קריאָוויאַלסווערן אָפט געניצט פֿאַר די קריאָגעניק סטאָרידזש פון צעל ליניעס און אנדערע קריטישע ביאָלאָגישע מאַטעריאַלן, אין דיוואַרס אָנגעפילט מיט פליסיקן שטיקשטאָף.

עס זענען דא עטלעכע שטאפלען פארמישט אין דער ערפאלגרייכער פּרעזערוואַציע פון ​​צעלן אין פליסיקן שטיקשטאָף. כאָטש דער גרונטפּרינציפּ איז אַ לאַנגזאַמע איינפֿרירן, די גענויע טעכניק וואָס ווערט גענוצט דעפּענדס אויף דעם צעל טיפּ און קריאָפּראָטעקטאַנט וואָס ווערט גענוצט. עס זענען דא עטלעכע זיכערהייט באַטראַכטונגען און בעסטע פּראַקטיקעס צו נעמען אין באַטראַכט ווען מען סטאָרירט צעלן ביי אַזעלכע נידעריקע טעמפּעראַטורן.

דיזער אַרטיקל צילט צו געבן אַן איבערבליק פון ווי קריאָוויאַלן ווערן געהאלטן אין פליסיקן שטיקשטאָף.

וואָס זענען קריאָוויאַלס

קריאָוויאַלן זענען קליינע, פֿאַרמאַכטע וויאַלן וואָס זענען דיזיינד פֿאַר אויפֿהיטן פֿליסיקע מוסטערן ביי גאָר נידעריקע טעמפּעראַטורן. זיי זיכערן אַז צעלן וואָס זענען אויפֿגעהיט אין קריאָפּראָטעקטאַנט קומען נישט אין דירעקטן קאָנטאַקט מיטן פֿליסיקן שטיקשטאָף, מינימיזירנדיק דעם ריזיקאָ פֿון צעלולאַרע בראָכן בשעת זיי נאָך נוצן דעם עקסטרעמען קילן עפֿעקט פֿון פֿליסיקן שטיקשטאָף.

די פלעשלען זענען געוויינטלעך פֿאַראַן אין אַ קייט פֿון וואַליומען און דיזיינען – זיי קענען זיין אינעווייניק אָדער אויסווייניק פֿאַרפֿעדערט מיט פֿלאַכע אָדער קייַלעכדיקע דנאָס. סטערילע און נישט-סטערילע פֿאָרמאַטן זענען אויך פֿאַראַן.

ווער ניצטסיראָוויאַלסצו האַלטן צעלן אין פליסיקן שטיקשטאָף

א רייע NHS און פּריוואַטע לאַבאָראַטאָריעס, ווי אויך פאָרשונג אינסטיטוציעס וואָס ספּעציאַליזירן זיך אין שנור בלוט באַנקינג, עפּיטעליאַל צעל ביאָלאָגיע, ימיונאָלאָגיע און סטעם צעל ביאָלאָגיע נוצן קריאָוויאַלס צו קריאָפּרעזערווירן צעלן.

צעלן וואָס ווערן אויף דעם וועג פּרעזערווירט אַרייַננעמען B און T צעלן, CHO צעלן, העמאַטאָפּאָיעטיק סטעם און פּראָגעניטאָר צעלן, היברידאָמאַס, אינטעסטינאַל צעלן, מאַקראָפאַגעס, מעזענטשימאַל סטעם און פּראָגעניטאָר צעלן, מאָנאָסיטעס, מיעלאָמאַ, NK צעלן און פּלוריפּאָטענט סטעם צעלן.

איבערבליק פון ווי אזוי צו סטאָרירן קריאָוויאַלס אין פליסיקן ניטראָגען

קריאָפּרעזערוואַציע איז אַ פּראָצעס וואָס פּרעזערווירט צעלן און אַנדערע ביאָלאָגישע קאָנסטרוקציעס דורך זיי אָפּקילן צו זייער נידעריקע טעמפּעראַטורן. צעלן קענען ווערן געהאַלטן אין פליסיקן שטיקשטאָף פֿאַר יאָרן אָן פֿאַרלוסט פֿון צעל-לעבנספֿעיִקייט. דאָס איז אַן איבערבליק פֿון די פּראָצעדורן וואָס ווערן גענוצט.

צעל צוגרייטונג

די גענויע מעטאָדע פֿאַר צוגרייטן מוסטערן וועט ווערירן לויטן צעל טיפּ, אָבער בכלל ווערן די צעלן געזאַמלט און צענטריפוגירט צו אַנטוויקלען אַ צעל-רייַך פּעלעט. דער פּעלעט ווערט דערנאָך ווידער אויפגעהענגט אין דעם סופּערנאַטאַנט געמישט מיט קריאָפּראָטעקטאַנט אָדער אַ קריאָפּרעזערוואַציע מעדיום.

קריאָפּרעזערוואַציע מיטל

די מעדיום ווערט גענוצט צו באַוואָרן צעלן אין די נידעריק-טעמפּעראַטור סביבות צו וועלכע זיי וועלן זיין אונטערטעניק דורך פאַרהיטן די פאָרמירונג פון אינטראַ און עקסטראַסעלולאַר קריסטאַלן און דערמיט צעל טויט. זייער ראָלע איז צו צושטעלן אַ זיכער, פּראַטעקטיוו סביבה פֿאַר צעלן און געוועבן בעשאַס די פרירן, סטאָרידזש און אויפֿטאָען פּראָצעסן.

א מעדיום ווי פריש געפרוירענע פּלאַזמע (FFP), העפּאַריניזירטע פּלאַזמאַליט לייזונג אָדער סערום-פֿרייע, כייַע-פֿרייע קאָמפּאָנענטן לייזונגען ווערט געמישט מיט קריאָפּראָטעקטאַנץ ווי דימעטהיל סולפֿאָקסייד (DMSO) אָדער גליסעראָל.

דער ווידער-פליסיקער מוסטער פּעלעט ווערט אַליקוואָטירט אין פּאָליפּראָפּילען קריאָוויאַלן וויסוזשאָו אַס ביאָמעדיקאַל פירמע קריאָגעניק סטאָרידזש ווייאַלז.

עס איז וויכטיג נישט צו איבערפילן די קריאָוויאַלן ווייל דאָס וועט פאַרגרעסערן דעם ריזיקאָ פון ריסן און די מעגלעכקייט פון ארויסלאָזן אינהאַלט (1).

קאָנטראָלירטע פריז ראַטע

בכלל, ווערט א לאנגזאמע קאנטראלירטע פריז ראטע גענוצט פאר דער ערפאלגרייכער קריאפרעזערוואציע פון ​​צעלן.

נאכדעם וואס די מוסטערן ווערן צוטיילט אין קריאגענישע פלעשלען, ווערן זיי געלייגט אויף נאסן אייז אדער אין א 4°C פרידזשידער און די איינפרירן פראצעדור ווערט אנגעהויבן אין 5 מינוט. אלס אן אלגעמיינע אנווייזונג, ווערן די צעלן אפגעקילט מיט א ראטע פון ​​-1 ביז -3 פער מינוט (2). דאס ווערט דערגרייכט מיט א פראגראמירבארן קילער אדער דורך לייגן די פלעשלען אין אן איזאלירטע שאכטל וואס ווערט געשטעלט אין א -70°C ביז -90°C קאנטראלירטער ראטע פריזער.

איבערפירן צו פליסיקן שטיקשטאָף

די געפֿרוירענע קריאָגענישע פֿלעשלען ווערן דערנאָך איבערגעפֿירט צו אַ פֿליסיקן שטיקשטאָף טאַנק פֿאַר אומבאַשטימטע פּעריאָדן, צוגעשטעלט אַז אַ טעמפּעראַטור פֿון ווייניקער ווי -135 ℃ ווערט געהאַלטן.

די אולטרא-נידעריקע טעמפּעראַטורן קענען באַקומען ווערן דורך אײַנטונקען אין דער פליסיקער אָדער פארע-פאַזע שטיקשטאָף.

פליסיקע אדער פארע פאזע?

סטאָרידזש אין פליסיקער פאַזע שטיקשטאָף איז באַקאַנט צו האַלטן די קאַלטע טעמפּעראַטור מיט אַבסאָלוטער קאָנסיסטענץ, אָבער איז אָפט נישט רעקאָמענדירט פֿאַר די פאלגענדע סיבות:

• די נויטווענדיקייט פֿאַר גרויסע באַנדן (טיפֿקייט) פֿון פֿליסיקן שטיקשטאָף, וואָס איז אַ פּאָטענציעלע געפֿאַר. פֿאַרברענטקייט אָדער דערשטיקונג צוליב דעם איז אַן עכטער ריזיקע.
• דאקומענטירטע פעלער פון קראָס-קאַנטאַמאַניישאַן דורך ינפעקטיאָוס אַגענטן ווי אַספּערגיללוס, העפּ ב און ווירוס פאַרשפּרייטונג דורך די פליסיק ניטראָגען מעדיום (2,3)
• די מעגלעכקייט אז פליסיגע שטיקשטאף זאל אריינרינען אין די פלעשללעך בעתן איינטונקען. ווען מען נעמט עס ארויס פון סטאָרידזש און מען ווארעמט עס צו צימער טעמפעראטור, פארברייטערט זיך דער שטיקשטאף שנעל. דערפאר קען דער פלעשל זיך צעברעכן ווען מען נעמט עס ארויס פון פליסיגע שטיקשטאף סטאָרידזש, וואס שאפט א געפאר פון ביידע פליענדיקע דעבריס און אויסשטעלונג צו די אינהאלט (1, 4).

צוליב די סיבות, איז אולטרא-נידעריגע טעמפעראטור סטאָרידזש מערסטנס אין פארע-פאַזע שטיקשטאָף. ווען מוסטערן מוזן זיין געהאלטן אין דער פליסיקער פאַזע, זאָל מען נוצן ספּעציעלע קריאָפלעקס טובינג.

דער חסרון פון דער פארע-פאזע איז אז א ווערטיקאלער טעמפעראטור-גראדיענט קען פארקומען, וואס רעזולטירט אין טעמפעראטור-פלאקטואציעס צווישן -135℃ און -190℃. דאס פארלאנגט א פארזיכטיקע און פלייסיגע אויפזיכט פון די פליסיגע שטיקשטאף לעוועלס און טעמפעראטור-וועריאציעס (5).

פילע פאַבריקאַנטן רעקאָמענדירן אַז קריאָוויאַלן זענען פּאַסיק פֿאַר סטאָרידזש ביז -135℃ אָדער פֿאַר נוצן בלויז אין דער פארע פאַזע.

אויפטויען אייערע קריאָפּרעזערווירטע צעלן

די אויפטויען פּראָצעדור איז סטרעספול פֿאַר אַ פֿאַרפֿרוירענע קולטור, און געהעריקע האַנדלונג און טעכניק איז נויטיק צו ענשור אָפּטימאַלע לעבנספֿעיִקייט, אָפּזוך און פֿונקציאָנאַליטעט פֿון די צעלן. די גענויע אויפטויען פּראָטאָקאָלן וועלן אָפענגען פֿון ספּעציפֿישע צעל טיפּן. אָבער, שנעל אויפטויען ווערט באַטראַכט ווי נאָרמאַל צו:

• פאַרקלענערן יעדן השפּעה אויף צעלולער אָפּזוך
• העלפֿן רעדוצירן די אויסשטעל צייט צו די סאָלוטעס פאָרשטעלן אין די פרירן מעדיע
• מינימיזירן יעדן שאדן דורך אייז רעקריסטאַליזאַציע

וואַסער בעדער, קרעל בעדער, אָדער ספּעציאַליזירטע אָטאָמאַטישע אינסטרומענטן ווערן געוויינטלעך געניצט צו אויפֿטאָען מוסטערן.

רובֿ מאָל ווערט 1 צעל ליניע אויפֿגעטאָט פֿאַר 1-2 מינוט, דורך זיי לײַכט דרייען אין אַ 37℃ וואַסער באָד ביז עס איז נאָר אַ קליין ביסל אײַז געבליבן אין דער פֿלאַש איידער זיי ווערן געוואַשן אין אַ פֿאָרוואַרעמען וואוקס מעדיום.

פֿאַר עטלעכע צעלן, ווי למשל זויגערס עמבריאָס, איז אַ לאַנגזאַמע אָפּוואַרעמונג וויכטיק פֿאַר זייער איבערלעבן.

די צעלן זענען איצט גרייט פֿאַר צעל קולטור, צעל איזאָלאַציע, אָדער אין פאַל פון העמאַטאָפּאָיעטיק סטעם צעלן – ווייאַבילאַטי שטודיעס צו גאַראַנטירן די אָרנטלעכקייט פון די דאָנאָר סטעם צעלן איידער מיעלאָבלאַטיוו טעראַפּיע.

עס איז נאָרמאַלע פּראַקטיק צו נעמען קליינע אַליקוואָץ פון די פאַר-געוואַשענע מוסטער געניצט צו דורכפירן אַ צעל ציילן צו באַשטימען צעל קאַנסאַנטריישאַנז פֿאַר פּלאַטינג אין קולטור. איר קענט דעמאָלט אַססעסס די רעזולטאַטן פון צעל אפגעזונדערטקייט פּראָצעדורן און באַשטימען צעל ווייאַבילאַטי.

בעסטע פּראַקטיקעס פֿאַר די סטאָרידזש פון קריאָוויאַלס

די געראָטענע קריאָפּרעזערוואַציע פון ​​מוסטערן וואָס זענען געהיט אין קריאָוויאַלן דעפּענדס אויף פילע עלעמענטן אין דעם פּראָטאָקאָל, אַרייַנגערעכנט געהעריקע סטאָרידזש און רעקאָרד-האַלטונג.

• שפּאַלטן צעלן צווישן סטאָרידזש לאָוקיישאַנז– אויב די וואָלומען ערלויבן, צעטיילט די צעלן צווישן די פלעשל און לייגט זיי אַוועק אין באַזונדערע לאָקאַציעס צו רעדוצירן דעם ריזיקאָ פון מוסטער-פאַרלוסט צוליב עקוויפּמענט-פאַרפעלער.
• פאַרהיטן קראָס-קאַנטאַמאַניישאַן– אויסקלויבן איין-מאל-באנוץ סטערילע קריאגענישע וויאלן אדער אויטאקלאוו פארן שפעטערדיגן באנוץ
• ניצט פּאַסיק גרייס פֿלעשלס פֿאַר אייערע צעלן– פלעשלען קומען אין פארשידענע פארנעם צווישן 1 און 5 מל. פארמיידט איבערפילן די פלעשלען כדי צו רעדוצירן דעם ריזיקע פון ​​ריסן.
• אויסקלייבן אינערלעכע אדער אויסערלעכע פארשטאפטע קריאגענישע ווייאַלס– אינעווייניק געווינדעטע פלעשללעך ווערן רעקאמענדירט דורך עטלעכע אוניווערסיטעטן פאר זיכערהייט מיטלען – זיי קענען אויך פארמיידן קאנטאמינאציע בעתן פילן אדער ווען זיי ווערן געהאלטן אין דעם פליסיגן שטיקשטאף.
• פאַרהיטן ליקאַדזש- ניצט ביי-אינדזשעקטעד סילינגז וואָס זענען געגאסן אין די שרויף-קאַפּ אָדער אָ-רינגס צו פאַרמייַדן ליקינג און קאַנטאַמאַניישאַן.
• ניצט 2D באַרקאָודז און לייבאַל ווייאַלס– כדי צו זיכער מאַכן אַז מען קען עס טרעיסן, קענען די פלעשל מיט גרויסע שרייב-פלעצער זיין פּאַסיק באַצייכנט מיט יעדן פלעשל. 2D באַרקאָודז קענען העלפֿן מיט סטאָרידזש פאַרוואַלטונג און רעקאָרד האַלטן. קאָליר-קאָדירטע קאַפּס זענען נוצלעך פֿאַר גרינגער אידענטיפֿיקאַציע.
• גענוג סטאָרידזש וישאַלט- כדי צו זיכער מאַכן אַז צעלן גייען נישט פאַרלוירן, זאָלן סטאָרידזש כלים קעסיידער מאָניטאָרירן די טעמפּעראַטור און די לעוועלס פון פליסיקן שטיקשטאָף. אַלאַרמען זאָלן אינסטאַלירט ווערן צו וואָרענען באַניצער וועגן ערראָרס.

זיכערהייט פאָרזיכטיגקייטן

פליסיקער שטיקשטאָף איז געוואָרן געוויינטלעך אין מאָדערנער פאָרשונג אָבער טראָגט דעם ריזיקאָ פון ערנסטע שאָדן אויב עס ווערט נישט ריכטיק גענוצט.

מען זאָל טראָגן געהעריקע פערזענלעכע שוץ-עקוויפּמענט (PPE) צו מינימיזירן דעם ריזיקאָ פון פראָסטבייט, ברענט און אַנדערע נעגאַטיווע אינצידענטן ווען מען האַנדלט מיט פליסיקן שטיקשטאָף.

• קריאָגעניק הענטשקעס
• לאַבאָראַטאָריע מאַנטל
• קלאַפּ-קעגנשטעליק פול פּנים שילד וואָס דעקט אויך דעם האַלדז
• פֿאַרמאַכטע שיך
• שפּריץ-באַשטענדיק פּלאַסטיק פאַרטוך

פליסיקע שטיקשטאָף רעפרידזשערייטערז זאָלן געשטעלט ווערן אין גוט-ווענטילירטע געביטן צו מינימיזירן דעם ריזיקאָ פון דערשטיקונג - אַנטלאָפענע שטיקשטאָף פארדאַמפּט און פֿאַרטרייבט אַטמאָספערישן זויערשטאָף. גרויסע סטאָרז זאָלן האָבן נידעריק זויערשטאָף אַלאַרם סיסטעמען.

ארבעטן אין פּאָרן ווען מען האַנדלט מיט פליסיגע שטיקשטאָף איז ידעאַל און זיין נוצן אַרויס פון נאָרמאַלע אַרבעט שעה זאָל זיין פאַרווערט.

קריאָוויאַלס צו שטיצן אייער וואָרקפלאָו

סוזשאָו עיס ביאָמעדיקאַל פירמע אָפפערט אַ ברייטע סעלעקציע פון ​​פּראָדוקטן וואָס טרעפן אייערע קריאָפּרעזערוואַציע באדערפענישן פֿאַר פֿאַרשידענע טיפּן צעלן. די פּאָרטפאָליאָ כולל אַ קייט פון טובז און אויך אַ קייט פון סטערילע קריאָוויאַלס.

אונדזערע קריאָוויאַלן זענען:

• לאַבאָראַטאָריע שרויף קאַפּ 0.5 מל 1.5 מל 2.0 מל קריאָוויאַל קריאָגעניק וויאַלס קאָניקאַל דנאָ קריאָטובע מיט גאַסקעט

  ● 0.5 מל, 1.5 מל, 2.0 מל ספּעציפֿיקאַציע, מיט ראק אָדער אָן ראק
  ● קאָניש אָדער זעלבסטשטענדיק פּלאַן, סטעריל אָדער ניט-סטעריל זענען ביידע בנימצא
  ● שרויף קאַפּ רערן זענען געמאַכט פון מעדיציניש גראַד פּאָליפּראָפּילען
  ● פּפּ קריאָטובע וויאַלס קענען זיין ריפּיטידלי געפרוירן און אויפגעטאָ
  ● דער אויסערלעכער דעקל פּלאַן קען רעדוצירן די קאַנטאַמאַניישאַן וואַרשיינלעכקייט בעשאַס מוסטער באַהאַנדלונג.
  ● שרויף דעקל קריאָגעניק רערן אוניווערסאַל שרויף פֿעדעם פֿאַר באַניץ
  ● רערן פּאַסן פֿאַר די מערסט געוויינטלעכע ראָטאָרן
  ● קריאָגעניק רער אָ-רינג רערן פּאַסן נאָרמאַל 1-אינטש און 2-אינטש, 48 וועלל, 81 וועלל, 96 וועלל און 100 וועלל פריזער באָקסעס
  ● אויטאקלאַווירבאר ביז 121°C און איינפֿרירבאר ביז -86°C

  טייל נומער	מאַטעריאַל	באַנד	קאַפּקאָליר	פּקס/זאַק	זעקלעך/קעסטל
  ACT05-BL-N	PP	0.5 מל	שוואַרץ, געל, בלוי, רויט, לילאַ, ווייס	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5 מל	שוואַרץ, געל, בלוי, רויט, לילאַ, ווייס	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5 מל	שוואַרץ, געל, בלוי, רויט, לילאַ, ווייס	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0 מל	שוואַרץ, געל, בלוי, רויט, לילאַ, ווייס	500	10