Ce sunt criofiolele?
Flacoane de depozitare criogenicăsunt recipiente mici, cu capac și cilindrice, concepute pentru depozitarea și conservarea probelor la temperaturi extrem de scăzute. Deși în mod tradițional aceste flacoane erau fabricate din sticlă, acum sunt mult mai frecvent fabricate din polipropilenă din motive de comoditate și cost. Criofiolele au fost proiectate cu atenție pentru a rezista la temperaturi de până la -196 ℃ și pentru a găzdui o mare varietate de tipuri de celule. Acestea variază de la celule stem de diagnostic, microorganisme, celule primare până la linii celulare stabilite. Dincolo de acestea, pot exista și organisme multicelulare mici care sunt depozitate în interior.fiole de depozitare criogenică, precum și acid nucleic și proteine care trebuie depozitate la temperaturi criogenice.
Flacoanele de stocare criogenică sunt disponibile în diverse forme diferite, iar găsirea tipului corect care să îndeplinească toate nevoile dumneavoastră vă va asigura menținerea integrității probei fără a plăti prea mult. Citiți articolul nostru pentru a afla mai multe despre principalele aspecte de cumpărare atunci când selectați flaconul criogenic potrivit pentru aplicația dumneavoastră de laborator.
Proprietățile fiolei criogenice de luat în considerare
Filete externe vs. interne
Oamenii fac adesea această alegere pe baza preferințelor personale, dar există, de fapt, diferențe funcționale cheie de luat în considerare între cele două tipuri de fire.
Multe laboratoare optează adesea pentru flacoane cu filet intern pentru a minimiza spațiul de depozitare a tuburilor și a permite o mai bună potrivire în cutiile de congelare. În ciuda acestui fapt, puteți considera că opțiunea cu filet extern este cea mai bună opțiune pentru dumneavoastră. Se consideră că acestea prezintă un risc de contaminare mai mic, datorită designului care face și mai dificilă intrarea în flacon a oricărui alt material în afară de probă.
Flacoanele cu filet exterior sunt în general preferate pentru aplicațiile genomice, dar oricare dintre opțiuni este considerată potrivită pentru biobancare și alte aplicații cu randament ridicat.
Un ultim lucru de luat în considerare la filetare – dacă laboratorul dumneavoastră folosește automatizare, este posibil să fie nevoie să luați în considerare ce filet poate fi utilizat cu cleștii de prindere a instrumentelor.
Volum de stocare
Flacoanele criogenice sunt disponibile într-o varietate de dimensiuni pentru a acoperi majoritatea nevoilor, dar în general au o capacitate cuprinsă între 1 ml și 5 ml.
Cheia este să vă asigurați că criofiala nu este umplută excesiv și că există spațiu suplimentar disponibil, în cazul în care proba se umflă în timpul congelării. În practică, aceasta înseamnă că laboratoarele optează pentru fiole de 1 ml atunci când depozitează probe de 0,5 ml de celule suspendate în crioprotector și fiole de 2,0 ml pentru 1,0 ml de probă. Un alt sfat pentru a nu umple excesiv fiolele este să utilizați criofiole cu marcaje gradate, ceea ce va asigura prevenirea oricărei umflături care ar putea provoca crăpături sau scurgeri.
Capac cu filet vs. capac rabatabil
Tipul de capac pe care îl alegeți depinde în principal de utilizarea azotului în fază lichidă. Dacă da, atunci veți avea nevoie de criofiare cu capac cu filet. Acest lucru asigură că nu se pot deschide accidental din cauza manipulării greșite sau a schimbărilor de temperatură. În plus, capacele cu filet permit o extragere mai ușoară din cutiile criogenice și o depozitare mai eficientă.
Totuși, dacă nu utilizați azot lichid și aveți nevoie de un capac mai convenabil, mai ușor de deschis, atunci un capac rabatabil este opțiunea mai bună. Acest lucru vă va economisi mult timp, deoarece este mult mai ușor de deschis, ceea ce îl face deosebit de util în operațiunile cu randament mai mare și în cele care utilizează procese în loturi.
Securitate sigiliu
Cea mai bună metodă de a asigura o etanșare sigură este să vă asigurați că atât capacul, cât și sticla criogeniei sunt fabricate din același material. Acest lucru va asigura contracția și extinderea simultană. Dacă sunt fabricate din materiale diferite, atunci se vor contracționa și extinde în rate diferite pe măsură ce temperatura se schimbă, ceea ce va duce la goluri și potențiale scurgeri și, în consecință, la contaminare.
Unele companii oferă șaibe duble și flanșe pentru cel mai înalt nivel de securitate a probelor pe criofiarele cu filet extern. Criofiarele cu inel O sunt considerate cele mai fiabile pentru criofiarele cu filet intern.
Sticlă vs. Plastic
Din motive de siguranță și comoditate, multe laboratoare folosesc acum plastic, de obicei polipropilenă, în loc de fiole de sticlă termosigilabile. Fiolele de sticlă sunt considerate acum o alegere depășită, deoarece în timpul procesului de sigilare se pot dezvolta scurgeri invizibile, de tip găuri de ac, care, atunci când sunt decongelate după depozitare în azot lichid, le pot provoca explozia. De asemenea, nu sunt la fel de potrivite pentru tehnicile moderne de etichetare, care sunt esențiale pentru asigurarea trasabilității probelor.
Funduri independente vs. funduri rotunjite
Flacoanele criogenice sunt disponibile atât în varianta autoportantă cu fund în formă de stea, cât și în varianta cu fund rotunjit. Dacă trebuie să așezați flacoanele pe o suprafață, asigurați-vă că alegeți varianta autoportantă.
Trasabilitate și urmărire a probelor
Acest domeniu al depozitării criogenice este adesea trecut cu vederea, însă urmărirea și trasabilitatea probelor reprezintă un aspect crucial de luat în considerare. Probele criogenice pot fi depozitate timp de mulți ani, perioadă în care personalul se poate schimba, iar fără evidențe ținute corespunzător, acestea pot deveni neidentificabile.
Asigurați-vă că alegeți flacoane care facilitează cât mai mult posibil identificarea probei. Printre lucrurile la care ar trebui să fiți atenți se numără:
Spații mari de scris pentru a înregistra suficiente detalii, astfel încât înregistrările să poată fi găsite dacă un flacon se află într-o locație incorectă – de obicei, identitatea celulei, data congelării și inițialele persoanei responsabile sunt suficiente.
Coduri de bare pentru a ajuta la gestionarea probelor și la sistemele de urmărire
Capace colorate
O notă pentru viitor – se dezvoltă cipuri ultra-rezistente la frig care, atunci când sunt montate în criofiole individuale, ar putea stoca un istoric termic detaliat, precum și informații detaliate despre loturi, rezultatele testelor și alte documente relevante privind calitatea.
Pe lângă luarea în considerare a diferitelor specificații ale flacoanelor disponibile, trebuie acordată o atenție și procesului tehnic de depozitare a criofiolelor în azot lichid.
Temperatura de depozitare
Există mai multe metode de depozitare criogenică a probelor, fiecare funcționând la o temperatură specifică. Opțiunile și temperatura la care funcționează includ:
Fază lichidă LN2: mențineți o temperatură de -196℃
LN2 în fază de vapori: sunt capabile să funcționeze la intervale specifice de temperatură între -135°C și -190°C, în funcție de model.
Congelatoare cu vapori de azot: -20°C până la -150°C
Tipul de celule stocate și metoda de stocare preferată de cercetător vor determina care dintre cele trei opțiuni disponibile va utiliza laboratorul dumneavoastră.
Totuși, din cauza temperaturilor extrem de scăzute utilizate, nu toate tuburile sau modelele vor fi adecvate sau sigure. Materialele pot deveni extrem de fragile la temperaturi extrem de scăzute, iar utilizarea unui flacon nepotrivit pentru utilizare la temperatura aleasă ar putea provoca spargerea sau fisurarea vasului în timpul depozitării sau decongelarii.
Verificați cu atenție recomandările producătorilor privind utilizarea corectă, deoarece unele fiole criogenice sunt potrivite pentru temperaturi de până la -175°C, unele de -150°C, altele de doar 80°C.
De asemenea, merită menționat faptul că mulți producători declară că flacoanele lor criogenice nu sunt potrivite pentru imersia în faza lichidă. Dacă aceste flacoane sunt depozitate în faza lichidă la revenirea la temperatura camerei, aceste flacoane sau sigiliul capacului lor se pot sparge din cauza acumulării rapide de presiune cauzată de scurgeri mici.
Dacă celulele urmează să fie depozitate în fază lichidă de azot lichid, se ia în considerare depozitarea celulelor în flacoane criogenice adecvate, sigilate termic în tuburi crioflex sau depozitarea celulelor în fiole de sticlă închise ermetic.
Data publicării: 25 noiembrie 2022