Krîyovîalbi gelemperî ji bo hilanîna krîyojenîk a xetên şaneyan û materyalên din ên biyolojîkî yên krîtîk, di dewarên ku bi nîtrojena şil dagirtî ne de têne bikar anîn.

Ji bo parastina serkeftî ya şaneyan di nîtrojena şil de çend qonax hene. Her çend prensîba bingehîn cemidandina hêdî be jî, teknîka rastîn a ku tê bikar anîn bi celebê şaneyê û krîoparêzkerê ku tê bikar anîn ve girêdayî ye. Dema ku şaneyan di germahiyên ewqas nizm de têne hilanîn, çend faktorên ewlehiyê û pratîkên çêtirîn hene ku divê werin hesibandin.

Armanca vê nivîsê ew e ku nihêrînek giştî li ser ka krîyovîal çawa di nîtrojena şil de têne hilanîn bide.

Cryovial çi ne?

Krîyovîyal şûşeyên piçûk û qapaxkirî ne ku ji bo hilanîna nimûneyên şil di germahiyên pir nizm de hatine çêkirin. Ew piştrast dikin ku şaneyên ku di krîyoparêzker de têne parastin rasterast bi nîtrojena şil re nakevin têkiliyê, rîska şikestina şaneyan kêm dikin û di heman demê de ji bandora sarbûna zêde ya nîtrojena şil sûd werdigirin.

Ev şûşe bi gelemperî di cûrbecûr qebare û sêwiranên cûda de hene - ew dikarin ji hundir an derveyî ve bi binî an jî bi giloverî werin pêçandin. Formatên sterîl û nesterîl jî hene.

Kî Bikar TîneCyrovialsji bo hilanîna şaneyan di nîtrojena şile de

Gelek laboratuarên NHS û yên taybet, û her weha saziyên lêkolînê yên ku di bankkariya xwîna kordonê, biyolojiya şaneyên epitelyal, îmmunolojî û biyolojiya şaneyên reh de pispor in, krîyovîalan ji bo krîyoparastina şaneyan bikar tînin.

Xaneyên bi vî rengî hatine parastin ev in: Xaneyên B û T, Xaneyên CHO, Xaneyên Bingehîn ên Hematopoietîk û Xaneyên Pêşeng, Hîbrîdom, Xaneyên Rûvî, Makrofaj, Xaneyên Bingehîn ên Mezenkîmal û Xaneyên Pêşeng, Monosît, Mîeloma, Xaneyên NK û Xaneyên Bingehîn ên Plûrîpotent.

Pêşgotinek li ser Çawaniya Hilanîna Krîyovîalan di Nîtrojena Şile de

Krîyoparastin pêvajoyek e ku hucre û avahiyên din ên biyolojîk bi sarkirina wan bo germahiyên pir nizm diparêze. Hucre dikarin bi salan di nîtrojena şil de bêyî windakirina zindîbûna hucreyan werin hilanîn. Ev kurteyek ji prosedurên ku têne bikar anîn e.

Amadekirina Hucreyê

Rêbaza rastîn a amadekirina nimûneyan li gorî celebê şaneyê diguhere, lê bi gelemperî, şane têne berhevkirin û santrifujkirin da ku peletek dewlemend bi şaneyan çêbibe. Dûv re ev pelet di nav supernatantê de ku bi krîoparêzker an jî navgînek krîoparastinê re têkelkirî ye, ji nû ve tê daliqandin.

Medyaya Krîyoparastinê

Ev navgîn ji bo parastina şaneyan di hawîrdorên germahiya nizm de tê bikar anîn, ku ew ê rastî wan werin, bi rêya astengkirina çêbûna krîstalên nav-hucreyî û derveyî-hucreyî û bi vî awayî mirina şaneyan. Rola wan ew e ku di dema pêvajoyên cemidandin, hilanîn û helandinê de ji bo hucre û tevnan hawîrdorek ewle û parastî peyda bikin.

Medyayek wek plazmaya teze ya cemidî (FFP), çareseriya plazmalîtê ya heparîzekirî an çareseriyên bê serum û bê pêkhateyên heywanan bi krîoprotektantên wek dimetîl sulfoksîd (DMSO) an glîserol re tê tevlihevkirin.

Peleta nimûneyê ya ji nû ve şilekirî di nav krîyovîyalên polîpropîlenê de tê dabeşkirin wek mînakŞîrketa Biyomedîkî ya Suzhou Ace Şûşeyên Hilanîna Krîyojenîk.

Girîng e ku krîyovîal zêde neyên tijîkirin ji ber ku ev yek dê xetera şikestinê û berdana muhtemel a naverokê zêde bike (1).

Rêjeya Cemidandina Kontrolkirî

Bi gelemperî, ji bo parastina serketî ya şaneyan rêjeyek cemidandinê ya hêdî û kontrolkirî tê bikar anîn.

Piştî ku nimûne di nav şûşeyên krîyojenîk de tên dabeşkirin, ew li ser qeşaya şil an jî di sarincokek 4℃ de têne danîn û pêvajoya cemidandinê di nav 5 hûrdeman de dest pê dike. Wekî rêbernameyek giştî, şane bi rêjeya -1 heta -3 di hûrdemê de têne sar kirin (2). Ev bi karanîna sarincokek bernamekirî an jî bi danîna şûşeyan di qutiyek îzolekirî de ku di sarincokek bi rêjeya kontrolkirî ya -70°C heta -90°C de tê danîn, tê bidestxistin.

Veguhestina bo Nîtrojena Şile

Dûvre şûşeyên krîyojenîk ên cemidî ji bo demên bêdawî têne veguheztin nav tankeke nîtrojena şil, bi şertê ku germahî ji -135℃ kêmtir were parastin.

Ev germahiyên pir nizm dikarin bi têketina nav nîtrojena qonaxa şil an jî buharê werin bidestxistin.

Qonaxa Şile an Buharê?

Hilanîna nîtrojenê di qonaxa şil de germahiya sar bi awayekî mutleq diparêze, lê pir caran ji ber sedemên jêrîn nayê pêşniyar kirin:

• Pêdiviya bi mîqdarên mezin (kûrahî) nîtrojena şil ku xeterek potansiyel e. Şewat an jî bêhnçûn ji ber vê yekê xeterek rastîn e.
• Rewşên belgekirî yên kontaminasyona xaçerêyî ji hêla ajanên enfeksiyonê yên wekî aspergillus, hepatît B û belavbûna vîrusê bi navgîniya nîtrojena şil ve (2,3)
• Îhtîmala rijandina nîtrojena şil nav şûşeyan di dema ketina nav avê de heye. Dema ku ji depoyê tê derxistin û digihîje germahiya odeyê, nîtrojen bi lez fireh dibe. Di encamê de, dema ku şûşe ji depoya nîtrojena şil tê derxistin, dibe ku bişkê, û hem ji bermahiyên firîyayî û hem jî ji ber têkiliya bi naverokê re xetereyek çêdike (1, 4).

Ji ber van sedeman, hilanîna germahiya pir nizm bi gelemperî di nîtrojena qonaxa buharê de ye. Dema ku divê nimûne di qonaxa şil de werin hilanîn, divê lûleyên krîofleksê yên taybetî werin bikar anîn.

Aliyê neyînî yê qonaxa buharê ew e ku gradyana germahiyê ya vertîkal dikare çêbibe û di encamê de guherînên germahiyê di navbera -135℃ û -190℃ de çêdibin. Ev yek çavdêriya baldar û baldar a asta nîtrojena şil û guherînên germahiyê hewce dike (5).

Gelek hilberîner pêşniyar dikin ku krîyovîal ji bo hilanîna heta -135℃ an jî tenê ji bo karanîna di qonaxa buharê de guncaw in.

Helandina Hucreyên We yên Krîyoparastî

Proseya helandinê ji bo çandeke cemidî stresdar e, û ji bo misogerkirina jiyan, başbûn û fonksiyona çêtirîn a şaneyan, destwerdan û teknîkek rast hewce ye. Protokolên helandinê yên rastîn dê bi celebên şaneyên taybetî ve girêdayî bin. Lêbelê, helandina bilez wekî standard tê hesibandin ji bo:

• Her bandorek li ser vejîna hucreyî kêm bike
• Alîkariya kêmkirina dema rûbirûbûna bi çareserîyên di navgîna cemidandinê de dike
• Bi ji nû ve krîstalîzasyona qeşayê zirarê kêm bikin

Ji bo helandina nimûneyan, serşokên avê, serşokên bi mûrikan, an jî amûrên otomatîk ên taybet bi gelemperî têne bikar anîn.

Pir caran, 1 rêza şaneyan bi nermî di nav serşokek avê ya 37℃ de ji bo 1-2 deqîqeyan tê helandin heta ku piçek qeşa di şûşeyê de bimîne berî ku di navgînek mezinbûnê ya pêşwext germ de werin şuştin.

Ji bo hin şaneyan wekî embrîyoyên memikan, germbûna hêdî ji bo domandina jiyana wan girîng e.

Xane niha ji bo çandina xaneyan, veqetandina xaneyan, an jî di rewşa xaneyên bineretî yên hematopoietîk de - lêkolînên jiyanîbûnê ji bo misogerkirina yekparçeyiya xaneyên bineretî yên donor berî terapiya myeloablatîf amade ne.

Ew pratîkek normal e ku meriv perçeyên piçûk ên nimûneya pêşşuştî ya ku ji bo jimartina şaneyan tê bikar anîn bigire da ku konsantrasyonên şaneyan ji bo çandina di kulturê de were destnîşankirin. Dûv re hûn dikarin encamên prosedurên veqetandina şaneyan binirxînin û zindîbûna şaneyan diyar bikin.

Baştirîn Pratîk ji bo Depokirina Krîyovîalan

Kriyoparastina serketî ya nimûneyên ku di krîyovîyal de têne hilanîn, bi gelek hêmanên protokolê ve girêdayî ye, di nav de hilanîna rast û tomargirtin.

• Xaneyan di navbera cihên hilanînê de parçe bikin- Ger qebare destûr bidin, şaneyan di navbera şûşeyan de parçe bikin û wan li cihên cuda hilînin da ku xetera windabûna nimûneyê ji ber têkçûna alavan kêm bikin.
• Pêşî li gemarbûna xaçerê bigirin- Berî karanîna paşê, şûşeyên krîyojenîk ên sterîl ên yekcar-bikaranîn an otoklavê hilbijêrin.
• Ji bo şaneyên xwe şûşeyên bi mezinahiya guncaw bikar bînin- şûşe bi qebareyên di navbera 1 û 5 ml de têne. Ji bo kêmkirina xetera şikestinê, ji tijîkirina zêde ya şûşeyan dûr bisekinin.
• Şûşeyên krîyojenîk ên bi têlên hundirîn an derveyî hilbijêrin- Hin zanîngeh ji bo tedbîrên ewlehiyê şûşeyên bi têlên hundirîn pêşniyar dikin - ew dikarin di dema dagirtinê de an jî dema ku di nîtrojena şil de têne hilanîn pêşî li qirêjbûnê bigirin.
• Pêşîgirtina li rijandinê- Ji bo rêgirtina li rijandin û gemarbûnê, mohrên du-derzîkirî yên ku di nav qapaxa pêçayî an jî xelekên O de hatine qalibkirin bikar bînin.
• Barkodên 2D bikar bînin û şûşeyan etîket bikin- ji bo misogerkirina şopandinê, şûşeyên bi deverên nivîsandinê yên mezin dihêle ku her şûşeyek bi têra xwe were nîşankirin. Barkodên 2D dikarin di rêveberiya hilanînê û tomarkirinê de bibin alîkar. Qapaxên bi kodên rengîn ji bo naskirina hêsantir bikêr in.
• Parastina hilanînê ya têrker- Ji bo ku şaneyên winda nebin, divê konteynerên hilanînê bi berdewamî germahî û asta nîtrojena şil bişopînin. Divê alarm werin danîn da ku bikarhêneran ji xeletiyan agahdar bikin.

Tedbîrên Ewlehiyê

Nîtrojena şil di lêkolînên nûjen de bûye pratîkek gelemperî, lê heke bi şaşî were bikar anîn, xetera birîndarbûna giran hildigire.

Ji bo kêmkirina metirsiya sermayê, şewitandinê û bûyerên din ên neyînî dema ku bi nîtrojena şil re mijûl dibin, divê alavên parastina kesane (PPE) yên guncaw werin lixwekirin.

• Lepikên krîyojenîk
• Cilê laboratîfê
• Sipera rûyê tevahî ya li hember bandorê ku stû jî vedişêre
• Pêlavên girtî
• Pêşgîrê plastîk ê li dijî şilbûnê

Ji bo kêmkirina xetera fetisandinê, divê sarincên nîtrojena şil li deverên baş hewakirî werin danîn - nîtrojena reviyayî buhar dibe û oksîjena atmosferê ji holê radike. Divê dikanên mezin xwedî pergalên alarma oksîjena kêm bin.

Dema ku meriv nîtrojena şil bikar tîne, xebata bi cotan îdeal e û bikaranîna wê li derveyî demjimêrên xebata normal divê were qedexekirin.

Cryovials ji bo Piştgiriya Herikîna Karê We

Şîrketa Biyomedîkî ya Suzhou Ace cûrbecûr berheman pêşkêş dike ku hewcedariyên we yên parastina krîyoyî ji bo cûreyên cûda yên şaneyan bicîh tîne. Portfoliyo rêzek lûleyan û her weha rêzek krîyovîyalên sterîl dihewîne.

Krîyovîyalên me ev in:

• Qapaxa Laboratîfê ya Bipêç 0.5mL 1.5mL 2.0mL Şûşeyên Krîyojenîk ên Krîyotûbeya Binê Konîk a bi Gasket

  ● Taybetmendiya 0.5ml, 1.5ml, 2.0ml, bi etîket an bê etîket
  ● Sêwirana konîk an jî xweser, sterîl an jî nesterîl her du jî hene
  ● Lûleyên qapaxî ji polîpropîlena pola bijîşkî hatine çêkirin
  ● Şûşeyên PP Cryotube dikarin dubare werin cemidandin û helandin
  ● Sêwirana qapaxa derve dikare îhtîmala qirêjbûnê di dema dermankirina nimûneyê de kêm bike.
  ● Lûleyên krîyojenîk ên bi qapaxa pêçayî Têlên pêçayî yên gerdûnî ji bo karanînê
  ● Lûleyên herî zêde li rotorên hevpar dicivin
  ● Lûleyên o-ring ên lûleya krîyojenîk ji bo qutiyên cemidandinê yên standard ên 1 înç û 2 înç, 48 pîle, 81 pîle, 96 pîle û 100 pîle guncan in.
  ● Dikare heta 121°C otoklav bike û heta -86°C cemidîne

  NO BEŞ	MAL	BEND	DEVIKRENG	PCS/TÛR	ÇENTE/QUTIYE
  ACT05-BL-N	PP	0.5ML	Reş, Zer, Şîn, Sor, Mor, Spî	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5ML	Reş, Zer, Şîn, Sor, Mor, Spî	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5ML	Reş, Zer, Şîn, Sor, Mor, Spî	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	Reş, Zer, Şîn, Sor, Mor, Spî	500	10