ଲମ୍ବା ଆମ୍ପଲିକନ୍ PCB ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଜଳ ନମୁନାରେ ଭାଇରାଲ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସିଂ ପାଇଁ ଉତ୍ତମ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ପ୍ରଦାନ କରେ |

Nature.com ପରିଦର୍ଶନ କରିଥିବାରୁ ଧନ୍ୟବାଦ | ଆପଣ ବ୍ୟବହାର କରୁଥିବା ବ୍ରାଉଜର୍ ସଂସ୍କରଣରେ CSS ପାଇଁ ସୀମିତ ସମର୍ଥନ ଅଛି | ସର୍ବୋତ୍ତମ ଅଭିଜ୍ଞତା ପାଇଁ, ଆମେ ପରାମର୍ଶ ଦେଉଛୁ ଯେ ଆପଣ ଏକ ଅପଡେଟ୍ ବ୍ରାଉଜର୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ (କିମ୍ବା ଇଣ୍ଟରନେଟ୍ ଏକ୍ସପ୍ଲୋରରରେ ସୁସଙ୍ଗତତା ମୋଡ୍ ବନ୍ଦ କରନ୍ତୁ)। ଏହି ସମୟ ମଧ୍ୟରେ, ନିଶ୍ଚିତ କରିବାକୁ ଜାରି ସମର୍ଥନ, ଆମେ ଶ yles ଳୀ ଏବଂ ଜାଭାସ୍କ୍ରିପ୍ଟ ବିନା ସାଇଟ୍ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିବୁ |
COVID-19 ମହାମାରୀ ଆରମ୍ଭରୁ ପରିବେଶ ନମୁନା ଉପରେ ନଜର ରଖିବାର ଗୁରୁତ୍ୱକୁ ବହୁ ପ୍ରଶଂସା କରାଯାଇଛି ଏବଂ ସୁନା ମାନକ ବ୍ୟବହାର କରି କିଛି ମନିଟରିଂ ପ୍ରୟାସ କରାଯାଉଛି, ଯଦିଓ qPCR- ଆଧାରିତ କ ques ଶଳ ମହଙ୍ଗା ଅଟେ | ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ DNA ବାୟୋସେନ୍ସର୍ ଏକ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ବ୍ୟୟବହୁଳ ପ୍ରଦାନ କରିପାରିବ | ସ୍ୱଳ୍ପ ଏବଂ ମଧ୍ୟବିତ୍ତ ଦେଶଗୁଡିକରେ ପରିବେଶ ଜଳ ନମୁନା ଉପରେ ନଜର ରଖିବା ପାଇଁ ସମାଧାନ ଭୂପୃଷ୍ଠ ପରିବର୍ତ୍ତନ ବିନା PCB ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ କରିବାକୁ |ଲିଙ୍ଗ PCR ମାଷ୍ଟରରେ ଲୁଣର ପ୍ରଭାବ ମିଥାଇଲିନ ବ୍ଲୁ (MB) -DNA ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟରେ ମିଶ୍ରିତ ହୋଇଥାଏ | ଆମର ଫଳାଫଳ ଦର୍ଶାଏ ଯେ DNA ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର ଦ length ର୍ଘ୍ୟ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତାକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରେ ଏବଂ ଏହି କାର୍ଯ୍ୟରେ ଦର୍ଶାଏ ଯେ PCR ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକର ଜେଲ୍ ଶୁଦ୍ଧତା ବିନା ଲମ୍ବା ଆମ୍ପଲିକନ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିବାର କ୍ଷମତା ହେଉଛି | ଜଳ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକର ପରିମାପ ପାଇଁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ |ଭାଇରାଲ୍ ଲୋଡ୍ ବୋଡ୍ ପାଇଁ ଏକ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ସମାଧାନ ଭଲ |
ପୋଲିଓ ଏବଂ ହେପାଟାଇଟିସ୍ E1 ର ଜଳ ଦ୍ ne ାରା ସଂକ୍ରମଣର ପ୍ରଥମ ପ୍ରମାଣ ସହିତ 1940 ଦଶକରୁ ୱାଟରବୋର୍ନ୍ ଜୀବାଣୁ ସଂକ୍ରମଣ ଜନସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ବିପଦ ଭାବରେ ଜଣାଶୁଣା। ଚିହ୍ନଟ ପଦ୍ଧତିଗୁଡିକ ସୁନା-ମାନକ qPCR- ଆଧାରିତ କ ques ଶଳ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, ଯାହା ଅତ୍ୟନ୍ତ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ, କିନ୍ତୁ ମହଙ୍ଗା ଯନ୍ତ୍ର ବ୍ୟବହାର କରି ଲାବୋରେଟୋରୀରେ ପରୀକ୍ଷା କରିବାକୁ କୁଶଳୀ କର୍ମଚାରୀ ଆବଶ୍ୟକ କରନ୍ତି | ନମୁନା ପରୀକ୍ଷା ପରିବେଶ ଜଳ ନମୁନା ମନିଟରିଂ ଉପରେ ପ୍ରାଧାନ୍ୟ ଦେବାର ସମ୍ଭାବନା ଅଛି | ତେଣୁ, ସ୍ୱଳ୍ପ ଏବଂ ମଧ୍ୟମ ଆୟକାରୀ ଦେଶଗୁଡିକରେ ଜଳ ଏବଂ ବର୍ଜ୍ୟଜଳ ନମୁନାଗୁଡିକର ନିରନ୍ତର, ପ୍ରକୃତ ସମୟର ମନିଟରିଂ ପାଇଁ ବିକଳ୍ପ ସ୍ୱଳ୍ପ ମୂଲ୍ୟର ପଦ୍ଧତି ଆବଶ୍ୟକ, ଉଦୀୟମାନ ରୋଗ ବିସ୍ତାରର ଶୀଘ୍ର ଚେତାବନୀ, ଏହା ଦ୍ them ାରା ସେମାନଙ୍କୁ ଜୀବାଣୁ ମହାମାରୀର ଗୁରୁତର ସାମାଜିକ ଅର୍ଥନ ic ତିକ ପ୍ରଭାବରୁ ରକ୍ଷା କରିଥାଏ। ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ପାଇଁ ସ୍ୱଳ୍ପ ମୂଲ୍ୟର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ବାୟୋସେନ୍ସର୍ ଏହି ଅନାବଶ୍ୟକ ଆବଶ୍ୟକତା ପାଇଁ ଏକ ଆଶାକର୍ମୀ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ସମାଧାନ ପ୍ରଦାନ କରିପାରନ୍ତି | ନମୁନାରେ ଏକ ମେଳଣ କ୍ରମ ଉପସ୍ଥିତ ହେଲେ ଭୂପୃଷ୍ଠ ଏବଂ ହାଇବ୍ରିଡାଇଜ୍ କରନ୍ତୁ | ଏହା ପରେ ବିଭିନ୍ନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ କ ques ଶଳ ଦ୍ୱାରା ରେଡକ୍ସ ମଧ୍ୟସ୍ଥି ବ୍ୟବହାର କରି ପୋଟାସିୟମ୍ ଆଇରନ୍ / ଫେରୋସିୟାନାଇଡ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ସଙ୍କେତରେ ପରିଣତ ହୋଇପାରିବ | ମିଥାଇଲିନ ବ୍ଲୁ (MB) ହେଉଛି ଏହିପରି ରେଡକ୍ସ-ସକ୍ରିୟ ଅଣୁ | ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ DNA5,6 ସହିତ ଏହାର ଅଧିକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବନ୍ଧନ ବ୍ୟତୀତ ଡବଲ୍-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ DNA (dsDNA) ରେ ଅନ୍ତ c କରଣ କରିବାକୁ ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଇଛି | MB-DNA କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ ଗଠନ ପାଇଁ MB ର ଆନ୍ତ c କରଣ ପ୍ରକୃତି ସେମାନଙ୍କୁ ଅନେକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ DNA ରେ ରେଡକ୍ସ ମଧ୍ୟସ୍ଥି ଭାବରେ ଏକ ଲୋକପ୍ରିୟ ପସନ୍ଦ କରିଥାଏ | ସେନ୍ସର ବିନ୍ୟାସକରଣ 5,6,7,8,9. ଯଦିଓ MB ରୁ DNA ର ଆନ୍ତ c କରଣ ଅଜ୍ଞାତ ଅଟେ, ଏବଂ ଏହି ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା PCR କିମ୍ବା ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ପ୍ରାଇମର ଶୁଦ୍ଧତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, ଏହା ବାସ୍ତବ ପ୍ରୟୋଗ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ ଅଟେ | ଡିଏନ୍ଏ ଏକାଗ୍ରତା ମାପର ବିକଳ୍ପ ଭାବରେ ଟାଇମ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍-ଆଧାରିତ qPCR କିମ୍ବା ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ 9 .ଏପରି ଏକ କାର୍ଯ୍ୟାନ୍ୱୟନରେ ୱନ୍ ଏଟ୍। ଡିଫେରିଏଲ୍ ପଲ୍ସ ଭୋଲ୍ଟାମେଟ୍ରି (DPV) ବ୍ୟବହାର କରି MB ସହିତ PCR ଆମ୍ପଲିକନ୍ ମାପିବା 9. ଅନ୍ୟ କ୍ଷେତ୍ରରେ, ରାମିରେଜ୍ ଇତ୍ୟାଦି | ସ୍କ୍ରିନ-ପ୍ରିଣ୍ଟ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ସହିତ MB ବ୍ୟବହାର କରି RT-LAMP ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ବର୍ଜ୍ୟଜଳରେ SARS-CoV-2 ଚିହ୍ନଟ | ଏକ ମାଇକ୍ରୋଫ୍ଲଏଡିକ୍ PCR ପ୍ଲାଟଫର୍ମରେ ସିଟ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ପରି ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟରେ ଆମ୍ପଲିକନ୍ଗୁଡ଼ିକୁ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ପରିକଳ୍ପିତ |
ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନାରେ ଏକାଗ୍ର ଭାଇରାଲ୍ କଣିକାଗୁଡ଼ିକରୁ ପ୍ରାପ୍ତ ଆମ୍ପଲିକନ୍ ଗୁଡିକର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ କାର୍ଯ୍ୟ ପ୍ରବାହର ସ୍କିମେଟିକ୍ |
ଆମେ ନିକଟରେ SARS-CoV-2 ଆମ୍ପଲିକନ୍ ର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସିଙ୍ଗ୍ ପ୍ରଦର୍ଶନ କରି ସ୍ୱଳ୍ପ ମୂଲ୍ୟରେ ମୁଦ୍ରିତ ସର୍କିଟ୍ ବୋର୍ଡ (PCB) ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ସହିତ DPV ଉପରେ ଆଧାରିତ ଏବଂ ସାଇକ୍ଲିକ୍ ଭୋଲ୍ଟାମେଟ୍ରି (CV) ଶିଖର ପରିବର୍ତ୍ତନରେ MB-DNA କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସଗୁଡ଼ିକର ଆଡର୍ସପସନ୍ ଦ୍ ind ାରା ପ୍ରବର୍ତ୍ତିତ | ସାମ୍ପ୍ରତିକ 11ଆମେ ରିପୋର୍ଟ କରୁଛୁ ଯେ CDC- ପରାମର୍ଶିତ N1 ଫରୱାର୍ଡ ଏବଂ N2 ଓଲଟା ପ୍ରାଇମର୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଗଠିତ ଲମ୍ବା DNA ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକ (N1-N2, \ ({943} \, \ hbox) ସେନ୍ସର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଉନ୍ନତ ର ar ଖିକତା ଦେଖାଇଲା | (N1, \ (72 \, \ hbox {bp} \)) N1 ଫରୱାର୍ଡ ଏବଂ N1 ଓଲଟା ପ୍ରାଇମର୍ ସେଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଗଠିତ | ଏହି ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ମୁକ୍ତ ଜଳରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ DNA ମିଶ୍ରଣ ବ୍ୟବହାର କରି ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଇଛି | ପ୍ଲାଟଫର୍ମ SARS-CoV ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ମଧ୍ୟ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା | ସିମୁଲେଡ୍ ବର୍ଜ୍ୟଜଳ ନମୁନାରେ -2 ଆମ୍ପଲିକନ୍ (SARS-CoV-2 RNA ସହିତ ସମୁଦାୟ RNA ନମୁନାକୁ ସ୍ପାଇକ୍ କରି ପ୍ରାପ୍ତ ହୋଇଛି) .ଏହି କାରଣରୁ RNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା ଏବଂ ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ ସମୟରେ କାଟିବାରେ ସଂକ୍ରମିତ, 12,13 ଏହି ହେଟ୍ରୋଜେନିୟସ୍ ନମୁନା ସହିତ ଲମ୍ବା ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକୁ ବୃଦ୍ଧି କରିବା କଷ୍ଟକର | ତେଣୁ, ବର୍ଜ୍ୟଜଳରେ SARS-CoV-2 ଆମ୍ପଲିକନ୍ ର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସିଙ୍ଗର ପ୍ରଦର୍ଶନ କ୍ଷୁଦ୍ର \ (72 \, \ hbox {bp} \) N1 ଖଣ୍ଡରେ ସୀମିତ |
ଏହି କାର୍ଯ୍ୟରେ, ଆମେ ଫେଜ୍ Phi6 ର ENIG PCB- ଆଧାରିତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସିଙ୍ଗର ସମ୍ଭାବ୍ୟତା ଅନୁସନ୍ଧାନ କରିଛୁ ଏବଂ ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନାରୁ ପୃଥକ (ଚିତ୍ର 1) .Phi6 ପର୍ଯ୍ୟାୟଗୁଡିକ SARS-CoV-2 ଏବଂ ଆକାରରେ ତୁଳନାତ୍ମକ (80-100 nm) | ଏକ ଲିପିଡ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଏବଂ ଏକ ସ୍ପାଇକ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ମଧ୍ୟ ଅଛି | ଏହି କାରଣଗୁଡିକ ପାଇଁ, ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଫେଜ୍ Phi6 ହେଉଛି SARS-CoV-2 ପାଇଁ ଏକ ଲୋକପ୍ରିୟ ସରୋଗେଟ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଆବଦ୍ଧ ପାଥୋଜେନିକ୍ RNA ଜୀବାଣୁ 14,15.RNA ଫେଜ୍ କଣିକାଠାରୁ ପୃଥକ ଭାବରେ cDNA ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପାଇଁ ଏକ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା | 117 ଏବଂ 503 ବେସ୍ ଯୁଗଳର ଦୁଇଟି DNA ଖଣ୍ଡ ପାଇବା ପାଇଁ PCR ଉପଲବ୍ଧ ପ୍ରାଇମର୍ ଉପରେ ଆଧାର କରି \, \ hbox {bp} \) ଏବଂ \ (503 \, \ hbox {bp} \)) | \ hbox {pg} / {\ upmu \ hbox {l}}} \) ରୁ \ ({20} \, {\ hbox {ng} / {\ upmu \ hbox {l}}} \)) ଉଭୟ ଖଣ୍ଡ ପାଇଁ MB ର ଉପସ୍ଥିତି, ସେନ୍ସର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଲୁଣର ପ୍ରଭାବ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରଫୋଟୋମେଟ୍ରିକ୍ ମାପ ଦ୍ୱାରା ବର୍ଣ୍ଣିତ ଏବଂ କ୍ରସ୍-ବ ated ଧ ହୋଇଛି | ଏହି କାର୍ଯ୍ୟର ମୁଖ୍ୟ ଅବଦାନଗୁଡ଼ିକ ନିମ୍ନଲିଖିତ:
DNA ଖଣ୍ଡ ଦ length ର୍ଘ୍ୟ ଏବଂ ନମୁନାରେ ଲୁଣର ଉପସ୍ଥିତି ସମ୍ବେଦନଶୀଳତାକୁ ଦୃ strongly ଭାବରେ ପ୍ରଭାବିତ କରିଥାଏ |ଆମର ଫଳାଫଳ ଦର୍ଶାଏ ଯେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ MB, DNA, ଏବଂ ଭୋଲ୍ଟାମେଟ୍ରିକ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଥିବା ସେନ୍ସରର ବିଭିନ୍ନ ଯନ୍ତ୍ରକ on ଶଳ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, DNA ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ ଦ length ର୍ଘ୍ୟ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରି ଲମ୍ବା ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକ ଅଧିକ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ଦେଖାଏ, ଯଦିଓ ଲୁଣ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟ ଉପରେ ନକାରାତ୍ମକ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ | MB ଏବଂ DNA |
ଡିଏନ୍ଏ ଏକାଗ୍ରତା ଅଣମୋଡିଫାଏଡ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଗୁଡିକରେ MB-DNA ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରେ ଆମେ ଦର୍ଶାଇଥାଉ ଯେ MB-DNA ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ର ବିଭିନ୍ନ ଯନ୍ତ୍ରକ DNA ଶଳ DNA ଏକାଗ୍ରତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ | ଅଳ୍ପ ପରିମାଣର DNA ଏକାଗ୍ରତା \ ({\ hbox {ng} / {\ upmu \ hbox {l}}} \), ଆମେ ଦେଖିଲୁ ଯେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ କରେଣ୍ଟ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମୁଖ୍ୟତ the ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଉପରେ MB-DNA ର ଆଡର୍ସପସନ୍ ଦ୍ determined ାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଉଥିଲାବେଳେ ନିମ୍ନ ଏକାଗ୍ରତାରେ ଉଚ୍ଚ DNA ଏକାଗ୍ରତାରେ, ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ କରେଣ୍ଟ୍ ରେଡକ୍ସର ଷ୍ଟେରିକ୍ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇଥିଲା | DNA ଆଧାର ଯୁଗଳ ମଧ୍ୟରେ MB ସନ୍ନିବେଶ ହେତୁ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ |
ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନାରେ ଭାଇରାଲ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ENIG PCB- ଆଧାରିତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସିଙ୍ଗ୍, ପୋୱାଇ ହ୍ରଦ, ଆଇଆଇଟି ମୁମ୍ବାଇ କ୍ୟାମ୍ପସ୍ର ଜଳ ନମୁନାରୁ ମିଳିଥିବା Phi6-added \ (503 \, \ hbox {bp} \) DNA ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ଦ୍ୱାରା ଏହି ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣଗୁଡିକ ବ valid ଧ କରାଯାଇଥିଲା | ଫଳାଫଳ ପର୍ଯ୍ୟାୟ
ସ୍ୱଳ୍ପ ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ମନିଟରିଂ ସିଷ୍ଟମ୍, ଅଲିଗ୍ନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ କିମ୍ବା ଆପ୍ଟାମର୍ ସହିତ ଅଧିକ ସେଲଫି ଲାଇଫ୍ ସହିତ ପ୍ରୟୋଗର ସ୍ୱଳ୍ପ ମୂଲ୍ୟ ଏବଂ ସମ୍ଭାବ୍ୟତା |
ଫେଜ୍ Phi6 ହେଉଛି ସାଇଟୋଭିରିଡା ପରିବାରର ଏକ ଆବଦ୍ଧ dsRNA ଜୀବାଣୁ ଯାହା ସିଉଡୋମାନାସ୍ ସିରିଞ୍ଜକୁ ସଂକ୍ରମିତ କରେ | Phi6 ଫେଜ୍ ର ଜିନୋମ୍ 3 ଖଣ୍ଡ ଆକାରରେ ବିଦ୍ୟମାନ ଅଛି: S (\ (2.95 \, \ hbox {Kb} \)), M (\ (4.07) \, \ hbox {Kb} \)) ଏବଂ L (\ (6.37 \, \ hbox {Kb} \)) 16,17। ଲାବୋରେଟୋରୀରେ ସହଜରେ ବ grown ିପାରିବ | Phi6 Phi6 ଏବଂ ଏହାର ହୋଷ୍ଟ ସିଉଡୋମାନାସ୍ ସିରିଞ୍ଜ ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ଭାଇରସ୍, ଲାଭାଲ୍ ୟୁନିଭରସିଟି, କାନାଡାର ଫେଲିକ୍ସ ଡି ହେରେଲ୍ ରେଫରେନ୍ସ ସେଣ୍ଟରରୁ କ୍ରୟ କରାଯାଇଥିଲା (ରେଫରେନ୍ସ ସେଣ୍ଟର କାଟାଲଗ୍ ନମ୍ବର ଯଥାକ୍ରମେ HER-102 ଏବଂ HER-1102) | .Phi6 ଫେଜ୍ ଏବଂ ଏହାର ହୋଷ୍ଟ ରେଫରେନ୍ସ ସେଣ୍ଟର୍ ଦ୍ୱାରା ନିର୍ଦ୍ଦେଶିତ ଭାବରେ ପୁନ ived ଜୀବିତ ହୋଇଥିଲା | ଫେଜ୍ Phi6 ପ୍ଲେଟ୍ ଲାଇସିସ୍ ଏବଂ \ (\ ପ୍ରାୟ 10 ^ {12} \, {\ hbox {PFU} / \ hbox {ସହିତ ଚୂଡ଼ାନ୍ତ ଟାଇଟର୍ ପାଇବାକୁ ଶୁଦ୍ଧ କରାଯାଇଥିଲା | ml}} \) (ପ୍ଲେକ୍ ଫର୍ମିଙ୍ଗ୍ ୟୁନିଟ୍ / ମିଲିଲିଟର) .RNA ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ GenElute ™ ୟୁନିଭର୍ସାଲ୍ ଟୋଟାଲ୍ RNA ଶୁଦ୍ଧକରଣ କିଟ୍ (ସିଗମା-ଆଲଡ୍ରିଚ୍) ବ୍ୟବହାର କରି ଶୁଦ୍ଧ ଫେଜ୍ କଣିକା ଠାରୁ ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା | ସଂକ୍ଷେପରେ, ଏକ ଶୁଦ୍ଧ ଫେଜ୍ Phi6 ନିଲମ୍ବନ \ ({ 100} \, {{\ upmu \ hbox {l}}} \) ଲାଇସେଡ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଲାଇସେଟ୍ ଏକ ସ୍ପିନ୍ ସ୍ତମ୍ଭରେ ଲୋଡ୍ ହୋଇ RNA କୁ ରଜନୀ ସ୍ତମ୍ଭରେ ବାନ୍ଧିବାକୁ ଅନୁମତି ଦେଲା | କିଟ୍ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରଦତ୍ତ 50} \, {{\ upmu \ hbox {l}}} \)। \ (260 \, \ hbox {nm} \) ରେ ଅବଶୋଷଣ ଦ୍ୱାରା RNA ର ଏକାଗ୍ରତାକୁ ଆକଳନ କର | ({-80} \, {^ {\ circ} \ hbox {C}} \) ପରବର୍ତ୍ତୀ ବ୍ୟବହାର ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ। \ ({2} \, {\ upmu \ hbox {g}} \) iScript cDNA ସିନ୍ଥେସିସ୍ କିଟ୍ (ବାୟୋ) ନିର୍ମାତାଙ୍କ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ cDNA ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପାଇଁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ରେଡ୍ ଲାବୋରେଟୋରୀଗୁଡିକ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା | ସଂକ୍ଷେପରେ, ଏକ cDNA ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ 3 ଟି ପଦକ୍ଷେପ ରହିଛି: \ ({25} \, {^ {\ ସର୍କ} \ hbox {C}} \ ) \ ({5} \, {\ hbox {min}} \), \ ({20} \, {\ hbox {min}} \) ର ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ \ ({46} \, {^ {\ circ) } \ hbox {C}} \), ଏବଂ ଓଲଟା ରେକର୍ଡର୍ \ ({95} \, {^ {\ circ} \ hbox {C}} \) ରେ \ ({1} \, {\ hbox {ମିନିଟ୍ ରେ ଅଛି | %})। ଏକ miniPCR® mini8 ଥର୍ମାଲ୍ ସାଇକ୍ଲର୍ରେ PCR ପାଇଁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ cDNA ବ୍ୟବହାର:
\ (117 \, \ hbox {bp} \) ଏବଂ \ (503 \, \ hbox {bp} \) ପାଇଁ ପ୍ରାଥମିକତା ଯଥାକ୍ରମେ M ବିଭାଗର 1476-1575 ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ ଏବଂ L ବିଭାଗର 458-943 ନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ ସହିତ ସମାନ | ।
ଆଇଜି ମୁମ୍ବାଇ କ୍ୟାମ୍ପସରେ ଥିବା ଏକ ହ୍ରଦ (ପୋୱାଇ ହ୍ରଦ, ପୋୱାଇ, ମୁମ୍ବାଇ) ଫେଜ୍ କଣିକା ଯୋଡିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା | ନିଲମ୍ବିତ କଣିକା, ଏବଂ ତାପରେ Phi6 ଫେଜ୍ ଯୋଡାଗଲା | \ (10 ​​^ {6} \, {\ hbox {PFU} / \ hbox {ml}} ର ଯୋଡନ୍ତୁ \ \) ରୁ \ ({100} \, {\ hbox {ml}} \) ଫିଲ୍ଟର୍ ହ୍ରଦ ଜଳ, \ ({4} \, {^ {\ ବୃତ୍ତ} \ hbox {C}} \) ରେ | ଏକ ଛୋଟ ଆଲିକଟ୍ ଥିଲା | ପ୍ଲେକ୍ ଆସେ ଦ୍ୱାରା ଭାଇରାଲ୍ ଲୋଡ୍ ମାପ ପାଇଁ ସଂରକ୍ଷିତ | ସ୍ପାଇକ୍ଡ୍ Phi6 ଜୀବାଣୁ କଣିକାକୁ ଏକାଗ୍ର କରିବା ପାଇଁ ଆମେ ଦୁଇଟି ଭିନ୍ନ ପଦ୍ଧତି ପରୀକ୍ଷା କରିଥିଲୁ: (୨)) ପଲିଥିନ୍ ଗ୍ଲାଇକଲ୍ (PEG) ଆଧାରିତ ଜୀବାଣୁ ଏକାଗ୍ରତା ପଦ୍ଧତିକୁ ବନ୍ୟା ପରିସ୍ଥିତିରୁ ଆଡାପ୍ଟ୍ଟ୍ କରାଯାଇଥିଲା |20। ଯେହେତୁ PEG- ଆଧାରିତ ପଦ୍ଧତିର ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଦକ୍ଷତା ଆଲୁମିନିୟମ୍ ହାଇଡ୍ରକ୍ସାଇଡ୍ ପଦ୍ଧତି ଅପେକ୍ଷା ଭଲ ବୋଲି ଜଣାପଡିଛି, ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନାରୁ Phi6 କଣିକାକୁ ଏକାଗ୍ର କରିବା ପାଇଁ PEG- ଆଧାରିତ ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା |
ବ୍ୟବହୃତ PEG ପଦ୍ଧତିଟି ଏହିପରି ଥିଲା: PEG 8000 ଏବଂ \ (\ hbox {NaCl} \) 8% PEG 8000 ଏବଂ \ (0.2 \, \ hbox {M} \) ପାଇବା ପାଇଁ Phi6- ସ୍ପିକେଡ୍ ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନାରେ ଯୋଗ କରାଯାଇଥିଲା | s hbox {NaCl} \)। ), ତାପରେ \ (4700 \, \ hbox {g} \) ରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗଡ୍ ହେଉଛି \ ({45} \, {\ hbox {ମିନିଟ୍}} \)। ଅଲ ern କିକ ତ୍ୟାଗ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ପେଲେଟକୁ \ ({1} \, ସମାନ ଅଲ ern କିକ ପଦାର୍ଥରେ h \ hbox {ml}} \) ସମସ୍ତ ସ୍ପାଇକ୍ ଏବଂ ଭାଇରସ୍ ଏକାଗ୍ରତା ପରୀକ୍ଷଣ ଟ୍ରିପ୍ଲିକେଟ୍ ରେ କରାଯାଇଥିଲା | ଏକାଗ୍ରତା ପରେ, ପ୍ଲେକ୍ ଆସେ ଦ୍ୱାରା ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଦକ୍ଷତା ମାପିବା ପାଇଁ ଏକ ଛୋଟ ଆଲିକଟ୍ ସଂରକ୍ଷିତ କରାଯାଇଥିଲା | କିଟ୍-ଯୋଗାଇ ଦିଆଯାଇଥିବା ଏଲିଟେସନ୍ ବଫର୍ \ ({40} \, {\ upmu \ hbox {l}} \) ରେ ଯେହେତୁ RNA ଏକାଗ୍ରତା ଟ୍ରିପ୍ଲିକେଟ୍ ରେ ନମୁନା ଠାରୁ ନମୁନା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଭିନ୍ନ ହେବ, \ ({2} \, {\ upmu \ RNA ର hbox {l}} \) ଏହାର ଏକାଗ୍ରତାକୁ ଖାତିର ନକରି ନମୁନାଗୁଡ଼ିକର cDNA ସିନ୍ଥେସିସ୍ ନିର୍ବିଶେଷରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥାଏ | CDNA ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପୂର୍ବରୁ ବର୍ଣ୍ଣିତ ପରି କରାଯାଇଥିଲା | \ ({1} \, {\ upmu \ hbox {l}} \) cDNA \ (117 \, \ hbox {bp} \) ଏବଂ \ (503 \, \ hbox {) ପାଇଁ 35 ଚକ୍ର ପାଇଁ PCR ପାଇଁ \ ({20} \, {\ upmu \ hbox {l}} \) ପାଇଁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା | bp} \) ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକ ଏହି ନମୁନାଗୁଡିକ “1: 1 as” ଭାବରେ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଛି, ଅର୍ଥାତ୍ ବିନା ମିଶ୍ରଣରେ | ଏକ ନୋ-ଟେମ୍ପଲେଟ୍ କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ (NTC) ଏକ ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଭାବରେ ସେଟ୍ ଅପ୍ ହୋଇଥିବାବେଳେ ଶୁଦ୍ଧ ଫେଜ୍ ଠାରୁ ପୃଥକ RNA ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ସିଡିଏନ୍ଏ ସିନ୍ଥାଇଜ୍ ହୋଇଛି | ଏକ ପଜିଟିଭ୍ କଣ୍ଟ୍ରୋଲ୍ (PC) ପାଇଁ ଏକ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ସମସ୍ତ ନମୁନା ପାଇଁ ଚକ୍ର ଥ୍ରେସହୋଲ୍ଡ (Ct) ରେକର୍ଡ କରାଯାଇଥିଲା | ଏହା ସହିତ, ମିଶ୍ରିତ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକ \ ({1} \, {\ upmu \ hbox {l}} \) ଫିଲ୍ଟର ହ୍ରଦ ଜଳରେ cDNA ମିଶ୍ରିତ 1: 100 ବ୍ୟବହାର କରି | 35 ({20} \, {\ upmu \ hbox {l}} \) 35 ଚକ୍ର ପାଇଁ PCR | ଏହି ନମୁନାଗୁଡିକ “1: 100 as” ଭାବରେ ଉପସ୍ଥାପିତ ହୋଇଛି |
ଅତିରିକ୍ତ ସୁନା ଧାତୁର ଆବଶ୍ୟକତା ବିନା ବାଣିଜ୍ୟିକ ଭାବରେ ଉପଲବ୍ଧ ସ୍ୱଳ୍ପ ମୂଲ୍ୟରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଲେସ୍ ନିକେଲ୍ ଇମର୍ସନ୍ ସୁନା (ENIG) ପ୍ରକ୍ରିୟା ବ୍ୟବହାର କରି PCB ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଗଠନ କରାଯାଇଛି | ପିରାନହା ସଲ୍ୟୁସନ୍ କିମ୍ବା ସଲଫୁରିକ୍ ଏସିଡ୍ ସାଇକ୍ଲିକ୍ ଭୋଲ୍ଟାମେଟ୍ରି ସୁପାରିଶ କରାଯାଏ ନାହିଁ କାରଣ ଏହା ପତଳା ସୁନା ସ୍ତର (ଘନତା \ (\ ପାଖାପାଖି \) \ (100 \, \ hbox {nm} \) ର ପିଲିଂ ହୋଇପାରେ ଏବଂ ପ୍ରବୃତ୍ତ ତମ୍ବା ସ୍ତରଗୁଡିକୁ ପ୍ରକାଶ କରିଥାଏ | 21, 22, 23, 24, 25 କୁ କ୍ଷୟ କରିବାକୁ | Easy \) MB ରେ \ ({4} \, {^ {\ circ} \ hbox {C}} \) \ ({1} \, {\ hbox {h}} \) ସହଜ ସନ୍ନିବେଶ ପାଇଁ | ଆମର ପୂର୍ବ କାର୍ଯ୍ୟରେ , ଆମେ ଦେଖିଲୁ ଯେ MB ର ଏକାଗ୍ରତା 11 ବ increasing ାଇ ସେନସର ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ଏବଂ ର ar ଖିକତା ଉନ୍ନତ ହୋଇଛି | ଆମର ପୂର୍ବ କାର୍ଯ୍ୟରେ ରିପୋର୍ଟ ହୋଇଥିବା ଅପ୍ଟିମାଇଜେସନ୍ ଉପରେ ଆଧାର କରି ଆମେ \ ({50} \, {\ upmu \ hbox {M}} \) MB ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲୁ | ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ DNA ଏମ୍ବେଡ୍ କରିବା ପାଇଁ ଏକାଗ୍ରତା | ଡବଲ୍-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ DNA (ds-DNA) ର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ଆନିଅନିକ୍ କିମ୍ବା କ୍ୟାଟିନିକ୍ ଇଣ୍ଟରକାଲେଟର ବ୍ୟବହାର କରି ହାସଲ କରାଯାଇପାରେ | ଅନ୍ୟ ପଟେ, ds-DNA6 ର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ଏମବି ପରି କ୍ୟାଟେନିକ୍ ଇଣ୍ଟରକାଲେଟରଗୁଡିକ ଛୋଟ ଇନକ୍ୟୁବେସନ ସମୟ ଆବଶ୍ୟକ କରନ୍ତି, ପ୍ରାୟ \ ({1} \, {\ hbox {h}} \) ଆବଶ୍ୟକ କରନ୍ତି | ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ \ ({5} \, {{\ ଅପମୁ \ ହବକ୍ସ {l}}} \), ତାପରେ ଅନ୍ୟ ଏକ ନମୁନାକୁ ଯିବା ପୂର୍ବରୁ ଏକ IPA- ଆର୍ଦ୍ର ରାଗ ସହିତ ସଫା କର |ଗୋଟିଏ ମାପ। ପ୍ରତ୍ୟେକ ନମୁନା 5 ଟି ଭିନ୍ନ ଭିନ୍ନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଉପରେ ପରୀକ୍ଷଣ କରାଯାଇଥିଲା ଯଦି ଅନ୍ୟଥା ଦର୍ଶାଯାଇ ନାହିଁ | PDV ଏବଂ CV ମାପ ଏକ ପାଲମସେନ୍ସ ସେନ୍ସିଟ୍ ସ୍ମାର୍ଟ ପୋଟେନିଓଷ୍ଟାଟ ବ୍ୟବହାର କରି କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ PSTrace ସଫ୍ଟୱେର୍ ପୋଟେଣ୍ଟିଓଷ୍ଟାଟ ବିନ୍ୟାସ ଏବଂ ତଥ୍ୟ ହାସଲ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା, ଶିଖର ସାମ୍ପ୍ରତିକ ଗଣନାକୁ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରି ନିମ୍ନଲିଖିତ ସେଟିଂସମୂହ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ | DPV ଏବଂ CV ମାପ ପାଇଁ:
DPV: ସନ୍ତୁଳନ ସମୟ = \ (8 \, \ hbox {s} \), ଭୋଲଟେଜ୍ ଷ୍ଟେପ୍ = \ (3 \, \ hbox {mV} \), ପଲ୍ସ ଭୋଲଟେଜ୍ = \ (25 \, \ hbox {mV} \), ନାଡିର ଅବଧି = \ (50 \, \ hbox {ms} \), ସ୍କାନ୍ ହାର = \ ({20} \, \ hbox {mV / s} \)
CV: ସନ୍ତୁଳନ ସମୟ = \ (8 \, \ hbox {s} \), ଭୋଲଟେଜ୍ ଷ୍ଟେପ୍ = \ (3 \, \ hbox {mV} \), ସ୍ୱିପ୍ ରେଟ୍ = \ ({300} \, \ hbox {mV / s } \)
DNA ({50} \, {\ upmu \ hbox {M}} \) MB: (a) \ (503 \, \ hbox {bp} \) DPV, (b) \ ସହିତ ଜଟିଳ DNA ର ଭୋଲ୍ଟାମୋଗ୍ରାମ୍ ରୁ ପାଇକ ସ୍ରୋତ | (503 \, \ hbox {bp} \) CV, (c) \ (117 \, \ hbox {bp} \) DPV, (d) \ (117 \, \ hbox {bp} \) CV |
ENIG PCB ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ସରେ DPV ଏବଂ CV ଭୋଲ୍ଟାମୋଗ୍ରାମ୍ \ ({50} \, {\ upmu \ hbox {M}} \) MB ସହିତ DNA ସହିତ ଜଟିଳ MB (10 - \ ({20} \, {\ hbox {ng) ରେ ମିଳିଲା | \ / {\ upmu \ hbox {l}}} \) ଅର୍ଥାତ୍ 0.13 - \ ({0.26} \, {\ upmu \ hbox {M}} \) ପାଇଁ \ (117 \, \ hbox {bp} \) ଏବଂ 0.03 - \ ({0.06} \, {\ upmu \ hbox {M}} \) ପାଇଁ \ (503 \, \ hbox {bp} \))। ଜେଲ-ଶୁଦ୍ଧ PCR ଉତ୍ପାଦ ବ୍ୟବହାର କରି DPV ଏବଂ CV ମାପ (ଶିଖର କରେଣ୍ଟ) ର CV ମାପ ତୁଳନାରେ, DPV ମାପ ଅଧିକ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ଦେଖାଏ (ଡିଏନ୍ଏ ଏକାଗ୍ରତାର କାର୍ଯ୍ୟ ଭାବରେ କରେଣ୍ଟ) କାରଣ CV ମାପରେ ପୃଷ୍ଠଭୂମି କ୍ୟାପିସିଟିଭ୍ ସ୍ରୋତଗୁଡ଼ିକ ଫାରାଡାଇକ୍ ସ୍ରୋତକୁ ଲୁଚାଇଥାଏ | ବକ୍ସପ୍ଲଟ୍ର ପ୍ରତ୍ୟେକ ବାକ୍ସ ପାଇଁ 5 ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଠାରୁ ମାପ ଧାରଣ କରିଥାଏ | ସମସ୍ତ ମାପ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍-ଟୁ-ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଭେରିଏସନ କାରଣରୁ ମାପ ତ୍ରୁଟିରୁ ରକ୍ଷା ପାଇବା ପାଇଁ ସମାନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ସେଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରେ | , ଅଧିକ (\ (503 \, \ hbox {bp} \)) \, \ hbox {bp} \ ତୁଳନାରେ \ (117)) ଖଣ୍ଡ | ଏହା ଆମର ପୂର୍ବ କାର୍ଯ୍ୟରେ ରିପୋର୍ଟ ହୋଇଥିବା ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଆଡସର୍ପସନ୍ ର ଆଶା କରାଯାଉଥିବା ଧାରା ସହିତ ସମାନ ଅଟେ | MB-DNA କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସର ଆଡସର୍ପସନ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଉପରେ ଚାର୍ଜ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣକୁ ସୁଗମ କରିଥାଏ, ଯାହା ଶିଖର କରେଣ୍ଟ ବୃଦ୍ଧିରେ ସହାୟକ ହୋଇଥାଏ | ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ MB-DNA ଆନ୍ତ c କରଣ ଉପରେ ଅଲିଗ୍ନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ ଆକାର ଏବଂ କ୍ରମର ପ୍ରଭାବ ଦର୍ଶାଇଛନ୍ତି 27,28,29,30 | ଗୁଆନାଇନ୍ | ଦୁଇଟି ଆମ୍ପଲିକନ୍ (\ (117 \, \ hbox {bp} \) ଏବଂ \ (503 \, \ hbox {bp} \)) ର ସାଇଟୋସିନ୍ (GC) ବିଷୟବସ୍ତୁ ପ୍ରାୟ 50% ଥିଲା, ଯାହା ସୂଚାଇ ଦେଉଛି ଯେ ପାର୍ଥକ୍ୟ ହେବାର ଅଛି | amplicon ଦ length ର୍ଘ୍ୟକୁ | \) ଏବଂ \ (> {10} \, {\ hbox {ng} / {\ upmu \ hbox {l}}} \) ପାଇଁ \ (117 \, \ hbox {bp} \)), ଆମେ ଦୁଇଟି ବର୍ଦ୍ଧନ ଦେଖୁ | ସବ୍ ର ଶିଖର ସ୍ରୋତ ଉଭୟ DPV ଏବଂ CV ମାପରେ ହ୍ରାସ ପାଇଥାଏ |
在 存在 \ (2 \, \ hbox {mM} \) \ ({\ hbox {MgCl} _2} \): (କ) \ (503 \, \ hbox {bp} \) DPV, (b) \ (503 \, \ hbox {bp} \) CV, (c) \ (117 \, \ hbox {bp} \) DPV ， (d) \ (117 \, \ hbox {bp} \) CV。
PCR ମାଷ୍ଟର ମିଶ୍ରଣରେ ଥିବା ଲୁଣ MB ଏବଂ DNA ମଧ୍ୟରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟରେ ବାଧା ସୃଷ୍ଟି କରିଥାଏ, ତେଣୁ \ (2 \, \ hbox {mM} \) \ (\ hbox {MgCl} _2 \) ସହିତ \ ({50} \, {\) ଯୋଗ କରି | upmu \ hbox {M}} \) MB-DNA ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଉପରେ ଲୁଣର ପ୍ରଭାବ ଅଧ୍ୟୟନ କରିବା ପାଇଁ MB ଜେଲ୍-ଶୁଦ୍ଧ ଉତ୍ପାଦ | ଚିତ୍ର 3 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ଆମେ ଦେଖିଲୁ ଯେ ଅଧିକ DNA ଏକାଗ୍ରତା ପାଇଁ (\ (> {2} \, {\) hbox {ng} / {\ upmu \ hbox {l}}} \) (503 \, \ hbox {bp} \) ଏବଂ \ (> {10} \, {\ hbox {ng} / {\ upmu \ hbox { l}}} \) ପାଇଁ \ (117 \, \ hbox {bp} \)), DPV ଏବଂ CV ରେ ଲୁଣର ମିଶ୍ରଣ ମାପ ଉପରେ ବିଶେଷ ପ୍ରଭାବ ପକାଇ ନଥିଲା (ପ୍ରତିନିଧୀ ଭୋଲ୍ଟାମୋଗ୍ରାମ୍ ପାଇଁ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ସୂଚନାରେ ଚିତ୍ର S2 ଦେଖନ୍ତୁ) | ତଥାପି, କମ୍ ଡିଏନ୍ଏ ଏକାଗ୍ରତା, ଲୁଣର ମିଶ୍ରଣ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତାକୁ ବହୁ ମାତ୍ରାରେ ହ୍ରାସ କରିଥାଏ, ଫଳସ୍ୱରୂପ DNA ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ କରେଣ୍ଟରେ କ significant ଣସି ପରିବର୍ତ୍ତନ ହୋଇନଥାଏ | MB-DNA ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଏବଂ ଆନ୍ତ c କରଣ ଉପରେ ଲୁଣର ସମାନ ନକାରାତ୍ମକ ପ୍ରଭାବ ଅନ୍ୟ ଅନୁସନ୍ଧାନକାରୀଙ୍କ ଦ୍ reported ାରା ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଇଥିଲା 33,34। \ (\ hbox { Mg} ^ {2 +} \) କ୍ୟାଟେସନ୍ ଗୁଡିକ DNA ର ନକାରାତ୍ମକ ଫସଫେଟ୍ ମେରୁଦଣ୍ଡ ସହିତ ବାନ୍ଧିଥାଏ, ଯାହା ଦ୍ MB ାରା MB ଏବଂ DNA ମଧ୍ୟରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କାର୍ଯ୍ୟରେ ବାଧା ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ | ଅଧିକ DNA ଏକାଗ୍ରତା, ରେଡକ୍ସ-ସକ୍ରିୟ MB ଗୁଡ଼ିକର ଷ୍ଟେରିକ୍ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ନିମ୍ନ ଶିଖର ସ୍ରୋତରେ ପରିଣତ ହୁଏ, ତେଣୁ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ସେନସର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ବିଶେଷ ପ୍ରଭାବ ପକାଇବ ନାହିଁ ସମ୍ପୁର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ- ପରିବେଶ ଜଳ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକର ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ ପାଇଁ, ଯେଉଁଠାରେ PCR ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକର ଜେଲ୍ ଶୁଦ୍ଧତା ସମ୍ଭବ ନୁହେଁ |
ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ ପରିସର 600-700 \ (\ hbox {nm} \) ପାଇଁ ଅବଶୋଷଣ ବକ୍ର ଅନ୍ତର୍ଗତ କ୍ଷେତ୍ର \ ({50} \, {\ upmu \ hbox {M}} \) MB ସହିତ ଜଟିଳ DNA ର ଏକାଗ୍ରତା ପାଇଁ | ) \ (503 \, \ hbox {bp} \) ଲୁଣ ସହିତ ଏବଂ ବିନା (\ (2 \, \ hbox {mM} \) \ (\ hbox {MgCl} _2 \)), (b) \ (117 \, \ hbox {bp} \) ଲୁଣ ସହିତ ଏବଂ ବିନା (\ (2 \, \ hbox {mM} \) \ (\ hbox {MgCl} _2 \))। \ ({0} \, {\ hbox {pg} / {\ upmu \ hbox {l}}} \) DNA ଏକାଗ୍ରତା \ ({50} \, {\ upmu \ hbox {M}} \) MB ନମୁନା ସହିତ DNA ନାହିଁ |
ଉପରୋକ୍ତ ଫଳାଫଳକୁ ଅଧିକ ଯାଞ୍ଚ କରିବାକୁ, ଆମେ ଏକ UV / Vis ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରଫୋଟୋମିଟର (ଥର୍ମୋ ସାଇଣ୍ଟିଫିକ୍ ମଲ୍ଟିସ୍କାନ୍ GO) ବ୍ୟବହାର କରି ଅପ୍ଟିକାଲ୍ ମାପ କରିଥିଲୁ, ନମୁନାଗୁଡିକ \ ({50} \, {{\ upmu \ hbox {l}}}) ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା | ମାପ। ଡିଏନ୍ଏ ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ ଅବଶୋଷଣ ସ୍ ature ାକ୍ଷର କମିଯାଏ, ଯେପରି ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ ପରିସର \ (600 \, \ hbox {nm} \) ରୁ \ (700 \, \ hbox {) ପାଇଁ ଅବଶୋଷଣ ବକ୍ର ଅନ୍ତର୍ଗତ ଅଞ୍ଚଳର ଟ୍ରେଣ୍ଡରୁ ଦେଖାଯାଏ | nm} \), ଚିତ୍ର 4 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି (ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ସୂଚନାରେ ଚିତ୍ର S3 ରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ଅବଶୋଷଣ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରମ୍)। \ ({1} \, {\ hbox {ng} / {\ upmu \ hbox ଠାରୁ କମ୍ DNA ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ ନମୁନା ପାଇଁ | {l}}} \), DNA ଧାରଣକାରୀ ଏବଂ MB- କେବଳ ନମୁନା ମଧ୍ୟରେ (\ (503 \, \ hbox {bp} \) ଏବଂ \ (117 \, \ hbox {bp} \) ମଧ୍ୟରେ କ significant ଣସି ବିଶେଷ ପାର୍ଥକ୍ୟ ନଥିଲା | ) ଦ length ର୍ଘ୍ୟ ଖଣ୍ଡଗୁଡିକ), ରେଡକ୍ସ-ସକ୍ରିୟ MB ର ଷ୍ଟେରିକ୍ ପ୍ରତିବନ୍ଧକର ଅନୁପସ୍ଥିତିକୁ ସୂଚାଇଥାଏ | ଅଧିକ DNA ଏକାଗ୍ରତା ଉପରେ, ଆମେ ଅବଶୋଷଣ ସଙ୍କେତରେ ଧୀରେ ଧୀରେ ହ୍ରାସକୁ ଦେଖିଲୁ ଏବଂ ଲୁଣର ଉପସ୍ଥିତିରେ ଅବଶୋଷଣର କମ୍ ହ୍ରାସକୁ ଲକ୍ଷ୍ୟ କଲୁ | ଏହି ଫଳାଫଳଗୁଡିକ ମଲିକୁଲାର ଦ୍ୱାରା ଦାୟୀ | ଡିଏନ୍ଏ ହାଇବ୍ରିଡରେ ବେସ୍ ଷ୍ଟାକିଂ ସହିତ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଏବଂ ଷ୍ଟେରିକ୍ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ | ଆମର ଫଳାଫଳଗୁଡିକ MB-DNA ଆନ୍ତ c କରଣର ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରସ୍କୋପିକ୍ ଅଧ୍ୟୟନ ଉପରେ ସାହିତ୍ୟର ରିପୋର୍ଟ ସହିତ ସମାନ ଅଟେ ଯାହା ହାଇପୋକ୍ରୋମାଟିଟିକୁ ଶକ୍ତି ସ୍ତର ସହିତ ହ୍ରାସ କରିଥାଏ (\ pi \) - \ (\ pi ^ * \ ଇଣ୍ଟରକାଲେସନ୍ ସ୍ତର 36, 37, 38 ହେତୁ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନିକ୍ ଟ୍ରାନ୍ସସାଇନ୍ସ |
ଫେଜ୍ Phi6 ର ଅଗରୋଜ୍ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍: ଦ length ର୍ଘ୍ୟର PCR ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ \ (117 \, \ hbox {bp} \) ଏବଂ \ (503 \, \ hbox {bp} \) ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନାରୁ | M-DNA ମାର୍କର୍;NTC- ନୋ-ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ, ଅନୁରୂପ ଆମ୍ପଲିକନ୍ ଧାରଣ କରିଥିବା ପ୍ରାଇମର୍;PC ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ;1, 2, 3-ଅବ୍ୟବହୃତ (1: 1) ତ୍ରିଗୁଣରେ ସ୍ପିକେଡ୍ ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନା | \ (503 \, \ ରେ ଅବ୍ୟବହୃତ ଅଲିଗ୍ନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ କାରଣରୁ ଏକ ବ୍ୟାଣ୍ଡ \ (\ ପ୍ରାୟ 50 \, \ hbox {bp} \) ରେ ଦୃଶ୍ୟମାନ ହୁଏ | hbox {bp} \) ଗାଡ଼ି |
Phi6 ଫେଜ୍ ସହିତ ସ୍ପାଇକ୍ ହୋଇଥିବା ପୋୱାଇ ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନା ବ୍ୟବହାର କରି ଆମେ ସେନ୍ସରର ଉପଯୋଗିତାକୁ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ କରିଥିଲୁ | ml}} \), ଯେତେବେଳେ ଶୁଦ୍ଧ ଫେଜ୍ ସସପେନ୍ସନ୍ ଠାରୁ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ, RNA ପ୍ରାୟ 1 ର ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଦକ୍ଷତା ସହିତ \ ({1945} \, {\ upmu \ hbox {g} / \ hbox {ml}} \) ବୋଲି ଆକଳନ କରାଯାଇଥିଲା | % .RNA କୁ cDNA ରେ ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ PCR ଏବଂ qPCR ପାଇଁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା | ସେନ୍ସର ସହିତ ପରୀକ୍ଷା କରିବା ପୂର୍ବରୁ ଅଗରୋଜ୍ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ (ଚିତ୍ର 5) ଦ୍ୱାରା ଉତ୍ପାଦ ଆକାର ନିଶ୍ଚିତ କରାଯାଇଥିଲା | ଏହି ନମୁନାଗୁଡିକ ଜେଲ୍ ଶୁଦ୍ଧ ନୁହେଁ ଏବଂ ସେଥିପାଇଁ PCR ର ସମସ୍ତ ଉପାଦାନ ଧାରଣ କରିଥାଏ | qPCR (ସାରଣୀ 1) ରେ ରେକର୍ଡ ହୋଇଥିବା Ct ମୂଲ୍ୟଗୁଡ଼ିକ ସଂପୃକ୍ତ ସ୍ପିକ୍ ଜଳ ନମୁନାରୁ ପୃଥକ RNA ର ଏକାଗ୍ରତା ସହିତ ସମ୍ପର୍କ କରିବାକୁ ଦର୍ଶାଯାଇଥିଲା | Ct ମୂଲ୍ୟ ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ସିଗ୍ନାଲ୍ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟା ପ୍ରକାଶ କରିଥାଏ | ଥ୍ରେସହୋଲ୍ଡ କିମ୍ବା ବ୍ୟାକଗ୍ରାଉଣ୍ଡ ସିଗନାଲ ଅତିକ୍ରମ କରନ୍ତୁ ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଏବଂ ପରୀକ୍ଷଣ ନମୁନା ଆହୁରି ସୂଚିତ କରେ ଯେ ସକରାତ୍ମକ ପରୀକ୍ଷା ତୁଳନାରେ ପ୍ରତ୍ୟେକ ପରୀକ୍ଷା ନମୁନାରେ ପାଖାପାଖି% ୦% ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଥାଏ | କମ୍ ଭାଇରାଲ୍ ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ RNA ଅବନତି | ତଥାପି, ଆମର ଜୀବାଣୁ ସମୃଦ୍ଧ ଏବଂ PCR ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ସହିତ, ଆମେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସିଂ ପାଇଁ \ (503 \, \ hbox {bp} \) ଖଣ୍ଡକୁ ସଫଳତାର ସହିତ ବ pl ାଇବାକୁ ସମର୍ଥ ହେଲୁ |
ଚିତ୍ର 6 \ (503 \, \ hbox {bp} \) ଖଣ୍ଡ ଆମ୍ପଲିକନ୍ ର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସର ଫଳାଫଳକୁ ଦର୍ଶାଏ, ଉଭୟ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ (1: 1) ଏବଂ 100 ଗୁଣା ମିଶ୍ରିତ cDNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ (1: 100) PCR ଭାବରେ ପ୍ରଦର୍ଶନ କଲା | , NTC ଏବଂ PC ତୁଳନାରେ (ପ୍ରତିନିଧୀ ଭୋଲ୍ଟାମୋଗ୍ରାମ୍ ପାଇଁ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ସୂଚନାରେ ଚିତ୍ର S4 କୁ ଦେଖନ୍ତୁ) ଚିତ୍ର 6 ରେ ଥିବା ବକ୍ସପ୍ଲଟରେ ଥିବା ପ୍ରତ୍ୟେକ ବାକ୍ସରେ 5 ଟି ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡରେ ତିନୋଟି ନମୁନାରୁ ମାପ ରହିଥାଏ | ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ କାରଣରୁ ତ୍ରୁଟି ନହେବା ପାଇଁ ସମସ୍ତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା | -ଟୋ-ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନ ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (NTC) ସକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ସହିତ ଅଧିକ CV ଏବଂ DPV ଶିଖର ସ୍ରୋତ ସୃଷ୍ଟି କରିଥିଲା, ଯେତେବେଳେ ସକରାତ୍ମକ ଏବଂ ଅବିଭାଜିତ ପରୀକ୍ଷଣ ନମୁନାଗୁଡିକ DPV ଶିଖର ସ୍ରୋତର ସମାନ ଶିଖର ଉଚ୍ଚତା ପ୍ରଦର୍ଶନ କରିଥିଲେ | ପ୍ରତ୍ୟେକ ଅବ୍ୟବହୃତ ପାଇଁ ମାପାଯାଇଥିବା ମଧ୍ୟମ ଏବଂ ମଧ୍ୟମ ମୂଲ୍ୟ (1: 1) | ) ପରୀକ୍ଷା ନମୁନା ଏବଂ PC କୁ NTC ନମୁନା ପାଇଁ ସେନ୍ସର ଆଉଟପୁଟରୁ ସ୍ପଷ୍ଟ ଭାବରେ ସମାଧାନ କରାଯାଇପାରିବ, ଯେତେବେଳେ 1: 100 ମିଶ୍ରିତ ନମୁନା ପାଇଁ ରେଜୋଲୁସନ କମ୍ ଉଚ୍ଚାରଣ କରାଯାଏ | cDNA ର 100 ଗୁଣା ମିଶ୍ରଣ ପାଇଁ, ଆମେ ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ସମୟରେ କ any ଣସି ବ୍ୟାଣ୍ଡ ପାଳନ କରିନାହୁଁ | (ଚିତ୍ର 5 ରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇନଥିବା ଗାଡ଼ିଗୁଡ଼ିକ), ଏବଂ ସଂପୃକ୍ତ DPV ଏବଂ CV ଶିଖର ସ୍ରୋତଗୁଡିକ NTC ପାଇଁ ଆଶା କରାଯାଉଥିବା ପରି ସମାନ ଥିଲା | ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡରେ ମାଗଣା MB ର ଆଡର୍ସପସନ୍ ଏବଂ ସିଙ୍ଗଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ଅଲିଗ୍ନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ ସହିତ MB ର ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ହେତୁ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ PCB ସେନସରରୁ ଏକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସୃଷ୍ଟି କରିଥିଲା ​​| ତେଣୁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଥର ଏକ ନମୁନା ପରୀକ୍ଷା କରାଯିବାବେଳେ ଏକ ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଚାଲିବା ଆବଶ୍ୟକ ଏବଂ ପରୀକ୍ଷା ନମୁନାକୁ ପାଇକ କରେଣ୍ଟ ତୁଳନାରେ ନକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାପ୍ତ ପାଇକ କରେଣ୍ଟ ତୁଳନାରେ ଭିନ୍ନ ଭିନ୍ନ (ଆପେକ୍ଷିକ) ମାପ 39,40 ହାସଲ କରିବାକୁ ପରୀକ୍ଷା ନମୁନାକୁ ସକରାତ୍ମକ ବା ନକାରାତ୍ମକ ଶ୍ରେଣୀଭୁକ୍ତ କରିବାକୁ |
(କ) ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନାରେ \ (503 \, \ hbox {bp} \) ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ DP ଶିଖର କରେଣ୍ଟ ସକରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (PC)
ଆମର ଅନୁସନ୍ଧାନ ବିଭିନ୍ନ DNA ପାଇଁ ବିଭିନ୍ନ ଦ s ର୍ଘ୍ୟର ଆମ୍ପଲିକନ୍ ପାଇଁ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତାକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରୁଥିବା ବିଭିନ୍ନ ଯନ୍ତ୍ରକ illustr ଶଳକୁ ବର୍ଣ୍ଣନା କରେ, ଏକ UV / Vis ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରଫୋଟୋମିଟର ବ୍ୟବହାର କରି ଅପ୍ଟିକାଲ୍ ମାପ ଦ୍ୱାରା ଯାଞ୍ଚ କରାଯାଇଥାଏ | \ (500 \, \ hbox {bp} \) ଅଧିକ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ସହିତ ଚିହ୍ନଟ ହୋଇପାରିବ ଏବଂ ନମୁନାରେ ଲୁଣର ଉପସ୍ଥିତି ସମ୍ବେଦନଶୀଳ DNA ଏକାଗ୍ରତା ନୁହେଁ ଯାହା ଉଚ୍ଚ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତାକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିଥାଏ (କ୍ୱଚିତ୍ \ ({\ hbox {ng} / {\ upmu) | \ hbox {l}}} \) ଏବଂ ତଦୁର୍ଦ୍ଧ)ଆମେ ଦେଖିଲୁ ଯେ DPV ଉନ୍ନତ ରେଜୋଲୁସନ ପ୍ରଦାନ କରିଛି, ଯେହେତୁ ପୃଷ୍ଠଭୂମି କ୍ୟାପିସିଟିଭ୍ କରେଣ୍ଟ ମଧ୍ୟ CV ମାପକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିଥାଏ, ଯାହା ଏହାକୁ କମ୍ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ କରିଥାଏ |
ଲମ୍ବା ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର ବିସ୍ତାର ଭାଇରାଲ୍ ଜେନୋମିକ୍ RNA ର ଅଖଣ୍ଡତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ | ବିଭିନ୍ନ ଅଧ୍ୟୟନରୁ ଜଣାପଡିଛି ଯେ ପରିବେଶରେ RNA ର ଅବକ୍ଷୟ ହେତୁ ଏବଂ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ପୃଥକ ଆମେ ଦେଖିଲୁ ଯେ ଆଲୁମିନିୟମ୍ ହାଇଡ୍ରକ୍ସାଇଡ୍-ଆଧାରିତ ଜୀବାଣୁ ଏକାଗ୍ରତା ପଦ୍ଧତି ଅପେକ୍ଷା ହ୍ରଦ ଜଳ ନମୁନାରେ ସ୍ପିକ୍ ହୋଇଥିବା ଫେଜ୍ Phi-6 କୁ ଏକାଗ୍ର କରିବାରେ PEG- ଆଧାରିତ ଜୀବାଣୁ ଏକାଗ୍ରତା ପ୍ରଣାଳୀ ଅଧିକ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଥିଲା | ଲମ୍ବା DNA ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକୁ ଚିହ୍ନଟ କରିବାର କ୍ଷମତା ମଲ୍ଟିପ୍ଲେକ୍ସ PCR ର ଆବଶ୍ୟକତାକୁ ଦୂର କରିବାକୁ ପ୍ରମାଣିତ ହେଲା | ଏକାଧିକ କ୍ଷୁଦ୍ର ଲମ୍ବ ଟେମ୍ପଲେଟଗୁଡିକୁ ବୃଦ୍ଧି କରିବା ଏବଂ କ୍ରସ୍-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ସମ୍ଭାବନାକୁ ହ୍ରାସ କରିବା |
ଜ Bi ବିକ ନମୁନା ବହୁତ କମ୍, ତେଣୁ ଏକ ବାୟୋସେନ୍ସର୍ ଡିଜାଇନ୍ କରିବାର ଆବଶ୍ୟକତା ଅଛି ଯାହା ପରୀକ୍ଷା ପାଇଁ ସର୍ବନିମ୍ନ ନମୁନା ଆବଶ୍ୟକ କରେ | ଏହି ଅଧ୍ୟୟନରେ ବ୍ୟବହୃତ ENIG PCB ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ କେବଳ ଆବଶ୍ୟକ \ ({5} \, {{\ upmu \ hbox {l}}} \) ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡଗୁଡିକର ପ୍ରଭାବଶାଳୀ କ୍ଷେତ୍ରକୁ ଆଚ୍ଛାଦନ କରିବା ପାଇଁ ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ନମୁନାଗୁଡିକ ଏବଂ ସାଧାରଣତ used ବ୍ୟବହୃତ ରାସାୟନିକ | ଯେହେତୁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଉତ୍ପାଦନ ପାଇଁ ପ୍ରାୟ $ 0.55 (କିମ୍ବା INR 40) ଖର୍ଚ୍ଚ ହୁଏ, ଏହି ବାୟୋସେନ୍ସର୍ ବିଦ୍ୟମାନ ଚିହ୍ନଟ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ପାଇଁ ଏକ ବ୍ୟୟ-ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ବିକଳ୍ପ ହୋଇପାରେ | ଟେବୁଲ୍ 2 ଏହି କାର୍ଯ୍ୟର ସାହିତ୍ୟରେ ପ୍ରକାଶିତ ଅନ୍ୟ ସେନ୍ସର ସହିତ ତୁଳନା କରିଥାଏ | ହେଟେରୋଜେନସ୍ ନମୁନାରେ DNA ଖଣ୍ଡ |
MB- ଆଧାରିତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ପ୍ରୋଟୋକଲଗୁଡିକ PCR ର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, ଏହି ପଦ୍ଧତିର ଏକ ପ୍ରମୁଖ ସୀମା ହେଉଛି ବର୍ଜ୍ୟଜଳ ଏବଂ ହ୍ରଦ ଜଳ ପରି ହେଟେରୋଜିନସ୍ ନମୁନାରେ ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି ହେବାର ସମ୍ଭାବନା କିମ୍ବା ସ୍ୱଳ୍ପ ଶୁଦ୍ଧତା ପ୍ରାଇମର୍ ବ୍ୟବହାର କରିବା | ଅଣମୋଡିଫାଏଡ୍ ENIG PCB ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଅଣସଂରକ୍ଷିତ PCR ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକର DNA ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ପ୍ରଣାଳୀ, ଅବ୍ୟବହୃତ dNTP ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଦ୍ introduced ାରା ପ୍ରବର୍ତ୍ତିତ ତ୍ରୁଟିଗୁଡ଼ିକୁ ଭଲ ଭାବରେ ବୁ understand ିବା ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଅବସ୍ଥାକୁ ଅନୁକୂଳ କରିବା ଏବଂ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଗୁଡ଼ିକୁ ଅନୁକରଣ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ | pH, ତାପମାତ୍ରା ଏବଂ ଜ bi ବିକ ପରି ଅତିରିକ୍ତ ଫିଜିକୋକେମିକାଲ୍ ପାରାମିଟରଗୁଡିକ | ମାପର ସଠିକତାକୁ ଉନ୍ନତ କରିବା ପାଇଁ ଜଳ ନମୁନାର ଅମ୍ଳଜାନ ଚାହିଦା (BOD) ମଧ୍ୟ ମାପିବା ଆବଶ୍ୟକ ହୋଇପାରେ |
ପରିଶେଷରେ, ପରିବେଶ (ହ୍ରଦ ଜଳ) ନମୁନାରେ ଜୀବାଣୁ ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ଆମେ ଏକ ସ୍ୱଳ୍ପ ମୂଲ୍ୟର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ENIG PCB ସେନ୍ସର ପ୍ରସ୍ତାବ ଦେଉଛୁ। ଏକ ଲମ୍ବା ସେଲଫ୍ ଲାଇଫ୍ ସହିତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଏବଂ କ specific ଣସି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ଆବଶ୍ୟକତା ନାହିଁ ଏବଂ ତେଣୁ LMIC ରେ ନିୟୋଜିତ ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ନମୁନା ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ ସହିତ ମାପ ସମାଧାନର ବିକାଶ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ | ବାୟୋସେନ୍ସର୍ ଟାର୍ଗେଟ୍ ଆମ୍ପଲିକନ୍ ଗୁଡିକର ଶୀଘ୍ର ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ଶସ୍ତା DNA- ଇଣ୍ଟରକାଲାଇଟ୍ ରେଡକ୍ସ ରଙ୍ଗ (MB) ବ୍ୟବହାର କରେ | ଅଜ୍ଞାତ ବର୍ଦ୍ଧନ | ପରିବେଶ ନମୁନାରେ ସାଧାରଣ, ଏମବିଏସ୍ ର ଏକକ ଏବଂ ଦ୍ୱିଗୁଣିତ ଅଲିଗ୍ନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ ସହିତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବନ୍ଧନ ହେତୁ ଏହି ସେନ୍ସିଂ ପଦ୍ଧତିର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ହ୍ରାସ ହୁଏ | ତେଣୁ, ଏହି ପରୀକ୍ଷଣର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ପ୍ରାଥମିକତା ଏବଂ PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଅବସ୍ଥାର ଅପ୍ଟିମାଇଜେସନ୍ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ | ଏହା ସହିତ, CV ପରୀକ୍ଷିତ ନମୁନାରୁ ପ୍ରାପ୍ତ DPV ଶିଖର ସ୍ରୋତଗୁଡିକ ପ୍ରତ୍ୟେକ ପରୀକ୍ଷା ପାଇଁ ନକାରାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ (NTC) ରୁ ପ୍ରାପ୍ତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକ ସହିତ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରାଯିବା ଉଚିତ | ଏହି କାର୍ଯ୍ୟରେ ଉପସ୍ଥାପିତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସର ଡିଜାଇନ୍ ଏବଂ ପଦ୍ଧତିଗୁଡିକ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ଏବଂ ନିମ୍ନ ବିକାଶ ପାଇଁ ଅଟୋସମ୍ପ୍ଲର୍ ସହିତ ଏକୀଭୂତ ହୋଇପାରିବ | -କୋଷ୍ଟ ସମାଧାନ ଯାହା ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ ଏବଂ ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିପାରିବ ଏବଂ ବେତାର ଭାବରେ ଫଳାଫଳକୁ ଲାବୋରେଟୋରୀକୁ ପଠାଇବ |
ଜଳ ନମୁନାରୁ ଜୀବାଣୁଙ୍କର ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଏକାଗ୍ରତା ପାଇଁ କ୍ୟାଶଡୋଲାର୍, ଜେ। ଏବଂ ୱାଇମର୍, L. ପ୍ରଣାଳୀ: ସାମ୍ପ୍ରତିକ ଅଧ୍ୟୟନର ଏକ ସମୀକ୍ଷା ଏବଂ ମେଟା-ଆନାଲିସିସ୍।Application.microorganism.115, pp 1-11 (2013) |
ଗଲ୍, ଏମ୍, ମାରିଆସ୍, ବିଜୁ, ଲୁ, Y. ଏବଂ ଶିସଲର୍, ଜେଏଲ୍ ୱାଟରବୋର୍ନ୍ ଜୀବାଣୁ: ନିରାପଦ ପାନୀୟ ଜଳ ପାଇଁ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ।
ସ୍ୱଳ୍ପ ଏବଂ ମଧ୍ୟମ ଆୟ ଦେଶରେ COVID-19 ର ବ୍ୟୟବହୁଳ ବୃହତ ଆକାରର ନୀରିକ୍ଷଣ ପାଇଁ ଶ୍ରେଷ୍ଟା, ଏସ୍।
ପାଲେସେକ୍, ଇ। ଏବଂ ବାର୍ଟୋସିକ୍, ଏମ୍। ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିଷ୍ଟ୍ରି।112, 3427–3481 (2012) |
ତାନି, ଏ।, ଥମସନ, ଏଜେ ଏବଂ ବଟ, ଜେଏନ୍ ମିଥାଇଲିନ ନୀଳ, ଏକକ ଏବଂ ଦ୍ୱି-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ଅଲିଗ୍ନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ସର ଏକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଭେଦକାରୀ ଭାବରେ ସୁନା ସବଷ୍ଟ୍ରେଟ୍ ଉପରେ ଅସ୍ଥିର ହୋଇଥିଲେ | ଆନାଲିଷ୍ଟ 126, 1756–1759 (2001) |
ଲଙ୍ଗ-ରେଞ୍ଜ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋନ ଟ୍ରାନ୍ସଫର ଦ୍ E ାରା ଡିଏନଏ ହାଇବ୍ରିଡାଇଜେସନ୍ ର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଟ୍ରାନ୍ସଡକ୍ସନ୍ ପାଇଁ ୱାଙ୍ଗ୍, ଏଲ୍, ଏରୋହକିନ୍, ପି ଏବଂ ଗୁଡିଙ୍ଗ୍, ଜେଜେ ତୁଳନା ଏବଂ ଆନିଅନ୍ ଇଣ୍ଟରକାଲେଟରଗୁଡ଼ିକର ତୁଳନା।
Wong, EL & Gooding, JJ DNA ମାଧ୍ୟମରେ ଟ୍ରାନ୍ସଫର: ଏକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ DNA biosensor.anus.Chemical.78, 2138-2144 (2006) |
ଫାଙ୍ଗ, TH ଇତ୍ୟାଦି। ରିଅଲ୍-ଟାଇମ୍ PCR ମାଇକ୍ରୋଫ୍ଲାଇଡିକ୍ ଡିଭାଇସ୍ ସହିତ ଏକକାଳୀନ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ସହିତ ବାୟୋଲୋଜିକାଲ୍ ସେନ୍ସର | ବାୟୋଲେକ୍ଟ୍ରୋନିକ୍ସ .24, 2131-2136 (2009) |
Win, BY et al। DNA ସହିତ ମିଥାଇଲିନ ବ୍ଲୁ ର ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଉପରେ ଆଧାର କରି ଏକ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ସିଷ୍ଟମର ସିଗନାଲ୍ ମେକାନିଜିମ୍ ଅଧ୍ୟୟନ ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ଯାଞ୍ଚ | ଆନାଲିଷ୍ଟ 136, 1573-1579 (2011) |
ରାମିରେଜ୍-ଚାଭାରିଆ, ଆର.ଜି. ଏଲ୍।ପରିବେଶ। କେମିକାଲ୍।
PCB ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ସହିତ SARS-CoV-2 ଆମ୍ପଲିକନ୍ ର ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋକେମିକାଲ୍ ସେନ୍ସିଙ୍ଗ୍ କୁମାର, M. et al। ସେନ୍ସର ସକ୍ରିୟ ହୋଇଛି | B ରସାୟନ ବିଜ୍ଞାନ .343, 130169 (2021) |
କିଟାମୁରା, କେ।, ସାଦାମାସୁ, କେ।, ମୁରାମାଟସୁ, ଏମ୍।
ବର୍ଜ୍ୟଜଳରେ SARS-CoV-2 ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ଆଲିଜିଜାକିସ୍, ଏନ। ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଆନାଲିଟିକାଲ୍ ପଦ୍ଧତି: ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଏବଂ ଭବିଷ୍ୟତର ଦୃଷ୍ଟିକୋଣଗୁଡିକ |
ଫେଡୋରେଙ୍କୋ, ଏ।, ଗ୍ରିନ୍ବର୍ଗ, ଏମ୍, ଓରେଭି, ଟି। ଏବଂ କାଶ୍ଟାନ୍, ଏନ।10, 1-10 (2020)
ଦେ, ଆର।, ଡ୍ଲୁସ୍କାୟା, ଇ।ଜଳ ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ 20, 83 (2021) |
ମାଇଣ୍ଡିଚ୍, ଏଲ୍।63, 149-160 (1999) |
ପିରଟିମା, ଏମଜେ ଏବଂ ବାମଫୋର୍ଡ, DH RNA ଫେଜ୍ ର ଦ୍ Secondary ିତୀୟ ଗଠନ \ (\ varphi \) 6 ପ୍ୟାକେଜିଂ ଅଞ୍ଚଳ | RNA 6, 880–889 (2000) |
ବୋନିଲା, ଏନ। ଇତ୍ୟାଦି ଟ୍ୟାପ୍ ଉପରେ ପେଜ୍ - ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆଫେଜ୍ ର ଲାବୋରେଟୋରୀ ଷ୍ଟକ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ଦ୍ରୁତ ଏବଂ ଦକ୍ଷ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ | PeerJ 4, e2261 (2016) |