Crió-fhiacáina úsáidtear go coitianta le haghaidh stóráil chrióigineach línte cille agus ábhair bhitheolaíocha ríthábhachtacha eile, i ndewaranna atá líonta le nítrigin leachtach.

Tá roinnt céimeanna i gceist le caomhnú rathúil cealla i nítrigin leachtach. Cé gurb é reo mall an bunphrionsabal, braitheann an teicníc chruinn a úsáidtear ar an gcineál cille agus ar an gcriochosantóir a úsáidtear. Tá roinnt cúinsí sábháilteachta agus dea-chleachtas le cur san áireamh agus cealla á stóráil ag teochtaí chomh híseal sin.

Tá sé mar aidhm ag an bpost seo forbhreathnú a thabhairt ar an gcaoi a stóráiltear crió-fhiacáin i nítrigin leachtach.

Cad iad crió-fhiacáin

Is fialáin bheaga caipíneacha iad crió-fhiacáin atá deartha chun samplaí leachtacha a stóráil ag teochtaí thar a bheith íseal. Cinntíonn siad nach dtagann cealla atá caomhnaithe i gcriochosantóir i dteagmháil dhíreach leis an nítrigin leachtach, rud a laghdaíonn an baol scoilteanna ceallacha agus a bhaineann leas as éifeacht fhuaraithe mhór an nítrigin leachtach fós.

De ghnáth bíonn na fialáin ar fáil i raon toirteanna agus dearaí – is féidir iad a shnáithiú go hinmheánach nó go seachtrach le bun cothrom nó cruinn. Tá formáidí steiriúla agus neamh-steiriúla ar fáil freisin.

Cé a ÚsáideannCyrovialsCealla a Stóráil i Nítrigin Leachtach

Úsáideann réimse saotharlann NHS agus príobháideacha, chomh maith le hinstitiúidí taighde atá speisialaithe i mbaincéireacht fola corda, bitheolaíocht cealla eipitéiliacha, imdhíoneolaíocht agus bitheolaíocht gascheall crió-bhialanna chun cealla a chriochaomhnú.

I measc na gcealla atá caomhnaithe ar an mbealach seo tá cealla B agus T, cealla CHO, cealla gas agus cealla réamhstairithe hematopoietic, hibridomaí, cealla stéigeach, macrafagaigh, cealla gas agus cealla réamhstairithe meiseinceimeacha, monaicítí, mielóma, cealla NK agus cealla gas ilchumhachtacha.

Forbhreathnú ar Conas Crió-fhiacáin a Stóráil i Nítrigin Leachtach

Is próiseas é crió-chaomhnú a chaomhnaíonn cealla agus struchtúir bhitheolaíocha eile trí iad a fhuarú go teochtaí an-íseal. Is féidir cealla a stóráil i nítrigin leachtach ar feadh na mblianta gan inmharthanacht na gceall a chailleadh. Seo achoimre ar na nósanna imeachta a úsáidtear.

Ullmhú Cealla

Beidh an modh cruinn chun samplaí a ullmhú éagsúil ag brath ar an gcineál cille, ach go ginearálta, bailítear na cealla agus déantar iad a lártheifneoiriú chun millín saibhir i gcealla a fhorbairt. Ansin, athfhionraítear an millín seo san fhorshnáithín measctha le crióchosantóir nó meán crióchaomhnaithe.

Meán Criophróisithe

Úsáidtear an meán seo chun cealla a chaomhnú sna timpeallachtaí ísealteochta a mbeidh siad faoina réir trí chosc a chur ar fhoirmiú criostail intreach agus eachtarcheallacha agus dá bhrí sin bás cille. Is é a ról timpeallacht shábháilte, chosanta a sholáthar do chealla agus d’fhíocháin le linn na bpróiseas reo, stórála agus díreo.

Measctar meán amhail plasma úr reoite (FFP), tuaslagán plasmalyte heipirinithe nó tuaslagáin saor ó shéiream, saor ó chomhpháirteanna ainmhithe le crióchosantóirí amhail démheitilsulfocsaíd (DMSO) nó gliocról.

Déantar an millín samplach athleachtaithe a roinnt i gcrio-fhiacáin pholapróipiléine amhailFialáin Stórála Crióigineacha Suzhou Ace Biomedical Company.

Tá sé tábhachtach gan na crió-fhiacáin a ró-líonadh mar go méadóidh sé seo an baol scoilte agus go bhféadfadh an t-ábhar a scaoileadh (1).

Ráta Reo Rialaithe

Go ginearálta, úsáidtear ráta reo rialaithe mall chun crióchaomhnú rathúil cealla.

Tar éis na samplaí a roinnt i bhfialáin chrióigineacha, cuirtear iad ar oighear fliuch nó i gcuisneoir 4℃ agus cuirtear tús leis an nós imeachta reo laistigh de 5 nóiméad. Mar threoir ghinearálta, fuaraítear cealla ag ráta -1 go -3 in aghaidh an nóiméid (2). Baintear é seo amach trí úsáid a bhaint as fuaraitheoir in-ríomhchláraithe nó trí fhiailáin a chur i mbosca inslithe atá suite i reoiteoir ráta rialaithe –70°C go –90°C.

Aistriú go Nítrigin Leachtach

Ansin, aistrítear na fialáin chrióigineacha reoite chuig umar nítrigine leachta ar feadh tréimhsí éiginnte ar choinníoll go gcoimeádtar teocht faoi bhun -135 ℃.

Is féidir na teochtaí thar a bheith íseal seo a fháil trí thumadh i nítrigin chéim leachtach nó gaile.

Céim Leachtach nó Gail?

Is eol go gcoinníonn stóráil i nítrigin céim leachtach an teocht fhuar le comhsheasmhacht iomlán, ach ní mholtar go minic é ar na cúiseanna seo a leanas:

• An gá le méideanna móra (doimhneacht) nítrigine leachta, rud a d’fhéadfadh a bheith ina ghuais. Is riosca fíor é dónna nó tachtadh mar gheall air seo.
• Cásanna doiciméadaithe tras-éillithe ag gníomhairí tógálacha amhail aspergillus, heipitíteas B agus scaipeadh víreasach tríd an meán nítrigine leachta (2,3)
• An fhéidearthacht go sceithfidh nítrigin leachtach isteach sna fialáin le linn tumoideachais. Nuair a bhaintear as an stóras é agus nuair a théitear go teocht an tseomra é, leathnaíonn an nítrigin go tapa. Dá bhrí sin, féadfaidh an fialán pléascadh nuair a bhaintear as an stóras nítrigin leachtach é, rud a chruthaíonn guais ó smionagar ag eitilt agus nochtadh don ábhar (1, 4).

Ar na cúiseanna seo, is i nítrigin chéim gaile is minice a stóráiltear ag teocht an-íseal. Nuair is gá samplaí a stóráil sa chéim leachtach, ba cheart feadánra criófhleicse speisialaithe a úsáid.

Is é an míbhuntáiste a bhaineann leis an gcéim gaile ná go bhféadfadh grádán teochta ingearach tarlú agus luaineachtaí teochta idir -135℃ agus -190℃ mar thoradh air sin. Éilíonn sé seo monatóireacht chúramach agus dhícheallach ar leibhéil an nítrigine leachtaigh agus ar athruithe teochta (5).

Molann go leor monaróirí go bhfuil crió-bhialanna oiriúnach le haghaidh stórála síos go -135 ℃ nó le húsáid i gcéim gaile amháin.

Do Chealla Criopreserved a Dhíreo

Bíonn strus mór ag baint leis an nós imeachta díreoite do chultúr reoite, agus tá gá le láimhseáil agus teicníc cheart chun inmharthanacht, téarnamh agus feidhmiúlacht is fearr is féidir na gcealla a chinntiú. Braithfidh na prótacail dhíreoite cruinne ar chineálacha sonracha cealla. Mar sin féin, meastar gur caighdeán é díreoite tapa chun:

• Laghdaigh aon tionchar ar aisghabháil cheallacha
• Cabhraigh leis an am nochta do na tuaslagáin atá i láthair sna meáin reo a laghdú
• Laghdaigh aon damáiste trí athchriostalú oighir

Is gnách go n-úsáidtear folcadáin uisce, folcadáin coirníní, nó ionstraimí uathoibrithe speisialaithe chun samplaí a leá.

Is minic a dhéantar líne chealla amháin a leá ag an am ar feadh 1-2 nóiméad, trína rothlú go réidh i ndabhach uisce 37℃ go dtí go mbeidh beagán oighir fágtha sa fhial sula nightear iad i meán fáis réamhthéite.

I gcás roinnt cealla amhail suthanna mamaigh, tá téamh mall riachtanach chun go mairfidh siad.

Tá na cealla réidh anois le haghaidh saothrú cille, leithlisiú cille, nó i gcás gaschealla haemaiteapoiéiteacha – staidéir inmharthanachta chun sláine gaschealla an deontóra a ráthú roimh theiripe myeloablatach.

Is gnách go ndéantar cuid bheag den sampla réamh-nite a úsáid chun comhaireamh cealla a dhéanamh chun tiúchan na gceall a chinneadh le haghaidh plátála i gcultúr. Ansin, is féidir leat torthaí na nósanna imeachta leithlisithe cealla a mheas agus inmharthanacht na gceall a chinneadh.

Cleachtais is Fearr maidir le Stóráil Crió-fhiacán

Braitheann crióchaomhnú rathúil samplaí atá stóráilte i gcrió-bhialanna ar go leor gnéithe sa phrótacal, lena n-áirítear stóráil cheart agus coimeád taifead.

• Scoilt cealla idir láithreacha stórála– Más féidir leis an méid ceart a bheith ann, roinn na cealla idir na fialáin agus stóráil iad in áiteanna ar leithligh chun an baol go gcaillfear sampla de bharr teipeanna trealaimh a laghdú.
• Cosc a chur ar thras-éilliú– Roghnaigh fialáin chrióigineacha steiriúla aon úsáide nó uathchlabh roimh úsáid ina dhiaidh sin
• Bain úsáid as fialáin de mhéid oiriúnach do do chealla– tagann fiailí i raon toirteanna idir 1 agus 5ml. Seachain ró-líonadh fiailí chun an baol scoilteadh a laghdú.
• Roghnaigh fialáin chrióigineacha snáithithe inmheánacha nó seachtracha– Molann roinnt ollscoileanna fialáin snáithithe go hinmheánach ar mhaithe le bearta sábháilteachta – is féidir leo cosc ​​a chur ar éilliú le linn líonadh nó nuair a stóráiltear iad sa nítrigin leachtach.
• Cosc a chur ar sceitheadh- Bain úsáid as rónta dé-insteallta atá múnlaithe isteach sa chaipín scriú nó sna fáinní-O chun sceitheadh ​​agus éilliú a chosc.
• Bain úsáid as barrachóid 2T agus lipéadaigh fiailí– chun inrianaitheacht a chinntiú, cuireann fialáin a bhfuil limistéir scríbhneoireachta mhóra orthu ar chumas gach fialán a bheith lipéadaithe go leordhóthanach. Is féidir le barrachóid 2T cabhrú le bainistíocht stórála agus le taifid a choinneáil. Tá caipíní daite-chódaithe úsáideach chun aitheantas níos éasca a fháil.
• Cothabháil stórála leordhóthanach- Chun a chinntiú nach gcailltear cealla, ba cheart do shoithí stórála monatóireacht leanúnach a dhéanamh ar an teocht agus ar leibhéil an nítrigine leachtaigh. Ba cheart aláraim a fheistiú chun úsáideoirí a chur ar an eolas faoi earráidí.

Réamhchúraimí Sábháilteachta

Tá nítrigin leachtach ina chleachtas coitianta i dtaighde nua-aimseartha ach tá baol díobhála tromchúiseacha ann má úsáidtear go mícheart é.

Ba chóir trealamh cosanta pearsanta (TCP) cuí a chaitheamh chun an baol sioc-ghreim, dónna agus teagmhais dhíobhálacha eile a íoslaghdú agus nítrigin leachtach á láimhseáil.

• Lámhainní crióigineacha
• Cóta saotharlainne
• Sciath aghaidhe iomlán atá frithsheasmhach in aghaidh tionchair a chlúdaíonn an muineál freisin
• Bróga ladhar dúnta
• Aprón plaisteach splancscáileáin

Ba chóir cuisneoirí nítrigine leachta a chur in áiteanna aeráilte go maith chun an baol tachtaithe a íoslaghdú – galaíonn nítrigin a scaoiltear agus díláithríonn sé ocsaigin atmaisféarach. Ba chóir go mbeadh córais aláraim íseal-ocsaigine ag stórais mhóra.

Is fearr oibriú i mbeirteanna agus nítrigin leachtach á láimhseáil agus ba cheart a úsáid lasmuigh de ghnáthuaireanta oibre a thoirmeasc.

Crió-fhiacáin chun Tacú le do Shreabhadh Oibre

Cuireann comhlacht Suzhou Ace Biomedical rogha leathan táirgí ar fáil a chomhlíonann do riachtanais crió-chaomhnaithe do chineálacha éagsúla cealla. Áirítear leis an bpunann raon feadán chomh maith le raon crió-bhialanna steiriúla.

Is iad seo ár gcriovials:

• Caipín Scriú Saotharlainne 0.5mL 1.5mL 2.0mL Fiailíní Crióigineacha Criófheadán Bun Cónúil le Gáiséad

  ● Sonraíocht 0.5ml, 1.5ml, 2.0ml, le sciorta nó gan sciorta
  ● Tá dearadh cónúil nó féinsheasaimh, steiriúil nó neamh-steiriúil araon ar fáil
  ● Tá feadáin scriú-chaipín déanta as polapróipiléin grád leighis
  ● Is féidir fialáin chríotiúb PP a reo agus a dhíreo arís agus arís eile
  ● Is féidir leis an dearadh caipín seachtrach an dóchúlacht éillithe a laghdú le linn cóireála sampla.
  ● Feadáin chrióigineacha caipín scriú Snáitheanna scriú uilíocha le húsáid
  ● Feadáin a oireann do na rótair is coitianta
  ● Feileann feadáin fáinne-o feadán crióigineach do bhoscaí reoiteora caighdeánacha 1-orlach agus 2-orlach, 48 tobar, 81 tobar, 96 tobar agus 100 tobar
  ● In-uath-chlabháilte go 121°C agus in-reoite go -86°C

  UIMHIR CHUID	ÁBHAR	TOIRT	CAPDATH	PCS/MÁLA	MÁLAÍ/CÁS
  ACT05-BL-N	PP	0.5ML	Dubh, Buí, Gorm, Dearg, Corcra, Bán	500	10
  ACT15-BL-N	PP	1.5ML	Dubh, Buí, Gorm, Dearg, Corcra, Bán	500	10
  ACT15-BL-NW	PP	1.5ML	Dubh, Buí, Gorm, Dearg, Corcra, Bán	500	10
  ACT20-BL-N	PP	2.0ML	Dubh, Buí, Gorm, Dearg, Corcra, Bán	500	10