Šta su krioviale?
Kriogene bočice za skladištenjesu male, cilindrične posude sa poklopcem, dizajnirane za skladištenje i konzerviranje uzoraka na ultraniskim temperaturama. Iako su se tradicionalno ove bočice izrađivale od stakla, sada se mnogo češće izrađuju od polipropilena zbog praktičnosti i troškova. Krioviale su pažljivo dizajnirane da izdrže temperature i do -196℃ i da prime širok spektar tipova ćelija. One variraju od dijagnostičkih matičnih ćelija, mikroorganizama, primarnih ćelija do uspostavljenih ćelijskih linija. Osim toga, mogu se u njima čuvati i mali višećelijski organizmi.kriogene bočice za skladištenje, kao i nukleinske kiseline i proteine koji se moraju skladištiti na kriogenim temperaturama skladištenja.
Kriogene bočice za skladištenje dolaze u različitim oblicima, a pronalaženje prave vrste koja ispunjava sve vaše potrebe osigurat će održavanje integriteta uzorka bez preplaćivanja. Pročitajte naš članak kako biste saznali više o ključnim razmatranjima kupovine pri odabiru prave kriogene bočice za vašu laboratorijsku primjenu.
Svojstva kriogene bočice koja treba uzeti u obzir
Vanjski naspram unutarnjih navoja
Ljudi često prave ovaj izbor na osnovu ličnih preferencija, ali zapravo postoje ključne funkcionalne razlike koje treba uzeti u obzir između ove dvije vrste navoja.
Mnoge laboratorije se često odlučuju za bočice s unutrašnjim navojem kako bi smanjile prostor za pohranu epruveta i omogućile bolje pristajanje u kutije za zamrzavanje. Uprkos tome, možete smatrati da je opcija s vanjskim navojem bolja opcija za vas. Smatra se da nose manji rizik od kontaminacije zbog dizajna koji još više otežava ulazak bilo čega osim uzorka u bočicu.
Bočice s vanjskim navojem se općenito preferiraju za genomske primjene, ali obje opcije se smatraju pogodnima za biobankarstvo i druge primjene visokog protoka.
Još jedna stvar koju treba uzeti u obzir kod navoja – ako vaš laboratorij koristi automatizaciju, možda ćete morati razmotriti koji se navoj može koristiti s hvataljkama instrumenata.
Volumen skladišta
Kriogene bočice dostupne su u različitim veličinama kako bi pokrile većinu potreba, ali uglavnom se kreću od kapaciteta između 1 mL i 5 mL.
Ključno je osigurati da vaša krioepruveta nije prepunjena i da ima dodatnog prostora, u slučaju da uzorak nabubri tokom zamrzavanja. U praksi, to znači da se laboratorije odlučuju za bočice od 1 mL kada čuvaju uzorke od 0,5 mL ćelija suspendovanih u krioprotektantu, i bočice od 2,0 mL za 1,0 mL uzorka. Još jedan savjet da ne prepunite bočice je da koristite krioepruvete sa graduiranim oznakama, što će osigurati da spriječite bilo kakvo oticanje koje bi moglo uzrokovati pucanje ili curenje.
Navojni čep u odnosu na preklopni čep
Vrsta poklopca koji odaberete uglavnom zavisi od toga da li ćete koristiti tečni azot ili ne. Ako ćete ga koristiti, onda će vam trebati kriobočice sa navojnim poklopcem. To osigurava da se ne mogu slučajno otvoriti zbog nepravilnog rukovanja ili promjena temperature. Osim toga, navojni poklopci omogućavaju lakše vađenje iz kriogenih kutija i efikasnije skladištenje.
Međutim, ako ne koristite tekući dušik i potreban vam je praktičniji poklopac koji se lakše otvara, onda je preklopni poklopac bolja opcija. Ovo će vam uštedjeti mnogo vremena jer se mnogo lakše otvara, što ga čini posebno korisnim u operacijama s većim protokom i onima koje koriste šaržne procese.
Sigurnost pečata
Najbolji način da osigurate sigurno zatvaranje jeste da se uvjerite da su i poklopac i boca krioepruvete napravljeni od istog materijala. To će osigurati da se istovremeno skupljaju i šire. Ako su napravljeni od različitih materijala, onda će se skupljati i širiti različitim brzinama kako se temperatura mijenja, što će dovesti do pukotina i potencijalnog curenja, a samim tim i kontaminacije.
Neke kompanije nude dvostruke podloške i prirubnicu za najviši nivo sigurnosti uzorka na kriobočicama sa vanjskim navojem. Kriobočice sa O-prstenom smatraju se najpouzdanijim za kriobočice sa unutrašnjim navojem.
Staklo vs. plastika
Radi sigurnosti i praktičnosti, mnoge laboratorije sada koriste plastiku, obično polipropilen, umjesto staklenih ampula koje se mogu zatvoriti toplinom. Staklene ampule se sada smatraju zastarjelim izborom jer se tokom procesa zatvaranja mogu pojaviti nevidljive rupice u obliku sitne rupice, koje prilikom odmrzavanja nakon skladištenja u tekućem dušiku mogu uzrokovati njihovu eksploziju. Također nisu toliko pogodne za moderne tehnike označavanja, što je ključno za osiguranje sljedivosti uzorka.
Samostojeće u odnosu na zaobljeno dno
Kriogene bočice dostupne su kao samostojeće sa zvjezdastim dnom ili kao zaobljene. Ako trebate postaviti bočice na površinu, obavezno odaberite samostojeću verziju.
Sljedivost i praćenje uzoraka
Ovo područje kriogenog skladištenja se često zanemaruje, ali praćenje i sljedivost uzoraka ključni su aspekti koje treba uzeti u obzir. Kriogeni uzorci mogu se čuvati dugi niz godina, tokom kojih se osoblje može mijenjati, a bez pravilno vođenih evidencija mogu postati neidentificirani.
Obavezno odaberite bočice koje olakšavaju identifikaciju uzorka. Stvari na koje biste trebali paziti uključuju:
Velika područja za pisanje za bilježenje dovoljno detalja kako bi se zapisi mogli pronaći ako se bočica nalazi na pogrešnoj lokaciji – obično su dovoljni identitet ćelije, datum zamrzavanja i inicijali odgovorne osobe.
Barkodovi za pomoć u upravljanju uzorcima i sistemima za praćenje
Kape u boji
Napomena za budućnost – razvijaju se ultra-otporni čipovi koji, kada se postave u pojedinačne krioepruvete, potencijalno mogu pohraniti detaljnu termičku historiju, kao i detaljne informacije o seriji, rezultate ispitivanja i drugu relevantnu dokumentaciju o kvaliteti.
Pored razmatranja različitih specifikacija dostupnih bočica, potrebno je razmotriti i tehnički proces skladištenja kriobočica u tekućem dušiku.
Temperatura skladištenja
Postoji nekoliko metoda kriogenog skladištenja uzoraka, a svaka radi na određenoj temperaturi. Opcije i temperature na kojima rade uključuju:
Tečna faza LN2: održavati temperaturu od -196℃
LN2 u parnoj fazi: mogu raditi na određenim temperaturnim rasponima između -135°C i -190°C, ovisno o modelu.
Zamrzivači s dušikovim parama: -20°C do -150°C
Vrsta ćelija koje se pohranjuju i preferirana metoda pohrane istraživača odredit će koju od tri dostupne opcije vaša laboratorija koristi.
Međutim, zbog izuzetno niskih temperatura koje se koriste, nisu sve epruvete ili dizajni prikladni ili sigurni. Materijali mogu postati izuzetno krhki na izuzetno niskim temperaturama, a korištenje bočice koja nije prikladna za upotrebu na odabranoj temperaturi može uzrokovati lomljenje ili pucanje posude tokom skladištenja ili odmrzavanja.
Pažljivo provjerite preporuke proizvođača o pravilnoj upotrebi jer su neke kriogene bočice pogodne za temperature i do -175°C, neke do -150°C, a druge samo do 80°C.
Također je vrijedno napomenuti da mnogi proizvođači navode da njihove kriogene bočice nisu pogodne za uranjanje u tečnu fazu. Ako se ove bočice čuvaju u tečnoj fazi kada se vrate na sobnu temperaturu, ove bočice ili njihovi čepovi mogu se slomiti zbog brzog porasta pritiska uzrokovanog malim curenjima.
Ako se ćelije čuvaju u tečnoj fazi tečnog azota, razmislite o čuvanju ćelija u odgovarajućim kriogenim bočicama termički zatvorenim u kriofleksnim cijevima ili čuvanju ćelija u hermetički zatvorenim staklenim ampulama.
Vrijeme objave: 25. novembar 2022.