.
Oro har, likidoak hiru kategoria nagusitan banatzen dira: urtsuak, likatsuak eta lurrunkorrak. Likido gehienak uretan oinarritzen dira, eta horregatik aire-desplazamenduko pipetak dira askoren lehen aukera. Likido gehienek pipeta mota honekin ondo funtzionatzen duten arren, pipeta bolumikoak aukeratu behar dira likido oso likatsu edo lurrunkorrekin lan egitean. Pipeta mota hauen arteko desberdintasunak 1. irudian ageri dira. Garrantzitsua da, halaber, pipetatzeko teknika zuzena erabiltzea – likido mota edozein dela ere – emaitza bikainak lortzeko.
Pipetatzearen emaitzetan eragina duten bi parametro kritikoenak zehaztasuna eta doitasuna dira (2. irudia). Pipetatzearen zehaztasun, doitasun eta fidagarritasun maximoa lortzeko, hainbat irizpide izan behar dira kontuan. Oro har, erabiltzaileak beti aukeratu behar du nahi den transferentzia-bolumena kudeatu dezakeen pipeta txikiena. Garrantzitsua da hau, zehaztasuna gutxitzen baita ezarritako bolumena pipetaren gutxieneko bolumenera hurbiltzen den heinean. Adibidez, 50 µl banatzen badituzu 5.000 µl-ko pipeta batekin, emaitzak eskasak izan daitezke. Emaitza hobeak lor daitezke 300 µl-ko pipetekin, eta 50 µl-ko pipetak emaitzarik onenak ematen dituzte. Gainera, eskuzko pipeta tradizionaletan ezarritako bolumena alda daiteke pipetatzean zehar, pistoia ustekabean biratzeagatik. Horregatik, pipeta-fabrikatzaile batzuek blokeatzeko bolumen-doikuntzako diseinuak garatu dituzte pipetatzean nahi gabeko aldaketak saihesteko, zehaztasuna gehiago bermatzeko. Kalibrazioa beste alderdi garrantzitsu bat da, emaitza fidagarriak bermatzen laguntzen duena, pipetaren zehaztasuna eta doitasuna erakutsiz. Prozesu hau erraza izan behar da erabiltzailearentzat; Adibidez, pipeta elektroniko batzuek kalibrazio-abisuak ezar ditzakete edo kalibrazio-historia gorde dezakete. Ez dira pipetak bakarrik kontuan hartu behar. Pipeta-punta askatzen bada, isurtzen bada edo erortzen bada, hainbat arazo sor ditzake. Laborategian ohikoa den arazo hau askotan pipeta-punta orokorren erabileragatik sortzen da, eta askotan "kolpeak" behar izaten dira. Prozesu honek pipeta-puntaren ertza luzatzen du eta punta isurtzea edo gaizki jartzea eragin dezake, edo baita punta pipetatik erabat erortzea ere. Punta espezifikoekin diseinatutako kalitate handiko mikropipeta bat aukeratzeak konexio seguruagoa bermatzen du, fidagarritasun-maila handiagoa eta emaitza hobeak eskainiz. Gainera, pipetak eta puntak koloreztatzeko bezain gauza sinple batek ere erabiltzaileei lagun diezaieke pipetetarako punta zuzenak hautatzen direla ziurtatzen.
Ingurune errendimendu handiko batean, ahalik eta eraginkorrena izatea garrantzitsua da pipetatze prozesuaren fidagarritasuna eta koherentzia mantenduz. Pipetatze eraginkortasuna hobetzeko modu asko daude, besteak beste, pipeta anitzeko kanalen eta/edo elektronikoen erabilera. Tresna polifazetiko hauek askotan pipetatze modu desberdinak eskaintzen dituzte —hala nola, alderantzizko pipetatzea, dosifikazio aldakorra, programatutako serieko diluzioak eta gehiago— prozesua sinplifikatzeko. Adibidez, dosifikazio errepikatua bezalako prozedurak aproposak dira bolumen bereko hainbat alikuota banatzeko punta berriro bete gabe. Kanal bakarreko pipetak erabiltzea laginak laborategiko materialaren formatu desberdinen artean transferitzeko oso aspergarria eta akatsetarako joera bihur daiteke azkar. Kanal anitzeko pipetak lagin ugari aldi berean transferitzeko aukera ematen dute begi keinu batean. Horrek ez du eraginkortasuna handitzen bakarrik, pipetatze akatsak eta errepikapen-tentsio lesioak (RSI) saihesteko ere laguntzen du. Pipeta batzuek puntaren arteko tartea aldatzeko gaitasuna ere badute pipetatzean, lagin anitzen transferentzia paraleloak ahalbidetuz laborategiko materialaren tamaina eta formatu desberdinen artean, denbora orduak aurreztuz (3. irudia).
Laborategiko profesionalek egunean orduak ematen dituzte pipetatzen. Honek ondoeza sor dezake eta, kasu larriagoetan, esku edo besoetako lesioak ere bai. Arrisku potentzial horiek saihesteko aholkurik onena pipeta eusten duzun denbora ahalik eta laburrenera murriztea da. Horrez gain, erabiltzaileek mikropipeta arin eta ondo orekatua aukeratu beharko lukete, erdian masa duena, egonkortasun hobea lortzeko. Pipetak eroso egokitu behar du ezkerreko eta eskuineko erabiltzaileen eskuetan, helduleku diseinu ona izan behar du eta bolumena ahalik eta erosoen eta azkarren doitu behar du beharrezkoak ez diren mugimenduak saihesteko. Gainera, puntak garrantzitsuak dira, puntak kargatzeko eta kanporatzeko askotan pipetatzeak baino indar gehiago behar baitu eta lesio arriskua dago, batez ere errendimendu handiko ezarpenetan. Pipeta puntak indar minimoarekin sartu behar dira, konexio segurua eman eta berdin erraz kanporatzen ahal izan behar dira.
Zure aplikaziorako mikropipeta egokia aukeratzerakoan, garrantzitsua da zure lan-fluxuaren alderdi guztiak aztertzea. Pipeta, bere ezaugarriak, pipetatzen ari den likido mota eta bolumena eta erabilitako puntak kontuan hartuta, zientzialariek emaitza zehatzak, zehatzak eta fidagarriak berma ditzakete, produktibitatea mantenduz eta lesio arriskua minimizatuz.
Edizio honetan, analito basikoen berreskurapena HPLC-MS bidez ebaluatzen da, katioien truke sendoko SPE mikroplakak erabiliz, modu mistoan. SEC-MALLS-en onurak aplikazio biofarmazeutikoetan…
Nazioarteko Labmate Limited Oak Court Business Centre Sandridge Park, Porters Wood St Albans Hertfordshire AL3 6PH Erresuma Batua


Argitaratze data: 2022ko ekainaren 10a