Zer dira kriobiolak?
Biltegiratze kriogenikoko ontziakTenperatura oso baxuetan laginak gordetzeko eta kontserbatzeko diseinatutako ontzi txiki, estali eta zilindrikoak dira. Tradizionalki beirazkoak izan diren arren, orain askoz ohikoagoa da polipropilenozkoak izatea, erosotasun eta kostu arrazoiengatik. Krioontziak arretaz diseinatu dira -196 ℃-ko tenperaturak jasateko eta zelula mota ugari hartzeko. Hauek diagnostiko zelula ametatik, mikroorganismoetatik, zelula primarioetatik hasi eta zelula lerro finkatuetaraino doaz. Horrez gain, barruan gordetzen diren organismo multizelular txikiak ere egon daitezke.biltegiratze kriogenikoko ontziak, baita biltegiratze kriogenikoko tenperatura mailetan gorde behar diren azido nukleikoak eta proteinak ere.
Kriogeniko biltegiratzeko ontziak hainbat formatan daude eskuragarri, eta zure behar guztiak betetzen dituen mota egokia aurkitzeak laginaren osotasuna mantentzea bermatuko du gehiegi ordaindu gabe. Irakurri gure artikulua zure laborategiko aplikaziorako krioboila egokia aukeratzerakoan erosketa kontuan hartu beharreko funtsezko gauzei buruz gehiago jakiteko.
Kontuan hartu beharreko flasko kriogenikoaren propietateak
Kanpoko vs. Barneko hariak
Jendeak askotan aukera hau lehentasun pertsonaletan oinarrituta egiten du, baina, egia esan, bi hari moten artean kontuan hartu beharreko funtzio-desberdintasun nagusiak daude.
Laborategi askok barne-haridun botilak aukeratzen dituzte hodiak gordetzeko espazioa gutxitzeko eta izozkailu-kutxetan hobeto sartzeko. Hala ere, kanpoko haridun aukera zuretzat aukera hobea dela pentsa dezakezu. Kutsadura-arrisku txikiagoa dutela uste da, laginaz gain beste edozer gauza botilara sartzea are zailagoa egiten duen diseinuagatik.
Kanpoko haridun botilak nahiago dira orokorrean aplikazio genomikoetarako, baina bi aukerak egokitzat jotzen dira biobankuetarako eta beste errendimendu handiko aplikazioetarako.
Hariztaketari buruz kontuan hartu beharreko azken gauza bat: zure laborategiak automatizazioa erabiltzen badu, tresna-heldulekuekin zer hari erabil daitekeen kontuan hartu beharko duzu.
Biltegiratze-bolumena
Kriogenikozko botilak hainbat tamainatan daude eskuragarri behar gehienak asetzeko, baina gehienetan 1 ml eta 5 ml arteko edukiera dute.
Gakoa da ziurtatzea kriobiotala ez dagoela gehiegi beteta eta leku gehigarria dagoela, lagina izoztean puztu badaiteke. Praktikan, horrek esan nahi du laborategiek 1 ml-ko ontziak aukeratzen dituztela kriobabeslean esekita dauden 0,5 ml-ko zelula-laginak gordetzean, eta 2,0 ml-ko ontziak 1,0 ml-ko laginarentzat. Ontziak gehiegi ez betetzeko beste aholku bat marka graduatuak dituzten kriobiolak erabiltzea da, horrela pitzadurak edo isuriak eragin ditzakeen hanturarik saihestuko duzula ziurtatuko baituzu.
Torlojuzko tapoia vs. Flip Top
Aukeratzen duzun tapoi mota batez ere nitrogeno fase likidoa erabiliko duzun ala ez araberakoa da. Hala bada, torlojuzko estalkiak dituzten kriobiolak beharko dituzu. Horrek bermatzen du ez direla ustekabean irekiko gaizki maneiatzeagatik edo tenperatura aldaketengatik. Gainera, torlojuzko estalkiek errazago ateratzen dituzte kutxa kriogenikoetatik eta biltegiratze eraginkorragoa ahalbidetzen dute.
Hala ere, nitrogeno likidoa erabiltzen ez baduzu eta irekitzeko errazago den tapoi erosoago bat behar baduzu, orduan tapoi tolesgarria da aukera hobea. Horrek denbora asko aurreztuko dizu, askoz errazagoa baita irekitzen, eta hori bereziki erabilgarria da ekoizpen handiko eragiketetan eta batch prozesuak erabiltzen dituztenetan.
Zigiluaren Segurtasuna
Zigilu seguru bat bermatzeko modurik onena kriobiolaren tapoia eta botila material berekoak direla ziurtatzea da. Horrek batera uzkurtu eta zabalduko direla ziurtatuko du. Material desberdinekin eginda badaude, tenperatura aldatzen den heinean abiadura desberdinetan uzkurtu eta zabalduko dira, eta horrek hutsuneak eta isuriak eta ondoriozko kutsadura eragingo ditu.
Enpresa batzuek arandela bikoitzak eta brida eskaintzen dituzte kanpoko haridun kriobioletan laginen segurtasun maila gorena lortzeko. O-ring kriobiolak dira barne haridun kriobioletarako fidagarrienak.
Beira vs. Plastikoa
Segurtasun eta erosotasunerako, laborategi askok plastikoa erabiltzen dute gaur egun, normalean polipropilenoa, beroz zigilatzeko beirazko anpuluen ordez. Beirazko anpuluak aukera zaharkitutzat hartzen dira orain, zigilatzeko prozesuan zulo ikusezinak sor daitezkeelako, eta nitrogeno likidoan gorde ondoren desizozten direnean lehertu egin daitezkeelako. Gainera, ez dira hain egokiak etiketatze-teknika modernoetarako, eta hori funtsezkoa da laginen trazabilitatea bermatzeko.
Zutik daudenak vs. hondo biribilduak
Flako kriogenikoak izar formako hondoarekin zutik dauden moduan edo hondo biribilduetan daude eskuragarri. Flakoak gainazal batean jarri behar badituzu, ziurtatu zutik daudenak aukeratzen dituzula.
Trazabilitatea eta Laginen Jarraipena
Kriogenizazio biltegiratzearen arlo hau askotan ahaztu egiten da, baina laginen jarraipena eta trazabilitatea kontuan hartu beharreko alderdi erabakigarria da. Lagin kriogenikoak urte askotan gorde daitezke, eta denbora horretan langileak alda daitezke, eta behar bezala mantentzen ez badira, identifikatu ezin daitezke.
Ziurtatu laginaren identifikazioa ahalik eta errazena egiten duten flaskoak aukeratzen dituzula. Kontuan izan behar dituzun gauzen artean hauek daude:
Idazteko eremu handiak xehetasun nahikoa idazteko, flasko bat kokapen okerrean badago erregistroak aurkitu ahal izateko; normalean, zelularen identitatea, izozte-data eta arduradunaren inizialak nahikoak dira.
Barra-kodeak laginen kudeaketa eta jarraipen-sistemetarako
Txapel koloretsuak
Etorkizunerako ohar bat: hotzarekiko erresistenteak diren txipak garatzen ari dira, eta kriobiol indibidualetan sartuta, historia termiko zehatza, loteen informazio zehatza, proben emaitzak eta bestelako kalitate-dokumentazio garrantzitsua gorde ditzakete.
Eskuragarri dauden flaskoen zehaztapen desberdinak kontuan hartzeaz gain, krioontziak nitrogeno likidoan gordetzeko prozesu teknikoa ere kontuan hartu behar da.
Biltegiratze Tenperatura
Laginak kriogenikoki gordetzeko hainbat biltegiratze metodo daude, eta bakoitzak tenperatura jakin batean funtzionatzen du. Aukerak eta funtzionatzen duten tenperatura hauek dira:
LN2 fase likidoa: mantendu -196 ℃-ko tenperatura
LN2 lurrun-fasea: -135 °C eta -190 °C arteko tenperatura-tarte espezifikoetan funtziona dezakete, modeloaren arabera.
Nitrogeno-lurrunezko izozkailuak: -20 °C-tik -150 °C-ra
Gordetzen diren zelula motak eta ikertzaileak nahiago duen biltegiratze metodoak zehaztuko dute zure laborategiak hiru aukeren artean zein erabiltzen duen.
Hala ere, erabiltzen diren tenperatura oso baxuen ondorioz, ez dira hodi edo diseinu guztiak egokiak edo seguruak izango. Materialak oso hauskorrak bihur daitezke tenperatura oso baxuetan, beraz, aukeratutako tenperaturan erabiltzeko egokia ez den flasko bat erabiltzeak ontzia hautsi edo pitzatu dezake biltegiratzean edo desizoztean.
Begiratu arretaz fabrikatzaileen gomendioak behar bezala erabiltzeko, ontzi kriogeniko batzuk -175 °C-ko tenperaturetarako egokiak baitira, beste batzuk -150 °C-koak eta beste batzuk 80 °C-koak.
Kontuan izan behar da, halaber, fabrikatzaile askok diotela beren kriogeniko-fialak ez direla egokiak fase likidoan murgiltzeko. Fial hauek fase likidoan gordetzen badira giro-tenperaturara itzultzean, fial hauek edo haien tapoi-zigiluak hautsi egin daitezke ihes txikiek eragindako presio-pilaketa azkarraren ondorioz.
Zelulak nitrogeno likidoaren fase likidoan gorde behar badira, kontuan hartu zelulak krioflex hodietan beroz zigilatutako kriogeniko-ontzi egokietan gordetzea edo zelulak hermetikoki itxitako beirazko anpuluetan gordetzea.
Argitaratze data: 2022ko azaroaren 25a