Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR) ir plaši izmantota metode molekulārajā bioloģijā DNS fragmentu amplifikācijai. PCR ietver vairākus soļus, tostarp denaturāciju, atkvēlināšanu un pagarināšanu. Šīs metodes panākumi lielā mērā ir atkarīgi no izmantoto PCR plākšņu un mēģenu kvalitātes. Izvēloties atbilstošas PCR plāksnes un mēģenes jūsu vajadzībām, jāņem vērā daudzi faktori. Šeit ir daži galvenie faktori, kas jāņem vērā:
1. IetilpībaPCR plāksnesUn mēģenes ir pieejamas dažādos izmēros un ietilpībās. Izmēra un ietilpības izvēle lielā mērā ir atkarīga no DNS daudzuma, kas jāamplificē vienā reakcijā. Piemēram, ja nepieciešams amplificēt nelielu DNS daudzumu, varat izvēlēties mazu mēģeni. Ja nepieciešams amplificēt lielu DNS daudzumu, var izvēlēties plāksni ar lielāku ietilpību.
2. Materiāls PCR plāksnes un mēģenes var būt izgatavotas no dažādiem materiāliem, piemēram, polipropilēna, polikarbonāta vai akrila. Polipropilēns ir visbiežāk izmantotais materiāls, pateicoties tā ķīmiskajai un karstumizturībai. Tas ir arī lētāks salīdzinājumā ar citiem materiāliem. Polikarbonāti un akrili ir dārgāki, taču tiem ir labāka optiskā skaidrība, un tie ir ideāli piemēroti reāllaika PCR.
3. Siltumvadītspēja PCR ietver vairākus termiskos ciklus, kas prasa ātru reakcijas maisījuma uzsildīšanu un atdzesēšanu. Tāpēc PCR plāksnēm un mēģenēm ir jābūt labai siltumvadītspējai, lai nodrošinātu vienmērīgu reakcijas maisījuma uzsildīšanu un atdzesēšanu. Plāksnes ar plānām sienām un plakanām virsmām ir ideāli piemērotas siltuma pārneses maksimizēšanai.
4. Saderība PCR plāksnēm un mēģenēm jābūt saderīgām ar izmantoto termocikleru. Plāksnēm un mēģenēm jāspēj izturēt augstās temperatūras, kas nepieciešamas DNS fragmentu amplifikācijai. Vienmēr konsultējieties ar termociklera ražotāju, lai uzzinātu par ieteicamajām plāksnēm un mēģenēm.
5. Blīvējums. Ciešs blīvējums ir ļoti svarīgs, lai novērstu reakcijas maisījuma piesārņojumu. PCR plāksnes un mēģenes var noslēgt, izmantojot dažādas metodes, piemēram, karstumizturīgu blīvējumu, līmplēves vai vākus. Termiskā blīvēšana ir drošākā metode un nodrošina spēcīgu barjeru pret piesārņojumu.
6. Sterilizācija PCR plāksnēm un mēģenēm jābūt bez jebkādiem piesārņotājiem, kas varētu traucēt reakciju. Tāpēc pirms lietošanas tās ir jāsterilizē. Ir svarīgi izvēlēties plāksnes un mēģenes, kuras ir viegli sterilizēt un izturīgas pret ķīmiskām un termiskām sterilizācijas metodēm.
Rezumējot, pareizās PCR plāksnes un mēģenes izvēle ir kritiski svarīga veiksmīgai DNS amplifikācijai. Izvēle lielā mērā ir atkarīga no pielietojuma veida, amplificētās DNS daudzuma un saderības ar termocikleriem.
Suzhou Ace Biomedicīnas tehnoloģiju Co., Ltd.piedāvā plašu augstas kvalitātes PCR plākšņu un mēģenu klāstu dažādos izmēros, ietilpībās un materiālos, lai apmierinātu katra pētnieka vajadzības.
Publicēšanas laiks: 2023. gada 17. maijs