So verwenden Sie Pipetten und Spitzen richtig

Wie ein Koch mit einem Messer benötigt auch ein Wissenschaftler Pipettierkenntnisse. Ein erfahrener Koch kann eine Karotte scheinbar gedankenlos in Streifen schneiden, doch es schadet nie, einige Pipettierrichtlinien zu beachten – egal wie erfahren der Wissenschaftler ist. Hier geben drei Experten ihre besten Tipps.

„Beim manuellen Dosieren von Flüssigkeiten ist auf die richtige Technik zu achten“, sagt Magali Gaillard, Senior Managerin für Portfoliomanagement im MLH-Geschäftsbereich bei Gilson (Villiers-le-Bel, Frankreich). „Die häufigsten Pipettierfehler sind auf den unvorsichtigen Einsatz der Pipettenspitzen, unregelmäßigen Rhythmus oder Zeitpunkt sowie unsachgemäße Handhabung der Pipette zurückzuführen.“

Manchmal wählt ein Wissenschaftler sogar die falsche Pipette. Wie Rishi Porecha, Global Product Manager beiRaininInstruments (Oakland, CA) sagt: „Einige häufige Fehler beim Pipettieren sind die Verwendung einer Pipette mit falschem Volumen für eine bestimmte Aufgabe und die Verwendung einer Luftverdrängungspipette zum Umgang mit nichtwässrigen Flüssigkeiten.“ Bei viskosen Flüssigkeiten sollte immer eine Verdrängungspipette verwendet werden.

Bevor man sich mit konkreten Pipettierverfahren befasst, sollten einige allgemeine Konzepte berücksichtigt werden. „Jedes Mal, wenn Pipettenbenutzer mit der Arbeit beginnen, sollten sie sich überlegen, welches Experiment sie durchführen, mit welchen Flüssigkeiten sie arbeiten und welchen Durchsatz sie wünschen, bevor sie eine Pipette auswählen“, sagt Porecha. „Realistisch gesehen verfügt kein Labor über alle Pipetten, die ein Benutzer benötigen könnte. Ein Blick auf die im Labor und in der Abteilung verfügbaren Werkzeuge kann jedoch eine bessere Vorstellung davon vermitteln, welche vorhandenen Pipetten für einen Test geeignet sind oder welche Pipetten sie möglicherweise kaufen möchten.“

Die Funktionen moderner Pipetten gehen über das Gerät selbst hinaus. Fortschritte im Liquid Handling ermöglichen es Anwendern, ihre Pipette mit der Cloud zu verbinden. Dank dieser Konnektivität können Anwender Protokolle herunterladen oder eigene erstellen. Pipettierdaten können sogar in der Cloud erfasst werden. Dies ist eine Möglichkeit, Fehltritte zu erkennen und den Pipettiervorgang zu verbessern, insbesondere durch die Überwachung der Genauigkeit.

Mit der richtigen Ausrüstung in der Hand besteht die nächste Herausforderung darin, die Schritte richtig auszuführen.

Schlüssel zum Erfolg

Mit einer Luftverdrängungspipette erhöhen die folgenden Schritte die Wahrscheinlichkeit, ein bestimmtes Volumen genau und wiederholt zu messen:

1. Stellen Sie das Volumen an der Pipette ein.
2. Drücken Sie den Kolben.
3. Tauchen Sie die Spitze bis zur richtigen Tiefe ein, die je nach Pipette und Spitze variieren kann, und lassen Sie den Kolben sanft in seine Ruheposition gleiten.
4. Warten Sie etwa eine Sekunde, bis die Flüssigkeit in denTipp.
5. Setzen Sie die Pipette – in einem Winkel von 10–45 Grad gehalten – an die Wand der Aufnahmekammer und drücken Sie den Kolben sanft bis zum ersten Anschlag nach unten.
6. Warten Sie eine Sekunde und drücken Sie dann den Kolben bis zum zweiten Anschlag nach unten.
7. Schieben Sie die Spitze an der Gefäßwand nach oben, um die Pipette zu entfernen.
8. Lassen Sie den Kolben in seine Ruheposition zurückkehren.