पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) आणविक जीव विज्ञान में डीएनए अंशों के प्रवर्धन के लिए व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक है। पीसीआर में कई चरण शामिल हैं, जिसमें विकृतीकरण, एनीलिंग और विस्तार शामिल हैं। इस तकनीक की सफलता काफी हद तक इस्तेमाल की जाने वाली पीसीआर प्लेटों और ट्यूबों की गुणवत्ता पर निर्भर करती है। आपके आवेदन के लिए उपयुक्त पीसीआर प्लेटों और ट्यूबों का चयन करते समय विचार करने के लिए कई कारक हैं। विचार करने के लिए कुछ प्रमुख कारक यहां दिए गए हैं:
1. क्षमतापीसीआर प्लेटेंऔर ट्यूब अलग-अलग आकार और क्षमता में आते हैं। आकार और क्षमता का चुनाव काफी हद तक डीएनए की उस मात्रा पर निर्भर करता है जिसे एक ही प्रतिक्रिया में बढ़ाया जाना है। उदाहरण के लिए, अगर आपको डीएनए की थोड़ी मात्रा बढ़ानी है, तो आप एक छोटी ट्यूब चुन सकते हैं। अगर डीएनए की बड़ी मात्रा बढ़ानी है, तो बड़ी क्षमता वाली प्लेट चुनी जा सकती है।
2. सामग्री पीसीआर प्लेट और ट्यूब विभिन्न सामग्रियों जैसे पॉलीप्रोपाइलीन, पॉलीकार्बोनेट या ऐक्रेलिक से बनाई जा सकती हैं। पॉलीप्रोपाइलीन अपने रासायनिक और गर्मी प्रतिरोध के कारण सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली सामग्री है। यह अन्य सामग्रियों की तुलना में कम महंगी भी है। पॉलीकार्बोनेट और ऐक्रेलिक अधिक महंगे हैं, लेकिन इनमें बेहतर ऑप्टिकल स्पष्टता है और ये रियल-टाइम पीसीआर के लिए आदर्श हैं।
3. तापीय चालकता पीसीआर में कई तापीय चक्र शामिल होते हैं, जिसके लिए प्रतिक्रिया मिश्रण को तेजी से गर्म और ठंडा करना पड़ता है। इसलिए, प्रतिक्रिया मिश्रण को एक समान गर्म और ठंडा करने के लिए पीसीआर प्लेटों और ट्यूबों में अच्छी तापीय चालकता होनी चाहिए। पतली दीवारों और सपाट सतहों वाली प्लेटें ऊष्मा हस्तांतरण को अधिकतम करने के लिए आदर्श होती हैं।
4. अनुकूलता पीसीआर प्लेट और ट्यूब आपके द्वारा उपयोग किए जा रहे थर्मल साइक्लर के साथ संगत होनी चाहिए। प्लेट और ट्यूब डीएनए टुकड़ों के प्रवर्धन के लिए आवश्यक उच्च तापमान का सामना करने में सक्षम होना चाहिए। अनुशंसित प्लेट और ट्यूब के लिए हमेशा थर्मल साइक्लर निर्माता से परामर्श करें।
5. सील करें प्रतिक्रिया मिश्रण के संदूषण को रोकने के लिए एक मजबूत सील महत्वपूर्ण है। पीसीआर प्लेट और ट्यूब को हीट सील, चिपकने वाली फिल्म या ढक्कन जैसे विभिन्न तरीकों का उपयोग करके सील किया जा सकता है। हीट सीलिंग सबसे सुरक्षित तरीका है और संदूषण के खिलाफ एक मजबूत अवरोध प्रदान करता है।
6. स्टरलाइज़ेशन पीसीआर प्लेट और ट्यूब किसी भी ऐसे संदूषक से मुक्त होनी चाहिए जो प्रतिक्रिया में बाधा डाल सकते हैं। इसलिए, उपयोग से पहले उन्हें स्टरलाइज़ किया जाना चाहिए। ऐसी प्लेट और ट्यूब चुनना महत्वपूर्ण है जिन्हें स्टरलाइज़ करना आसान हो और जो रासायनिक और गर्मी स्टरलाइज़ेशन विधियों के लिए प्रतिरोधी हों।
संक्षेप में, सफल डीएनए प्रवर्धन के लिए सही पीसीआर प्लेट और ट्यूब चुनना महत्वपूर्ण है। चुनाव काफी हद तक अनुप्रयोग के प्रकार, प्रवर्धित डीएनए की मात्रा और थर्मल साइक्लर के साथ संगतता पर निर्भर करता है।
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पोस्ट करने का समय: मई-17-2023