Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (PCR) είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη τεχνική στη μοριακή βιολογία για την ενίσχυση θραυσμάτων DNA. Η PCR περιλαμβάνει διάφορα βήματα, όπως μετουσίωση, ανόπτηση και επέκταση. Η επιτυχία αυτής της τεχνικής εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από την ποιότητα των πλακών και των σωλήνων PCR που χρησιμοποιούνται. Υπάρχουν πολλοί παράγοντες που πρέπει να λάβετε υπόψη κατά την επιλογή των κατάλληλων πλακών και σωλήνων PCR για την εφαρμογή σας. Ακολουθούν ορισμένοι βασικοί παράγοντες που πρέπει να λάβετε υπόψη:
1. ΧωρητικότηταΠλάκες PCRκαι οι σωλήνες διατίθενται σε διαφορετικά μεγέθη και χωρητικότητες. Η επιλογή του μεγέθους και της χωρητικότητας εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από την ποσότητα DNA που πρέπει να ενισχυθεί σε μία μόνο αντίδραση. Για παράδειγμα, εάν χρειάζεται να ενισχύσετε μια μικρή ποσότητα DNA, μπορείτε να επιλέξετε έναν μικρό σωλήνα. Εάν χρειάζεται να ενισχυθεί μια μεγάλη ποσότητα DNA, μπορεί να επιλεγεί μια πλάκα με μεγαλύτερη χωρητικότητα.
2. Υλικό Οι πλάκες και οι σωλήνες PCR μπορούν να κατασκευαστούν από διαφορετικά υλικά όπως πολυπροπυλένιο, πολυανθρακικό ή ακρυλικό. Το πολυπροπυλένιο είναι το πιο συχνά χρησιμοποιούμενο υλικό λόγω της χημικής και θερμικής αντοχής του. Είναι επίσης λιγότερο ακριβό σε σύγκριση με άλλα υλικά. Τα πολυανθρακικά και τα ακρυλικά είναι πιο ακριβά, αλλά έχουν καλύτερη οπτική διαύγεια και είναι ιδανικά για PCR πραγματικού χρόνου.
3. Η PCR θερμικής αγωγιμότητας περιλαμβάνει πολλαπλούς θερμικούς κύκλους, που απαιτούν ταχεία θέρμανση και ψύξη του μείγματος αντίδρασης. Επομένως, οι πλάκες και οι σωλήνες PCR πρέπει να έχουν καλή θερμική αγωγιμότητα για να εξασφαλίζεται ομοιόμορφη θέρμανση και ψύξη του μείγματος αντίδρασης. Οι πλάκες με λεπτά τοιχώματα και επίπεδες επιφάνειες είναι ιδανικές για τη μεγιστοποίηση της μεταφοράς θερμότητας.
4. Συμβατότητα Οι πλάκες και τα σωληνάρια PCR θα πρέπει να είναι συμβατά με τον θερμικό κυκλοποιητή που χρησιμοποιείτε. Οι πλάκες και τα σωληνάρια πρέπει να είναι σε θέση να αντέχουν στις υψηλές θερμοκρασίες που απαιτούνται για την ενίσχυση θραυσμάτων DNA. Συμβουλεύεστε πάντα τον κατασκευαστή του θερμικού κυκλοποιητή για τις συνιστώμενες πλάκες και σωληνάρια.
5. Σφράγιση Η στεγανή σφράγιση είναι κρίσιμη για την αποφυγή μόλυνσης του μείγματος αντίδρασης. Οι πλάκες και οι σωλήνες PCR μπορούν να σφραγιστούν χρησιμοποιώντας διαφορετικές μεθόδους, όπως θερμικές σφραγίσεις, αυτοκόλλητες μεμβράνες ή καπάκια. Η θερμική σφράγιση είναι η ασφαλέστερη μέθοδος και παρέχει ένα ισχυρό φράγμα κατά της μόλυνσης.
6. Οι πλάκες και τα σωληνάρια PCR αποστείρωσης πρέπει να είναι απαλλαγμένα από τυχόν μολυσματικές ουσίες που μπορεί να επηρεάσουν την αντίδραση. Επομένως, πρέπει να αποστειρώνονται πριν από τη χρήση. Είναι σημαντικό να επιλέγετε πλάκες και σωληνάρια που αποστειρώνονται εύκολα και είναι ανθεκτικά σε χημικές και θερμικές μεθόδους αποστείρωσης.
Συνοψίζοντας, η επιλογή της σωστής πλάκας και των σωλήνων PCR είναι κρίσιμη για την επιτυχή ενίσχυση DNA. Η επιλογή εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τον τύπο της εφαρμογής, την ποσότητα του ενισχυμένου DNA και τη συμβατότητα με τους θερμικούς κυκλοποιητές.
Suzhou Ace Biomedical Technology Co., Ltdπροσφέρει μια γκάμα πλακών και σωληναρίων PCR υψηλής ποιότητας σε διαφορετικά μεγέθη, χωρητικότητες και υλικά για να καλύψει τις ανάγκες κάθε ερευνητή.
Ώρα δημοσίευσης: 17 Μαΐου 2023