Co jsou kryozkumavky?
Kryogenní skladovací lahvičkyKryolahvičky jsou malé, uzavřené a válcovité nádoby určené pro skladování a konzervaci vzorků při ultranízkých teplotách. Ačkoli se tyto lahvičky tradičně vyráběly ze skla, nyní se z důvodu pohodlí a nákladů mnohem častěji vyrábějí z polypropylenu. Kryolahvičky byly pečlivě navrženy tak, aby odolaly teplotám až -196 °C a aby pojaly širokou škálu typů buněk. Ty se pohybují od diagnostických kmenových buněk, mikroorganismů, primárních buněk až po zavedené buněčné linie. Kromě toho mohou být v nich uloženy i malé mnohobuněčné organismy.kryogenní skladovací lahvičky, stejně jako nukleové kyseliny a proteiny, které je třeba skladovat při kryogenních teplotách.
Kryogenní skladovací lahvičky se dodávají v různých formách a nalezení správného typu, který splňuje všechny vaše potřeby, zajistí, že zachováte integritu vzorku, aniž byste museli přeplatit. Přečtěte si náš článek a dozvíte se více o klíčových faktorech, které je třeba zvážit při výběru správné kryogenní lahvičky pro vaši laboratorní aplikaci.
Vlastnosti kryogenní lahvičky, které je třeba zvážit
Vnější vs. vnitřní závity
Lidé se často rozhodují na základě osobních preferencí, ale ve skutečnosti existují klíčové funkční rozdíly, které je třeba mezi těmito dvěma typy nití zvážit.
Mnoho laboratoří se často rozhodne pro lahvičky s vnitřním závitem, aby minimalizovaly prostor pro uložení zkumavek a umožnily lepší uložení do mrazicích boxů. Navzdory tomu můžete zvážit, že varianta s vnějším závitem je pro vás lepší volbou. Jsou považovány za méně rizikové kvůli konstrukci, která ještě více ztěžuje vstup čehokoli jiného než vzorku do lahvičky.
Pro genomické aplikace se obecně preferují lahvičky s vnějším závitem, ale obě možnosti jsou považovány za vhodné pro biobankovnictví a další aplikace s vysokou propustností.
Poslední věc, kterou je třeba zvážit ohledně závitování – pokud vaše laboratoř používá automatizaci, možná budete muset zvážit, jaký závit lze použít s chapadly nástrojů.
Objem úložiště
Kryogenní lahvičky jsou k dispozici v různých velikostech, aby pokryly většinu potřeb, ale většinou se pohybují mezi 1 ml a 5 ml.
Klíčem je zajistit, aby kryozkumavka nebyla přeplněná a aby byl k dispozici dostatek místa pro případ, že by vzorek při mrazení nabobtnal. V praxi to znamená, že laboratoře volí 1ml lahvičky při skladování vzorků s 0,5 ml buněk suspendovaných v kryoprotektantu a 2ml lahvičky pro 1,0 ml vzorku. Dalším tipem, jak lahvičky nepřeplňovat, je používat kryozkumavky se stupnicí, což zabrání jakémukoli nabobtnání, které by mohlo způsobit prasknutí nebo únik.
Šroubovací uzávěr vs. odklápěcí uzávěr
Typ uzávěru, který si vyberete, závisí hlavně na tom, zda budete používat kapalný dusík, či nikoli. Pokud ano, budete potřebovat kryozkumavky se šroubovacím uzávěrem. Tím je zajištěno, že se nemohou náhodně otevřít v důsledku nesprávné manipulace nebo změn teploty. Šroubovací uzávěry navíc umožňují snadnější vyjímání z kryogenních boxů a efektivnější skladování.
Pokud však nepoužíváte kapalný dusík a potřebujete pohodlnější a snadněji otevíratelný uzávěr, pak je lepší volbou odklápěcí uzávěr. Ušetří vám to spoustu času, protože se mnohem snadněji otevírá, což je obzvláště užitečné ve vysokokapacitních provozech a v těch, které používají dávkové procesy.
Bezpečnostní pečeť
Nejlepším způsobem, jak zajistit bezpečné utěsnění, je ujistit se, že víčko kryolahvičky a lahvička jsou vyrobeny ze stejného materiálu. Tím se zajistí, že se budou smršťovat a roztahovat současně. Pokud jsou vyrobeny z různých materiálů, budou se s měnící se teplotou smršťovat a roztahovat různou rychlostí, což povede ke vzniku mezer a možnému úniku a následné kontaminaci.
Některé společnosti nabízejí dvojité podložky a přírubu pro nejvyšší úroveň zabezpečení vzorku u kryozkumavek s vnějším závitem. Kryozkumavky s O-kroužkem jsou považovány za nejspolehlivější pro kryozkumavky s vnitřním závitem.
Sklo vs. plast
Z bezpečnostních a praktických důvodů nyní mnoho laboratoří používá plast, obvykle polypropylen, místo tepelně svařitelných skleněných ampulí. Skleněné ampule jsou nyní považovány za zastaralou volbu, protože během procesu svařování se mohou vytvořit neviditelné otvory v ampuli, které po rozmrazení po skladování v tekutém dusíku mohou způsobit jejich explozi. Také nejsou tak vhodné pro moderní techniky označování, které jsou klíčové pro zajištění sledovatelnosti vzorku.
Samostatně stojící vs. zaoblené dno
Kryogenní lahvičky jsou k dispozici buď jako samostatně stojící s hvězdicovým dnem, nebo jako zaoblené dna. Pokud potřebujete lahvičky umístit na povrch, ujistěte se, že zvolíte samostatně stojící variantu.
Sledovatelnost a sledování vzorků
Tato oblast kryogenního skladování je často přehlížena, ale sledování a sledovatelnost vzorků je klíčovým aspektem, který je třeba zvážit. Kryogenní vzorky lze skladovat po mnoho let, během nichž se může personál měnit a bez řádně vedených záznamů se mohou stát neidentifikovatelnými.
Ujistěte se, že vybíráte lahvičky, které co nejvíce usnadňují identifikaci vzorku. Mezi věci, na které byste si měli dát pozor, patří:
Velké plochy pro psaní pro zaznamenání dostatečných podrobností, aby bylo možné záznamy najít, pokud se lahvička nachází na nesprávném místě – obvykle postačí identita buňky, datum zmrazení a iniciály odpovědné osoby.
Čárové kódy pro podporu systémů správy a sledování vzorků
Barevné čepice
Poznámka do budoucna – vyvíjejí se čipy odolné vůči extrémně nízkým teplotám, které by po umístění do jednotlivých kryozkumavek mohly potenciálně ukládat podrobnou tepelnou historii a také podrobné informace o šaržích, výsledky testů a další relevantní dokumentaci o kvalitě.
Kromě zvážení různých specifikací dostupných lahviček je třeba zvážit i technický proces skladování kryolahviček v tekutém dusíku.
Skladovací teplota
Existuje několik metod kryogenního skladování vzorků, z nichž každá pracuje při specifické teplotě. Mezi možnosti a teploty, při kterých pracují, patří:
Kapalná fáze LN2: udržujte teplotu -196 ℃
Plynné LN2: jsou schopny provozu při specifických teplotních rozsazích mezi -135 °C a -190 °C v závislosti na modelu.
Mrazničky s dusíkovou parou: -20 °C až -150 °C
Typ ukládaných buněk a preferovaná metoda ukládání výzkumníkem určí, kterou ze tří dostupných možností vaše laboratoř použije.
Vzhledem k extrémně nízkým teplotám však ne všechny zkumavky nebo provedení budou vhodné nebo bezpečné. Materiály se mohou při extrémně nízkých teplotách stát extrémně křehkými, takže použití lahvičky, která není vhodná pro použití při zvolené teplotě, může způsobit rozbití nebo prasknutí nádobky během skladování nebo rozmrazování.
Pečlivě si prostudujte doporučení výrobce ohledně správného použití, protože některé kryogenní lahvičky jsou vhodné pro teploty až -175 °C, některé -150 °C, jiné pouze 80 °C.
Za zmínku také stojí, že mnoho výrobců uvádí, že jejich kryogenní lahvičky nejsou vhodné pro ponoření do kapalné fáze. Pokud jsou tyto lahvičky skladovány v kapalné fázi po návratu na pokojovou teplotu, mohou se tyto lahvičky nebo jejich uzávěry roztříštit v důsledku rychlého nárůstu tlaku způsobeného malými netěsnostmi.
Pokud mají být buňky skladovány v kapalné fázi tekutého dusíku, zvažte skladování buněk ve vhodných kryogenních lahvičkách tepelně zatavených v kryoflexních trubicích nebo skladování buněk v hermeticky uzavřených skleněných ampulích.
Čas zveřejnění: 25. listopadu 2022