Polymeraasiketjureaktio (PCR) on laajalti käytetty tekniikka molekyylibiologiassa DNA-fragmenttien monistamiseen. PCR sisältää useita vaiheita, mukaan lukien denaturoinnin, hehkuttamisen ja pidennyksen. Tämän tekniikan onnistuminen riippuu suurelta osin käytettyjen PCR-levyjen ja -putkien laadusta. Sopivien PCR-levyjen ja -putkien valinnassa on monia tekijöitä, jotka on otettava huomioon. Tässä on joitakin keskeisiä tekijöitä, jotka on otettava huomioon:
1. KapasiteettiPCR-levytJa putkia on saatavilla eri kokoisina ja kapasiteetteina. Koon ja kapasiteetin valinta riippuu pitkälti siitä, kuinka paljon DNA:ta on monistettava yhdessä reaktiossa. Esimerkiksi, jos sinun on monistettava pieni määrä DNA:ta, voit valita pienen putken. Jos sinun on monistettava suuri määrä DNA:ta, voidaan valita levy, jolla on suurempi kapasiteetti.
2. Materiaali PCR-levyt ja -putket voidaan valmistaa eri materiaaleista, kuten polypropeenista, polykarbonaatista tai akryylista. Polypropeeni on yleisimmin käytetty materiaali kemikaalien- ja lämmönkestävyytensä ansiosta. Se on myös edullisempi kuin muut materiaalit. Polykarbonaatit ja akryylit ovat kalliimpia, mutta niillä on parempi optinen kirkkaus ja ne sopivat erinomaisesti reaaliaikaiseen PCR:ään.
3. Lämmönjohtavuus PCR sisältää useita lämpösyklejä, jotka vaativat reaktioseoksen nopeaa lämmitystä ja jäähdytystä. Siksi PCR-levyillä ja -putkilla on oltava hyvä lämmönjohtavuus reaktioseoksen tasaisen lämmityksen ja jäähdytyksen varmistamiseksi. Ohutseinäiset ja tasaiset pinnat omaavat levyt sopivat ihanteellisesti lämmönsiirron maksimoimiseksi.
4. Yhteensopivuus PCR-levyjen ja -putkien tulee olla yhteensopivia käyttämäsi lämpösyklerin kanssa. Levyjen ja putkien on kestettävä DNA-fragmenttien monistuksessa vaadittavat korkeat lämpötilat. Kysy aina lämpösyklerin valmistajalta suositeltuja levyjä ja putkia.
5. Tiivistys Tiivistys on ratkaisevan tärkeää reaktioseoksen kontaminaation estämiseksi. PCR-levyt ja -putket voidaan sulkea eri menetelmillä, kuten kuumasaumauksilla, teippikalvoilla tai kansilla. Kuumasaumaus on turvallisin menetelmä ja tarjoaa vahvan suojan kontaminaatiota vastaan.
6. Sterilointi PCR-levyjen ja -putkien on oltava vapaita kaikista reaktiota mahdollisesti häiritsevistä epäpuhtauksista. Siksi ne on steriloitava ennen käyttöä. On tärkeää valita levyt ja putket, jotka on helppo steriloida ja jotka kestävät kemiallisia ja lämpösterilointimenetelmiä.
Yhteenvetona voidaan todeta, että oikean PCR-levyn ja -putkien valinta on ratkaisevan tärkeää onnistuneen DNA:n monistuksen kannalta. Valinta riippuu pitkälti sovellustyypistä, monistettavan DNA:n määrästä ja yhteensopivuudesta lämpösyklerien kanssa.
Suzhou Ace Biolääketieteen teknologia Co., Ltd.tarjoaa laajan valikoiman korkealaatuisia PCR-levyjä ja -putkia eri kokoisina, tilavuuksina ja materiaaleina jokaisen tutkijan tarpeisiin.
Julkaisun aika: 17. toukokuuta 2023