Cosa sono le Cryovials?
Fiale di stoccaggio criogenicoSono piccoli contenitori cilindrici con tappo, progettati per conservare e preservare campioni a temperature bassissime. Sebbene tradizionalmente queste fiale fossero realizzate in vetro, ora sono molto più comunemente realizzate in polipropilene per motivi di praticità ed economicità. Le crioprovette sono state accuratamente progettate per resistere a temperature fino a -196 °C e per ospitare un'ampia varietà di tipi cellulari. Questi variano dalle cellule staminali diagnostiche, ai microrganismi, alle cellule primarie fino alle linee cellulari stabilizzate. Oltre a ciò, possono essere conservati anche piccoli organismi multicellulari.fiale di stoccaggio criogenico, così come gli acidi nucleici e le proteine che devono essere conservati a temperature di conservazione criogeniche.
Le fiale per la conservazione criogenica sono disponibili in diverse forme e trovare la tipologia giusta che soddisfi tutte le vostre esigenze vi garantirà l'integrità del campione senza spendere troppo. Leggete il nostro articolo per saperne di più sui principali fattori da considerare nella scelta della crioprovetta giusta per il vostro laboratorio.
Proprietà della fiala criogenica da considerare
Thread esterni vs thread interni
Spesso le persone fanno questa scelta in base alle preferenze personali, ma in realtà ci sono delle differenze funzionali fondamentali da considerare tra i due tipi di filo.
Molti laboratori spesso optano per fiale con filettatura interna per ridurre al minimo lo spazio di stoccaggio e consentire una migliore adattabilità alle celle frigorifere. Ciononostante, potreste considerare che l'opzione con filettatura esterna sia la migliore per voi. Si ritiene che presentino un rischio di contaminazione inferiore, grazie al design che rende ancora più difficile l'ingresso di qualsiasi cosa che non sia il campione.
In genere, per le applicazioni genomiche si preferiscono le fiale con filettatura esterna, ma entrambe le opzioni sono considerate adatte per le biobanche e altre applicazioni ad alta produttività.
Un'ultima cosa da considerare sulla filettatura: se il tuo laboratorio utilizza l'automazione, potresti dover valutare quale filettatura può essere utilizzata con le pinze dello strumento.
Volume di archiviazione
Le fiale criogeniche sono disponibili in diverse dimensioni per soddisfare la maggior parte delle esigenze, ma la loro capacità varia solitamente tra 1 mL e 5 mL.
La chiave è assicurarsi che la criovia non sia riempita eccessivamente e che ci sia spazio extra disponibile, nel caso in cui il campione si rigonfi durante il congelamento. In pratica, questo significa che i laboratori optano per fiale da 1 mL quando conservano campioni di 0,5 mL di cellule sospese in crioprotettore e fiale da 2,0 mL per 1,0 mL di campione. Un altro consiglio per evitare di riempire eccessivamente le fiale è quello di utilizzare criovie con tacche graduate, che eviteranno qualsiasi rigonfiamento che potrebbe causare crepe o perdite.
Tappo a vite vs tappo a ribalta
Il tipo di tappo da scegliere dipende principalmente dall'utilizzo o meno di azoto in fase liquida. In tal caso, saranno necessarie crioprovette con tappo a vite. Questo garantisce che non possano aprirsi accidentalmente a causa di manipolazione impropria o sbalzi di temperatura. Inoltre, i tappi a vite consentono un prelievo più facile dalle criocontenitori e uno stoccaggio più efficiente.
Tuttavia, se non si utilizza azoto liquido e si necessita di un tappo più pratico e facile da aprire, un tappo a ribalta è la soluzione migliore. Questo vi farà risparmiare molto tempo perché è molto più facile da aprire, il che lo rende particolarmente utile nelle operazioni ad alta produttività e in quelle che utilizzano processi batch.
Sigillo di sicurezza
Il modo migliore per garantire una chiusura sicura è assicurarsi che il tappo della crioprovetta e il flacone siano realizzati con lo stesso materiale. Questo garantirà che si restringano ed espandano all'unisono. Se sono realizzati con materiali diversi, si restringeranno ed espanderanno a velocità diverse al variare della temperatura, creando fessure e potenziali perdite con conseguente contaminazione.
Alcune aziende offrono doppie rondelle e flangia per la massima sicurezza del campione su crioprovette con filettatura esterna. Le crioprovette con O-ring sono considerate le più affidabili per le crioprovette con filettatura interna.
Vetro contro plastica
Per motivi di sicurezza e praticità, molti laboratori ora utilizzano la plastica, solitamente il polipropilene, al posto delle fiale di vetro termosaldabili. Le fiale di vetro sono ormai considerate una scelta obsoleta, poiché durante il processo di sigillatura possono formarsi delle perdite invisibili, che, se scongelate dopo la conservazione in azoto liquido, potrebbero causarne l'esplosione. Inoltre, non sono adatte alle moderne tecniche di etichettatura, fondamentali per garantire la tracciabilità dei campioni.
Autoportanti vs fondi arrotondati
Le fiale criogeniche sono disponibili sia con base autoportante, con fondo a stella, sia con fondo arrotondato. Se dovete appoggiare le vostre fiale su una superficie, assicuratevi di scegliere la versione con base autoportante.
Tracciabilità e monitoraggio dei campioni
Questo aspetto della conservazione criogenica viene spesso trascurato, ma la tracciabilità e la tracciabilità dei campioni sono aspetti cruciali da considerare. I campioni criogenici possono essere conservati per molti anni, durante i quali il personale può cambiare e, senza una corretta tenuta dei registri, possono diventare non identificabili.
Assicuratevi di scegliere fiale che rendano l'identificazione del campione il più semplice possibile. Ecco alcuni aspetti da tenere in considerazione:
Ampie aree di scrittura per registrare dettagli sufficienti in modo che i record possano essere trovati se una fiala si trova in una posizione errata: solitamente sono sufficienti l'identità della cella, la data di congelamento e le iniziali della persona responsabile.
Codici a barre per facilitare la gestione dei campioni e i sistemi di tracciamento
Cappellini colorati
Una nota per il futuro: sono in fase di sviluppo chip ultraresistenti al freddo che, una volta inseriti in singole crioprovette, potrebbero potenzialmente memorizzare una cronologia termica dettagliata, nonché informazioni dettagliate sui lotti, risultati dei test e altra documentazione rilevante sulla qualità.
Oltre a considerare le diverse specifiche delle fiale disponibili, è necessario riflettere anche sul processo tecnico di conservazione delle crioprovette in azoto liquido.
Temperatura di conservazione
Esistono diversi metodi di conservazione criogenica dei campioni, ognuno dei quali opera a una temperatura specifica. Tra le opzioni e le relative temperature di funzionamento figurano:
Fase liquida LN2: mantenere una temperatura di -196℃
Fase vapore LN2: sono in grado di funzionare a intervalli di temperatura specifici compresi tra -135°C e -190°C a seconda del modello.
Congelatori a vapore di azoto: da -20°C a -150°C
Il tipo di cellule conservate e il metodo di conservazione preferito dal ricercatore determineranno quale delle tre opzioni disponibili verrà utilizzata dal tuo laboratorio.
Tuttavia, a causa delle temperature estremamente basse impiegate, non tutte le provette o i modelli saranno adatti o sicuri. I materiali possono diventare estremamente fragili a temperature estremamente basse; l'utilizzo di una fiala non adatta alla temperatura scelta potrebbe causare la rottura o la rottura del contenitore durante la conservazione o lo scongelamento.
Controllare attentamente le raccomandazioni del produttore sull'uso corretto, poiché alcune fiale criogeniche sono adatte a temperature fino a -175 °C, altre a -150 °C e altre ancora solo a 80 °C.
Vale anche la pena notare che molti produttori dichiarano che le loro fiale criogeniche non sono adatte all'immersione in fase liquida. Se conservate in fase liquida, una volta riportate a temperatura ambiente, le fiale o i relativi sigilli potrebbero rompersi a causa del rapido accumulo di pressione causato da piccole perdite.
Se le cellule devono essere conservate nella fase liquida dell'azoto liquido, prendere in considerazione la possibilità di conservarle in apposite fiale criogeniche sigillate termicamente in tubi Cryoflex oppure in ampolle di vetro chiuse ermeticamente.
Data di pubblicazione: 25-11-2022