Що таке кріопробірки?
Кріогенні флакони для зберіганняКріопробірки – це невеликі циліндричні контейнери з кришками, призначені для зберігання та консервації зразків за наднизьких температур. Хоча традиційно ці флакони виготовлялися зі скла, зараз їх набагато частіше виготовляють з поліпропілену з міркувань зручності та вартості. Кріопробірки були ретельно розроблені, щоб витримувати температури до -196℃ та вміщувати широкий спектр типів клітин. Вони варіюються від діагностичних стовбурових клітин, мікроорганізмів, первинних клітин до усталених клітинних ліній. Крім того, всередині можуть зберігатися також невеликі багатоклітинні організми.кріогенні флакони для зберігання, а також нуклеїнові кислоти та білки, які необхідно зберігати за кріогенних температур зберігання.
Кріогенні флакони для зберігання бувають різних форм, і вибір правильного типу, який відповідає всім вашим потребам, забезпечить збереження цілісності зразка без переплати. Прочитайте нашу статтю, щоб дізнатися більше про ключові моменти, які слід враховувати під час вибору правильного кріопробірки для вашого лабораторного застосування.
Властивості кріогенної пробірки, які слід враховувати
Зовнішня та внутрішня різьба
Люди часто роблять цей вибір, виходячи з особистих уподобань, але насправді існують ключові функціональні відмінності, які слід враховувати між цими двома типами різьби.
Багато лабораторій часто обирають флакони з внутрішнім різьбленням, щоб мінімізувати простір для зберігання пробірок та забезпечити краще розміщення в морозильних камерах. Незважаючи на це, ви можете вважати, що варіант із зовнішнім різьбленням є кращим для вас. Вважається, що вони несуть менший ризик забруднення через конструкцію, яка ще більше ускладнює потрапляння будь-чого, крім зразка, у флакон.
Флакони із зовнішнім різьбленням зазвичай переважні для геномних застосувань, але будь-який з варіантів вважається придатним для біобанкінгу та інших високопродуктивних застосувань.
І останнє, що слід врахувати щодо нарізання різьби: якщо у вашій лабораторії використовується автоматизація, вам може знадобитися врахувати, яку різьбу можна використовувати з інструментальними захватами.
Об'єм сховища
Кріогенні флакони доступні в різних розмірах, щоб задовольнити більшість потреб, але здебільшого їхня місткість коливається від 1 мл до 5 мл.
Головне — переконатися, що ваш кріопробірник не переповнений і що є додаткове місце на випадок, якщо зразок набухне під час заморожування. На практиці це означає, що лабораторії обирають флакони об’ємом 1 мл для зберігання зразків об’ємом 0,5 мл клітин, суспендованих у кріопротекторі, та флакони об’ємом 2,0 мл для зберігання 1,0 мл зразка. Ще одна порада щодо запобігання переповненню флаконів — використовувати кріопробірки з градуйованими позначками, що гарантовано запобіжить будь-якому набуханню, яке може спричинити розтріскування або протікання.
Гвинтова кришка проти відкидної кришки
Тип кришки, яку ви оберете, залежить головним чином від того, чи будете ви використовувати рідкий азот, чи ні. Якщо так, то вам знадобляться кріопробірки з гвинтовими кришками. Це гарантує, що вони випадково не відкриються через неправильне поводження або перепади температури. Крім того, гвинтові кришки дозволяють легше діставати криогенні контейнери та ефективніше зберігати.
Однак, якщо ви не використовуєте рідкий азот і вам потрібна зручніша кришка, яку легше відкривати, то відкидна кришка — кращий варіант. Це заощадить вам багато часу, оскільки її набагато легше відкривати, що робить її особливо корисною в операціях з високою продуктивністю та тих, що використовують періодичні процеси.
Безпека печатки
Найкращий спосіб забезпечити надійну герметизацію – переконатися, що кришка кріопробірки та пляшка виготовлені з одного й того ж матеріалу. Це забезпечить їх синхронне стиснення та розширення. Якщо вони виготовлені з різних матеріалів, то вони будуть стискатися та розширюватися з різною швидкістю залежно від зміни температури, що призведе до появи щілин, потенційного протікання та подальшого забруднення.
Деякі компанії пропонують подвійні шайби та фланець для найвищого рівня безпеки зразків на кріопробірках із зовнішнім різьбленням. Кріопробірки з кільцем ущільнювача вважаються найнадійнішими для кріопробілок із внутрішнім різьбленням.
Скло проти пластику
Для безпеки та зручності багато лабораторій зараз використовують пластик, зазвичай поліпропілен, замість скляних ампул, що герметизуються термозварюванням. Скляні ампули зараз вважаються застарілим вибором, оскільки під час процесу зварювання можуть утворюватися невидимі протікання через тонкі отвори, які при розморожуванні після зберігання в рідкому азоті можуть призвести до їх вибуху. Вони також не так добре підходять для сучасних методів маркування, що є ключовим для забезпечення відстеження зразків.
Самостоячі проти заокруглених днищ
Кріогенні флакони доступні як окремостоячі з дном у формі зірки, так і із заокругленим дном. Якщо вам потрібно розмістити флакони на поверхні, обов’язково оберіть окремостоячий варіант.
Відстеження та відстеження зразків
Цей аспект кріогенного зберігання часто ігнорується, але відстеження та простежуваність зразків є вирішальним аспектом, який слід враховувати. Кріогенні зразки можуть зберігатися протягом багатьох років, протягом яких персонал може змінюватися, а без належного ведення обліку вони можуть стати неідентифікованими.
Переконайтеся, що ви вибрали флакони, які максимально спрощують ідентифікацію зразка. На що слід звернути увагу:
Великі поля для запису достатньої кількості деталей, щоб записи можна було знайти, якщо флакон знаходиться в неправильному місці – зазвичай достатньо ідентифікації клітини, дати заморожування та ініціалів відповідальної особи.
Штрих-коди для покращення систем управління зразками та відстеження
Кольорові ковпачки
Нотатка на майбутнє – розробляються надморозостійкі чіпи, які, будучи розміщені в окремих кріопробірках, потенційно можуть зберігати детальну термічну історію, а також детальну інформацію про партію, результати випробувань та іншу відповідну документацію щодо якості.
Окрім розгляду різних специфікацій доступних флаконів, також необхідно врахувати технічний процес зберігання кріопробірок у рідкому азоті.
Температура зберігання
Існує кілька методів кріогенного зберігання зразків, кожен з яких працює за певної температури. Варіанти та температура, за якої вони працюють, включають:
Рідка фаза LN2: підтримуйте температуру -196℃
Парофазний LN2: здатний працювати в певних діапазонах температур від -135°C до -190°C залежно від моделі.
Азотні морозильні камери: від -20°C до -150°C
Тип клітин, що зберігаються, та бажаний дослідником метод зберігання визначатимуть, який із трьох доступних варіантів використовуватиме ваша лабораторія.
Однак, через надзвичайно низькі температури, що використовуються, не всі пробірки чи конструкції будуть придатними або безпечними. Матеріали можуть стати надзвичайно крихкими за надзвичайно низьких температур, використання флакона, непридатного для використання за обраної температури, може призвести до руйнування або розтріскування посудини під час зберігання або розморожування.
Уважно перевірте рекомендації виробників щодо правильного використання, оскільки деякі кріогенні флакони підходять для температур до -175°C, деякі -150°C, інші - лише 80°C.
Варто також зазначити, що багато виробників стверджують, що їхні кріогенні флакони не підходять для занурення в рідку фазу. Якщо ці флакони зберігаються в рідкій фазі після повернення до кімнатної температури, ці флакони або їхні кришки можуть розірватися через швидке нарощування тиску, спричинене невеликими витоками.
Якщо клітини зберігатимуться в рідкій фазі рідкого азоту, розгляньте можливість зберігання клітин у відповідних кріогенних флаконах, герметично запаяних у кріофлексні трубки, або зберігання клітин у скляних ампулах, які герметично закриті.
Час публікації: 25 листопада 2022 р.