کرایوویال چیست؟
ویالهای ذخیرهسازی برودتیظروف کوچک، دربسته و استوانهای شکلی هستند که برای نگهداری و حفظ نمونهها در دماهای بسیار پایین طراحی شدهاند. اگرچه به طور سنتی این ویالها از شیشه ساخته میشدند، اما اکنون به دلایل راحتی و هزینه، بیشتر از پلیپروپیلن ساخته میشوند. کرایوویالها با دقت طراحی شدهاند تا در برابر دماهای پایین تا -196 درجه سانتیگراد مقاومت کنند و طیف گستردهای از انواع سلولها را در خود جای دهند. این سلولها از سلولهای بنیادی تشخیصی، میکروارگانیسمها، سلولهای اولیه گرفته تا ردههای سلولی تثبیتشده متفاوت هستند. فراتر از آن، ممکن است موجودات چند سلولی کوچکی نیز وجود داشته باشند که در داخل آنها ذخیره میشوند.ویالهای ذخیرهسازی برودتیو همچنین اسید نوکلئیک و پروتئینهایی که باید در دمای کرایوژنیک نگهداری شوند.
ویالهای ذخیرهسازی کرایوژنیک در اشکال مختلفی عرضه میشوند و یافتن نوع صحیحی که تمام نیازهای شما را برآورده کند، تضمین میکند که بدون پرداخت هزینه اضافی، یکپارچگی نمونه را حفظ کنید. برای کسب اطلاعات بیشتر در مورد ملاحظات کلیدی خرید هنگام انتخاب کرایووایل مناسب برای کاربرد آزمایشگاهی خود، مقاله ما را مطالعه کنید.
ویژگیهای ویال کرایوژنیک که باید در نظر گرفته شوند
نخهای خارجی در مقابل نخهای داخلی
افراد اغلب این انتخاب را بر اساس ترجیح شخصی انجام میدهند، اما در واقع تفاوتهای عملکردی کلیدی بین این دو نوع نخ وجود دارد که باید در نظر گرفته شوند.
بسیاری از آزمایشگاهها اغلب ویالهای با رزوه داخلی را انتخاب میکنند تا فضای ذخیرهسازی لوله را به حداقل برسانند و بتوانند بهتر در جعبههای فریزر قرار گیرند. با وجود این، ممکن است در نظر بگیرید که گزینه رزوه خارجی گزینه بهتری برای شماست. به دلیل طراحی که ورود هر چیزی غیر از نمونه به ویال را دشوارتر میکند، خطر آلودگی کمتری دارند.
ویالهای با رزوه خارجی معمولاً برای کاربردهای ژنومی ترجیح داده میشوند، اما هر دو گزینه برای بانکهای زیستی و سایر کاربردهای با توان عملیاتی بالا مناسب در نظر گرفته میشوند.
نکته آخری که باید در مورد رزوه کردن در نظر بگیرید این است که اگر آزمایشگاه شما از اتوماسیون استفاده میکند، ممکن است لازم باشد در نظر بگیرید که از چه رزوههایی میتوان برای گیرههای ابزار استفاده کرد.
حجم ذخیرهسازی
ویالهای کرایوژنیک در اندازههای مختلفی برای پوشش اکثر نیازها موجود هستند، اما بیشتر آنها ظرفیتی بین ۱ تا ۵ میلیلیتر دارند.
نکته کلیدی این است که مطمئن شوید کرایوویال شما بیش از حد پر نشده و فضای اضافی برای مواقعی که نمونه در حین انجماد متورم میشود، وجود داشته باشد. در عمل، این بدان معناست که آزمایشگاهها برای نگهداری نمونههای ۰.۵ میلیلیتری از سلولهای معلق در ماده محافظ انجماد، ویالهای ۱ میلیلیتری و برای ۱.۰ میلیلیتر نمونه، ویالهای ۲ میلیلیتری را انتخاب میکنند. نکته دیگر برای جلوگیری از پر شدن بیش از حد ویالها، استفاده از کرایوویالهایی با علامتهای درجهبندی شده است که از هرگونه تورمی که میتواند باعث ترک خوردن یا نشت شود، جلوگیری میکند.
درپوش پیچی در مقابل صفحه تاشو
نوع درپوشی که انتخاب میکنید عمدتاً به این بستگی دارد که آیا از نیتروژن فاز مایع استفاده خواهید کرد یا خیر. اگر استفاده میکنید، به کرایوویالهای پیچدار نیاز خواهید داشت. این تضمین میکند که آنها به دلیل جابجایی نادرست یا تغییرات دما نمیتوانند به طور تصادفی باز شوند. علاوه بر این، درپوشهای پیچدار امکان بازیابی آسانتر از جعبههای کرایوژنیک و ذخیرهسازی کارآمدتر را فراهم میکنند.
با این حال، اگر از نیتروژن مایع استفاده نمیکنید و به درپوش راحتتری نیاز دارید که باز کردن آن آسانتر باشد، درپوش تاشو گزینه بهتری است. این کار باعث صرفهجویی زیادی در زمان شما میشود زیرا باز کردن آن بسیار آسانتر است، که این امر به ویژه در عملیات با توان عملیاتی بالا و فرآیندهای دستهای مفید است.
امنیت پلمپ
بهترین راه برای اطمینان از آببندی ایمن، اطمینان از این است که درب و بطری کرایوویال شما هر دو از یک جنس ساخته شدهاند. این کار باعث میشود که انقباض و انبساط آنها به طور هماهنگ انجام شود. اگر از مواد مختلفی ساخته شده باشند، با تغییر دما، با سرعتهای مختلفی انقباض و انبساط پیدا میکنند که منجر به ایجاد شکاف و نشت احتمالی و در نتیجه آلودگی میشود.
برخی از شرکتها برای بالاترین سطح امنیت نمونه در کرایوویالهای رزوهدار خارجی، واشر و فلنج دوگانه ارائه میدهند. کرایوویالهای اورینگی برای کرایوویالهای رزوهدار داخلی، قابل اعتمادترین نوع در نظر گرفته میشوند.
شیشه در مقابل پلاستیک
برای ایمنی و راحتی، بسیاری از آزمایشگاهها اکنون به جای آمپولهای شیشهای قابل مهر و موم حرارتی، از پلاستیک، معمولاً پلیپروپیلن، استفاده میکنند. آمپولهای شیشهای اکنون یک انتخاب منسوخ در نظر گرفته میشوند زیرا در طول فرآیند مهر و موم کردن، ممکن است نشتهای سوراخمانند نامرئی ایجاد شود که پس از ذوب شدن پس از نگهداری در نیتروژن مایع، ممکن است باعث انفجار آنها شود. آنها همچنین برای تکنیکهای مدرن برچسبگذاری، که کلید تضمین قابلیت ردیابی نمونه است، مناسب نیستند.
خودایستا در مقابل کف گرد
ویالهای کرایوژنیک هم به صورت ایستاده با کف ستارهای شکل و هم به صورت کف گرد موجود هستند. اگر نیاز دارید که ویالهای خود را روی یک سطح قرار دهید، حتماً نوع ایستاده را انتخاب کنید.
قابلیت ردیابی و ردیابی نمونه
این بخش از ذخیرهسازی کرایوژنیک اغلب نادیده گرفته میشود، اما ردیابی و قابلیت ردیابی نمونه جنبهی بسیار مهمی است که باید در نظر گرفته شود. نمونههای کرایوژنیک را میتوان برای سالهای زیادی ذخیره کرد، که در طول این مدت ممکن است کارکنان تغییر کنند و بدون سوابق صحیح نگهداری شده، ممکن است غیرقابل شناسایی شوند.
حتماً ویالهایی را انتخاب کنید که شناسایی نمونه را تا حد امکان آسان کنند. مواردی که باید به آنها توجه کنید عبارتند از:
قسمتهای نوشتاری بزرگ برای ثبت جزئیات کافی تا در صورت قرار گرفتن ویال در مکان نادرست، بتوان سوابق را پیدا کرد - معمولاً مشخصات سلول، تاریخ انجماد و حروف اول نام فرد مسئول کافی است.
بارکدها برای کمک به مدیریت نمونه و سیستمهای ردیابی
کلاههای رنگی
نکتهای برای آینده - تراشههای فوق مقاوم در برابر سرما در حال توسعه هستند که وقتی در کرایوویالهای جداگانه قرار میگیرند، میتوانند تاریخچه حرارتی دقیقی را به همراه اطلاعات دقیق دستهای، نتایج آزمایش و سایر اسناد کیفی مرتبط ذخیره کنند.
علاوه بر توجه به مشخصات مختلف ویالهای موجود، باید به فرآیند فنی نگهداری کرایوویالها در نیتروژن مایع نیز توجه شود.
دمای نگهداری
روشهای ذخیرهسازی متعددی برای ذخیرهسازی کرایوژنیک نمونهها وجود دارد که هر کدام در دمای خاصی عمل میکنند. گزینهها و دمایی که در آن عمل میکنند عبارتند از:
فاز مایع LN2: دمای -196 درجه سانتیگراد را حفظ کنید
فاز بخار LN2: بسته به مدل، قادر به کار در محدوده دمایی خاص بین -135°C و -190°C هستند.
فریزرهای بخار نیتروژن: -20°C تا -150°C
نوع سلولهای ذخیرهشده و روش ذخیرهسازی ترجیحی محقق، تعیین میکند که آزمایشگاه شما از کدام یک از سه گزینه موجود استفاده کند.
با این حال، به دلیل دمای بسیار پایین مورد استفاده، همه لولهها یا طرحها مناسب یا ایمن نخواهند بود. مواد در دماهای بسیار پایین میتوانند بسیار شکننده شوند، استفاده از ویال نامناسب برای استفاده در دمای انتخابی شما میتواند باعث خرد شدن یا ترک خوردن ظرف در حین نگهداری یا یخزدایی شود.
توصیههای سازندگان را در مورد نحوهی صحیح استفاده با دقت بررسی کنید، زیرا برخی از ویالهای کرایوژنیک برای دماهای پایین تا -175 درجه سانتیگراد، برخی -150 درجه سانتیگراد و برخی دیگر فقط 80 درجه سانتیگراد مناسب هستند.
همچنین شایان ذکر است که بسیاری از تولیدکنندگان اظهار میکنند که ویالهای کرایوژنیک آنها برای غوطهوری در فاز مایع مناسب نیستند. اگر این ویالها در فاز مایع نگهداری شوند، هنگام بازگشت به دمای اتاق، این ویالها یا پلمپ درب آنها ممکن است به دلیل افزایش سریع فشار ناشی از نشتهای کوچک، خرد شوند.
اگر قرار است سلولها در فاز مایع نیتروژن مایع ذخیره شوند، ذخیره سلولها در ویالهای کرایوژنیک مناسب که با حرارت در لولههای کرایوفلکس بسته شدهاند یا ذخیره سلولها در آمپولهای شیشهای که کاملاً بسته هستند را در نظر بگیرید.
زمان ارسال: ۲۵ نوامبر ۲۰۲۲