Zu Beginn eines Experiments stellen sich viele Fragen. Welches Material wird benötigt? Welche Proben werden verwendet? Welche Bedingungen, z. B. Wachstum, sind notwendig? Wie lange dauert die gesamte Anwendung? Muss ich am Wochenende oder nachts nach dem Experiment schauen? Eine Frage wird oft vergessen, ist aber nicht weniger wichtig: Welche Flüssigkeiten werden bei der Anwendung verwendet und wie werden sie pipettiert?
Da das Pipettieren von Flüssigkeiten zum Alltag gehört und die aufgenommene Flüssigkeit auch wieder abgegeben wird, widmen wir diesem Thema in der Regel nicht allzu viel Zeit und Mühe. Dennoch ist es sinnvoll, sich über die verwendete Flüssigkeit und das verwendete Pipettenwerkzeug gut Gedanken zu machen.
Flüssigkeiten lassen sich in fünf Hauptkategorien einteilen: wässrig, viskos (inkl. Detergenzien), flüchtig, dicht und infektiös oder toxisch. Unsachgemäßer Umgang mit diesen Flüssigkeitskategorien hat einen enormen Einfluss auf das Pipettierergebnis. Während das Pipettieren wässriger Lösungen wie der meisten Puffer relativ einfach ist und hauptsächlich mit klassischen Luftpolsterpipetten erfolgt, können beim Pipettieren flüchtiger Flüssigkeiten wie Aceton Schwierigkeiten auftreten. Flüchtige Flüssigkeiten haben einen hohen Dampfdruck, der zur Verdunstung in das Luftpolster und damit zur Tröpfchenbildung führt. Ohne die richtige Pipettiertechnik bedeutet dies letztendlich Proben- oder Reagenzverlust. Beim Pipettieren flüchtiger Flüssigkeiten ist eine Vorbenetzung derPipettenspitze(wiederholte Ansaug- und Abgabezyklen zur Befeuchtung der Luft in der Spitze) sind zur Verbesserung der Pipettiergenauigkeit zwingend erforderlich. Eine ganz andere Flüssigkeitskategorie sind viskose Flüssigkeiten wie Glycerin. Diese haben aufgrund der hohen inneren Reibung der Moleküle ein sehr langsames Fließverhalten, was zur Ansaugung von Luftblasen, Rückständen in der Spitze und Proben- oder Reagenzverlust führt. Bei Verwendung klassischer Luftpolsterpipetten wird eine spezielle Pipettiertechnik namens „Reverses Pipettieren“ empfohlen. Noch besser ist jedoch die Verwendung eines anderen Pipettierwerkzeugs, eines Direktverdrängers mit einer spritzenähnlichen Spitze, die ohne Luftpolster zwischen der Probe und dem Kolben in der Spitze funktioniert. Mit diesen Werkzeugen kann Flüssigkeit schneller und einfacher angesaugt werden. Beim Abgeben einer viskosen Flüssigkeit kann das gesamte Volumen ohne Rückstände in der Spitze abgegeben werden.
Wenn Sie sich vor Beginn eines Experiments Gedanken über die Flüssigkeit machen, können Sie Ihren Arbeitsablauf und Ihre Ergebnisse vereinfachen und verbessern. Unser Poster bietet einen Überblick über die Flüssigkeitskategorien, ihre Herausforderungen sowie Empfehlungen zu geeigneten Pipettiertechniken und Pipettierwerkzeugen. Sie können das Poster herunterladen und als Druckversion für Ihr Labor verwenden.
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Beitragszeit: 09.02.2023