ਪੀਸੀਬੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਵਾਇਰਲ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਿੰਗ ਲਈ ਲੰਬੇ ਐਂਪਲੀਕੋਨ ਬਿਹਤਰ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੇ ਹਨ

Nature.com 'ਤੇ ਜਾਣ ਲਈ ਤੁਹਾਡਾ ਧੰਨਵਾਦ। ਤੁਹਾਡੇ ਦੁਆਰਾ ਵਰਤੇ ਜਾ ਰਹੇ ਬ੍ਰਾਊਜ਼ਰ ਸੰਸਕਰਣ ਵਿੱਚ CSS ਲਈ ਸੀਮਤ ਸਮਰਥਨ ਹੈ। ਵਧੀਆ ਅਨੁਭਵ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਤੁਸੀਂ ਇੱਕ ਅੱਪਡੇਟ ਕੀਤੇ ਬ੍ਰਾਊਜ਼ਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ (ਜਾਂ Internet Explorer ਵਿੱਚ ਅਨੁਕੂਲਤਾ ਮੋਡ ਬੰਦ ਕਰੋ)।ਇਸ ਦੌਰਾਨ, ਇਹ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਨਿਰੰਤਰ ਸਮਰਥਨ, ਅਸੀਂ ਸਟਾਈਲ ਅਤੇ ਜਾਵਾ ਸਕ੍ਰਿਪਟ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਸਾਈਟ ਨੂੰ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਾਂਗੇ।
ਕੋਵਿਡ-19 ਮਹਾਂਮਾਰੀ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤ ਤੋਂ ਹੀ ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਦੇ ਮਹੱਤਵ ਦੀ ਬਹੁਤ ਪ੍ਰਸ਼ੰਸਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ, ਅਤੇ ਸੋਨੇ ਦੇ ਮਿਆਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਨਿਗਰਾਨੀ ਦੇ ਕੁਝ ਯਤਨ ਕੀਤੇ ਜਾ ਰਹੇ ਹਨ, ਹਾਲਾਂਕਿ qPCR-ਅਧਾਰਿਤ ਤਕਨੀਕਾਂ ਮਹਿੰਗੀਆਂ ਹਨ। ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਡੀਐਨਏ ਬਾਇਓਸੈਂਸਰ ਇੱਕ ਸੰਭਾਵੀ ਲਾਗਤ-ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ। ਘੱਟ ਅਤੇ ਮੱਧ-ਆਮਦਨੀ ਵਾਲੇ ਦੇਸ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਲਈ ਹੱਲ। ਇਸ ਕੰਮ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ENIG ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਸਪਾਈਕ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ (SARS-CoV-2 ਲਈ ਇੱਕ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਸਰੋਗੇਟ) ਤੋਂ ਵੱਖ ਕੀਤੇ Phi6 ਫੇਜ਼ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਖੋਜ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕਰਦੇ ਹਾਂ। ਸਤਹ ਸੋਧ ਦੇ ਬਗੈਰ PCB ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਨ ਲਈ.ਸੈਕਸ। ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਲੰਬਾਈਆਂ (\({117}\,\hbox {bp}\) ਅਤੇ \({503}\,\hbox {bp}\)) ਦੇ ਦੋ ਡੀਐਨਏ ਟੁਕੜਿਆਂ ਲਈ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦਿੱਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਮਿਥਾਈਲੀਨ ਬਲੂ (ਐਮਬੀ)-ਡੀਐਨਏ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਵਿੱਚ ਲੂਣ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ। ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਣ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸ ਕੰਮ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦੀ ਹੈ ਕਿ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਜੈੱਲ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਲੰਬੇ ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਹੈ। ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਸਥਿਤੀ ਦੇ ਮਾਪ ਲਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ।ਵਾਇਰਲ ਲੋਡ ਲਈ ਇੱਕ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸਵੈਚਲਿਤ ਹੱਲ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਹੈ।
ਪੋਲੀਓ ਅਤੇ ਹੈਪੇਟਾਈਟਸ E1 ਦੇ ਪਾਣੀ ਤੋਂ ਪੈਦਾ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਦੇ ਪਹਿਲੇ ਸਬੂਤ ਦੇ ਨਾਲ, 1940 ਦੇ ਦਹਾਕੇ ਤੋਂ ਪਾਣੀ ਤੋਂ ਪੈਦਾ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਵਾਇਰਸ ਦੇ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਨੂੰ ਜਨਤਕ ਸਿਹਤ ਲਈ ਖਤਰੇ ਵਜੋਂ ਜਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਵਿਸ਼ਵ ਸਿਹਤ ਸੰਗਠਨ (ਡਬਲਯੂ.ਐਚ.ਓ.) ਨੇ ਮੱਧਮ ਤੋਂ ਉੱਚ ਸਿਹਤ ਮਹੱਤਤਾ ਵਾਲੇ ਕਈ ਪਾਣੀ ਤੋਂ ਪੈਦਾ ਹੋਣ ਵਾਲੇ ਵਾਇਰਲ ਰੋਗਾਣੂਆਂ ਨੂੰ ਸ਼੍ਰੇਣੀਬੱਧ ਕੀਤਾ ਹੈ। ਖੋਜ ਦੇ ਢੰਗ ਸੋਨੇ ਦੇ ਮਿਆਰੀ qPCR-ਆਧਾਰਿਤ ਤਕਨੀਕਾਂ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਬਹੁਤ ਹੀ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਅਤੇ ਖਾਸ ਹਨ, ਪਰ ਮਹਿੰਗੇ ਯੰਤਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਟੈਸਟ ਕਰਨ ਲਈ ਹੁਨਰਮੰਦ ਕਰਮਚਾਰੀਆਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਘੱਟ ਅਤੇ ਮੱਧ-ਆਮਦਨੀ ਵਾਲੇ ਦੇਸ਼ਾਂ (LMICs) ਵਿੱਚ ਸੀਮਤ ਸਰੋਤਾਂ ਨਾਲ, ਮਨੁੱਖੀ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਜਾਂਚ ਨੂੰ ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਨਾਲੋਂ ਪਹਿਲ ਦੇਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ। ਇਸਲਈ, ਘੱਟ ਅਤੇ ਮੱਧ-ਆਮਦਨੀ ਵਾਲੇ ਦੇਸ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਪਾਣੀ ਅਤੇ ਗੰਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਟਿਕਾਊ, ਅਸਲ-ਸਮੇਂ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਲਈ ਵਿਕਲਪਕ ਘੱਟ ਲਾਗਤ ਵਾਲੇ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ ਉੱਭਰ ਰਹੀਆਂ ਬਿਮਾਰੀਆਂ ਦੇ ਪ੍ਰਕੋਪ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਚੇਤਾਵਨੀ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਵਾਇਰਸ ਮਹਾਂਮਾਰੀ ਦੇ ਗੰਭੀਰ ਸਮਾਜਿਕ-ਆਰਥਿਕ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਤੋਂ ਬਚਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡਾਂ ਲਈ ਘੱਟ ਲਾਗਤ ਵਾਲੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਬਾਇਓਸੈਂਸਰ ਇਸ ਅਪੂਰਤੀ ਲੋੜ ਦਾ ਇੱਕ ਵਧੀਆ ਸੰਭਾਵੀ ਹੱਲ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ। ਇਹਨਾਂ ਵਿੱਚੋਂ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਡੀਐਨਏ ਬਾਇਓਸੈਂਸਰ ਇਸ ਤੱਥ ਦੁਆਰਾ ਕੰਮ ਕਰਦੇ ਹਨ ਕਿ ਪੂਰਕ ਡੀਐਨਏ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਉੱਤੇ ਸਥਿਰ ਹਨ। ਸਤ੍ਹਾ ਅਤੇ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ ਕਰੋ ਜਦੋਂ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਮੇਲ ਖਾਂਦਾ ਕ੍ਰਮ ਮੌਜੂਦ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਇਸਨੂੰ ਫਿਰ ਰੈਡੌਕਸ ਮੀਡੀਏਟਰਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪੋਟਾਸ਼ੀਅਮ ਆਇਰਨ/ਫੈਰੋਸਾਈਨਾਈਡ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਤਕਨੀਕਾਂ ਦੁਆਰਾ ਇੱਕ ਸਿਗਨਲ ਵਿੱਚ ਬਦਲਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਮਿਥਾਈਲੀਨ ਬਲੂ (MB) ਇੱਕ ਅਜਿਹਾ ਰੇਡੌਕਸ-ਐਕਟਿਵ ਅਣੂ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਨੂੰ ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ (dsDNA) ਵਿੱਚ ਇੰਟਰਕੇਲੇਟ ਕਰਨ ਦੀ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ ਅਤੇ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ 5,6 ਨਾਲ ਇਸਦੇ ਹੋਰ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਬਾਈਡਿੰਗ ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ। MB-DNA ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਨੂੰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ MBs ਦੀ ਇੰਟਰਕਲੇਟਿੰਗ ਪ੍ਰਕਿਰਤੀ ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਕਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋ ਕੈਮੀਕਲ ਡੀਐਨਏ ਵਿੱਚ redox ਵਿਚੋਲੇ ਵਜੋਂ ਇੱਕ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਵਿਕਲਪ ਬਣਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਸੈਂਸਰ ਸੰਰਚਨਾ 5,6,7,8,9।ਹਾਲਾਂਕਿ MB ਤੋਂ DNA ਦਾ ਅੰਤਰ-ਵਿਵਸਥਾ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਰ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਪੀਸੀਆਰ ਜਾਂ ਆਈਸੋਥਰਮਲ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਲਈ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਇਹ ਅਸਲ ਨੂੰ ਲਾਗੂ ਕਰਨ ਲਈ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਅਨੁਕੂਲ ਹੈ। ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਮਾਪ 9 ਦੇ ਵਿਕਲਪ ਵਜੋਂ -ਟਾਈਮ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ-ਅਧਾਰਤ qPCR ਜਾਂ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਆਈਸੋਥਰਮਲ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ 9 .ਅਜਿਹੇ ਇੱਕ ਅਮਲ ਵਿੱਚ, ਵੋਨ ਐਟ ਅਲ। ਸੋਨੇ ਦੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਦੀ ਸਤਹ ਨੂੰ ਅਸਲ-ਸਮੇਂ ਲਈ 6-ਮਰਕੈਪਟੋ-1-ਹੈਕਸਾਨੋਲ (MCH) ਨਾਲ ਸੋਧਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਡਿਫਰੈਂਸ਼ੀਅਲ ਪਲਸ ਵੋਲਟਾਮੈਟਰੀ (ਡੀਪੀਵੀ) 9 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਐਮਬੀ ਦੇ ਨਾਲ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ ਦਾ ਮਾਪ। ਹੋਰ ਮਾਮਲਿਆਂ ਵਿੱਚ, ਰਮੀਰੇਜ਼ ਐਟ ਅਲ। ਸਕਰੀਨ-ਪ੍ਰਿੰਟ ਕੀਤੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਸ ਦੇ ਨਾਲ ਐਮਬੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ RT-LAMP ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੁਆਰਾ ਗੰਦੇ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ SARS-CoV-2 ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣਾ। ਪਲੈਟੀਨਮ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਵੀ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ। ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਮਾਈਕ੍ਰੋਫਲੂਇਡਿਕ ਪੀਸੀਆਰ ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਵਿੱਚ ਸਿਟੂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ 8। ਇਹਨਾਂ ਸਾਰੇ ਅਧਿਐਨਾਂ ਲਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਦੀ ਸਤਹ ਸੋਧ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਇਹਨਾਂ ਕਾਰਜਸ਼ੀਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਦੀ ਸਥਿਰਤਾ ਲਈ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਸਟੋਰੇਜ ਲੋੜਾਂ ਦੇ ਕਾਰਨ ਵਧੇ ਹੋਏ ਉਤਪਾਦਨ ਅਤੇ ਸੰਚਾਲਨ ਲਾਗਤਾਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ।
ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਕੇਂਦਰਿਤ ਵਾਇਰਲ ਕਣਾਂ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਖੋਜ ਲਈ ਵਰਕਫਲੋ ਦੀ ਯੋਜਨਾਬੱਧ।
ਅਸੀਂ ਹਾਲ ਹੀ ਵਿੱਚ DPV ਅਤੇ ਸਾਈਕਲਿਕ ਵੋਲਟਮੈਟਰੀ (CV) 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਘੱਟ ਲਾਗਤ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਿੰਟਿਡ ਸਰਕਟ ਬੋਰਡ (PCB) ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਦੇ ਨਾਲ SARS-CoV-2 ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਿੰਗ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ ਹੈ ਜੋ ਅਣਸੋਧਿਤ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਦੀ ਸਤਹ 'ਤੇ MB-DNA ਕੰਪਲੈਕਸਾਂ ਦੇ ਸੋਖਣ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰੇਰਿਤ) ਪੀਕ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀਆਂ ਹਨ। ਮੌਜੂਦਾ11.ਅਸੀਂ ਰਿਪੋਰਟ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ ਛੋਟੇ ਟੁਕੜਿਆਂ {bp}\) ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ CDC-ਸਿਫਾਰਿਸ਼ ਕੀਤੇ N1 ਫਾਰਵਰਡ ਅਤੇ N2 ਰਿਵਰਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਬਣੇ ਲੰਬੇ DNA ਟੁਕੜਿਆਂ (N1-N2, \({943}\, \hbox)) ਨੇ ਸੈਂਸਰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਵਿੱਚ ਬਿਹਤਰ ਰੇਖਿਕਤਾ ਦਿਖਾਈ। ( N1, \(72\,\hbox {bp}\)) N1 ਫਾਰਵਰਡ ਅਤੇ N1 ਰਿਵਰਸ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਸੈੱਟਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਬਣਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਇਹ ਅਧਿਐਨ ਨਿਊਕਲੀਜ਼-ਮੁਕਤ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਡੀਐਨਏ ਡਾਇਲਿਊਸ਼ਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ। ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ SARS-CoV ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਵੀ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਸਿਮੂਲੇਟਿਡ ਗੰਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ -2 ਐਂਪਲੀਕਨ (SARS-CoV-2 RNA ਨਾਲ ਕੁੱਲ RNA ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਸਪਾਈਕ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ)। ਕਿਉਂਕਿ RNA ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਅਤੇ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਦੌਰਾਨ ਸ਼ੀਅਰਿੰਗ ਲਈ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਹੈ, 12,13 ਇਸ ਵਿਭਿੰਨ ਨਮੂਨੇ ਨਾਲ ਲੰਬੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣਾ ਮੁਸ਼ਕਲ ਹੈ। ਇਸ ਲਈ, ਗੰਦੇ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ SARS-CoV-2 ਐਂਪਲੀਕਨ ਦੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਿੰਗ ਦਾ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਛੋਟੇ \(72\,\hbox {bp}\) N1 ਟੁਕੜੇ ਤੱਕ ਸੀਮਿਤ ਹੈ।
ਇਸ ਕੰਮ ਵਿੱਚ, ਅਸੀਂ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ (ਚਿੱਤਰ 1) ਤੋਂ ਫੇਜ਼ ਫਾਈ6 ਕੇਂਦ੍ਰਿਤ ਅਤੇ ਅਲੱਗ ਕੀਤੇ ENIG PCB-ਅਧਾਰਿਤ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਿੰਗ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ। Phi6 ਫੇਜ਼ ਆਕਾਰ (80-100 nm) ਵਿੱਚ SARS-CoV-2 ਨਾਲ ਤੁਲਨਾਯੋਗ ਹਨ ਅਤੇ ਇੱਕ ਲਿਪਿਡ ਝਿੱਲੀ ਅਤੇ ਇੱਕ ਸਪਾਈਕ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਵੀ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਇਹਨਾਂ ਕਾਰਨਾਂ ਕਰਕੇ, ਬੈਕਟੀਰੀਓਫੇਜ ਫਾਈ6 ਸਾਰਸ-ਕੋਵ-2 ਅਤੇ ਹੋਰ ਲਿਫਾਫੇ ਵਾਲੇ ਜਰਾਸੀਮ RNA ਵਾਇਰਸ14,15 ਲਈ ਇੱਕ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਸਰੋਗੇਟ ਹੈ। ਫੇਜ਼ ਕਣਾਂ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤੇ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਇੱਕ ਨਮੂਨੇ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। PCR ਲੰਬਾਈ ਵਿੱਚ 117 ਅਤੇ 503 ਬੇਸ ਜੋੜਿਆਂ ਦੇ ਦੋ ਡੀਐਨਏ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ। ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਕੰਮ ਵਿੱਚ \(943\,\hbox {bp}\) N1-N2 ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਦੀ ਚੁਣੌਤੀ ਨੂੰ ਦੇਖਦੇ ਹੋਏ, ਅਸੀਂ ਵਿਚਕਾਰਲੇ ਲੰਬਾਈ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ (\(117) ਨੂੰ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਾਂ। \,\hbox {bp}\) ਅਤੇ \(503 \,\hbox {bp}\)), ਉਪਲਬਧ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੇ ਅਧਾਰ 'ਤੇ। ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਵਿਵਸਥਿਤ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ ਸੰਕਸ਼ਨ ਰੇਂਜ (\({10}\,{) ਵਿੱਚ ਅਧਿਐਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। \hbox {pg}/{\upmu \hbox {l}}}\) ਤੋਂ \({20}\, {\hbox {ng}/{\upmu \hbox {l}}}\)) ਵਿੱਚ ਦੋਨਾਂ ਟੁਕੜਿਆਂ ਲਈ MB ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ, ਸੈਂਸਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ 'ਤੇ ਲੂਣ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਨੂੰ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੈਟ੍ਰਿਕ ਮਾਪਾਂ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। ਇਸ ਕੰਮ ਦੇ ਮੁੱਖ ਯੋਗਦਾਨ ਹੇਠ ਲਿਖੇ ਅਨੁਸਾਰ ਹਨ:
ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜੇ ਦੀ ਲੰਬਾਈ ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਲੂਣ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਬੁਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਗਤੀਵਿਧੀ ਐਮਬੀ, ਡੀਐਨਏ, ਅਤੇ ਵੋਲਟੈਮੇਟ੍ਰਿਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਿੱਚ ਸੈਂਸਰ ਦੇ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੇ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਮਕੈਨਿਜ਼ਮਾਂ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਅਤੇ ਲੰਬਾਈ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਦੇ ਨਾਲ ਟੁਕੜੇ ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਹਾਲਾਂਕਿ ਲੂਣ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਟੈਟਿਕ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੁੰਦਾ ਹੈ. MB ਅਤੇ DNA.
ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਅਣਸੋਧਿਤ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਵਿੱਚ MB-DNA ਪਰਸਪਰ ਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਦੀ ਹੈ ਅਸੀਂ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦੇ ਹਾਂ ਕਿ MB-DNA ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੇ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਢੰਗ ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੇ ਹਨ। {l}}}\), ਅਸੀਂ ਦੇਖਿਆ ਹੈ ਕਿ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਵਰਤਮਾਨ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ 'ਤੇ MB-DNA ਦੇ ਸੋਖਣ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਘੱਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਉੱਚ DNA ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ, ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਵਰਤਮਾਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਰੇਡੌਕਸ ਦੇ ਸਟੀਰਿਕ ਰੋਕ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਡੀਐਨਏ ਬੇਸ ਜੋੜਿਆਂ ਵਿਚਕਾਰ MB ਸੰਮਿਲਨ ਦੇ ਕਾਰਨ ਗਤੀਵਿਧੀ।
ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਵਾਇਰਲ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦੀ ENIG PCB- ਆਧਾਰਿਤ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਿੰਗ ਪੋਵਈ ਝੀਲ, IIT ਮੁੰਬਈ ਕੈਂਪਸ ਤੋਂ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ Phi6-ਐਡਿਡ \(503\,\hbox {bp}\) DNA ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਖੋਜ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰੀਖਣਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਨਤੀਜਾ ਪੜਾਅ.
ਲਾਗੂ ਕਰਨ ਦੀ ਘੱਟ ਲਾਗਤ ਅਤੇ ਲੰਬੀ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ ਵਾਲੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ 'ਤੇ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸਵੈਚਾਲਿਤ ਨਿਗਰਾਨੀ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ, ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਜਾਂ ਐਪਟੈਮਰਸ ਵਿੱਚ ਏਕੀਕਰਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ।
Phage Phi6 Cytoviridae ਪਰਿਵਾਰ ਦਾ ਇੱਕ ਲਿਫਾਫੇ ਵਾਲਾ dsRNA ਵਾਇਰਸ ਹੈ ਜੋ ਸੂਡੋਮੋਨਸ ਸਰਿੰਗੇ ਨੂੰ ਸੰਕਰਮਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ। Phi6 ਫੇਜ਼ ਦਾ ਜੀਨੋਮ 3 ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਹੈ: S (\(2.95\,\hbox {Kb}\)), M (\(4.07) \,\hbox {Kb}\)) ਅਤੇ L (\ (6.37\ ,\hbox{Kb}\))16,17। ਕਿਉਂਕਿ Phi6 ਫੇਜ਼ ਇੱਕ ਗੈਰ-ਪੈਥੋਜਨਿਕ BSL-1 ਸੂਡੋਮੋਨਸ ਸਟ੍ਰੇਨ ਨੂੰ ਸੰਕਰਮਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਇਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨਾ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਹੈ। ਅਤੇ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਉਗਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। Phage Phi6 ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਮੇਜ਼ਬਾਨ ਸੂਡੋਮੋਨਸ ਸਰਿੰਗੇ ਨੂੰ ਬੈਕਟੀਰੀਅਲ ਵਾਇਰਸਾਂ ਲਈ ਫੇਲਿਕਸ ਡੀ'ਹੇਰੇਲ ਰੈਫਰੈਂਸ ਸੈਂਟਰ, ਲਾਵਲ ਯੂਨੀਵਰਸਿਟੀ, ਕੈਨੇਡਾ ਤੋਂ ਖਰੀਦਿਆ ਗਿਆ ਸੀ (ਹਵਾਲਾ ਕੇਂਦਰ ਕੈਟਾਲਾਗ ਨੰਬਰ ਕ੍ਰਮਵਾਰ HER-102 ਅਤੇ HER-1102 ਹਨ) .Phi6 ਫੇਜ਼ ਅਤੇ ਇਸ ਦੇ ਹੋਸਟ ਨੂੰ ਹਵਾਲਾ ਕੇਂਦਰ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਦੇਸ਼ਿਤ ਕੀਤੇ ਅਨੁਸਾਰ ਮੁੜ ਸੁਰਜੀਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਫੇਜ ਫਾਈ6 ਨੂੰ ਪਲੇਟ ਲਾਈਸਿਸ ਅਤੇ ਇਲੂਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਤਾਂ ਜੋ \(\ਲਗਭਗ 10^{12}\,{\hbox {PFU}/\hbox} ਨਾਲ ਅੰਤਮ ਟਾਇਟਰ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਜਾ ਸਕਣ। ml}}\) (ਪਲਾਕ ਬਣਾਉਣ ਵਾਲੀਆਂ ਇਕਾਈਆਂ/ ਮਿਲੀਲੀਟਰ)। ਨਿਰਮਾਤਾ ਦੀਆਂ ਹਦਾਇਤਾਂ ਅਨੁਸਾਰ GenElute™ ਯੂਨੀਵਰਸਲ ਕੁੱਲ RNA ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਕਿੱਟ (ਸਿਗਮਾ-ਐਲਡਰਿਕ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ RNA ਨੂੰ ਸ਼ੁੱਧ ਫੇਜ਼ ਕਣਾਂ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਸੰਖੇਪ ਵਿੱਚ, ਇੱਕ ਸ਼ੁੱਧ ਫੇਜ਼ ਫਾਈ6 ਸਸਪੈਂਸ਼ਨ\({ 100}\,{{\upmu \hbox {l}}}\) ਨੂੰ ਲਾਈਜ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ ਲਾਈਸੇਟ ਨੂੰ ਇੱਕ ਸਪਿੱਨ ਕਾਲਮ ਉੱਤੇ ਲੋਡ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਤਾਂ ਜੋ RNA ਨੂੰ ਰੈਜ਼ਿਨ ਕਾਲਮ ਨਾਲ ਜੋੜਿਆ ਜਾ ਸਕੇ । 50}\,{{\upmu \hbox {l}}}\) ਕਿੱਟ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। \(260\,\hbox {nm}\) 'ਤੇ ਸਮਾਈ ਦੁਆਰਾ RNA ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦਾ ਅੰਦਾਜ਼ਾ ਲਗਾਓ। RNA ਨੂੰ \ ਵਿੱਚ ਐਲੀਕੋਟਸ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ({-80}\,{^{\circ }\hbox {C}}\) ਅਗਲੀ ਵਰਤੋਂ ਤੱਕ।\({2}\,{\upmu \hbox {g}}\) iScript cDNA ਸਿੰਥੇਸਿਸ ਕਿੱਟ (ਬਾਇਓ -ਰੈਡ ਲੈਬਾਰਟਰੀਜ਼) ਨੂੰ ਨਿਰਮਾਤਾ ਦੀਆਂ ਹਦਾਇਤਾਂ ਦੀ ਪਾਲਣਾ ਕਰਦੇ ਹੋਏ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਇੱਕ ਨਮੂਨੇ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਸੰਖੇਪ ਵਿੱਚ, ਇੱਕ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਿੱਚ 3 ਪੜਾਅ ਹੁੰਦੇ ਹਨ: \({25}\,{^{\circ }\hbox {C}}\' 'ਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਿੰਗ। )\({5}\,{\hbox {min} }\), \({20}\,{\hbox {min}}\) ਦਾ ਉਲਟਾ ਪ੍ਰਤੀਲਿਪੀ \({46}\,{^{\circ) }\hbox {C}}\), ਅਤੇ ਰਿਵਰਸ ਰਿਕਾਰਡਰ \({95}\,{^{\circ }\hbox {C}}\) \({1}\,{\hbox {ਮਿੰਟ) ਵਿੱਚ ਹੈ }}\).ਜਦੋਂ 1% ਐਗਰੋਜ਼ ਜੈੱਲ 'ਤੇ ਚਲਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ cDNA ਨੇ ਸੰਭਾਵਿਤ ਤਿੰਨ ਆਰਐਨਏ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰੀ ਤਿੰਨ ਬੈਂਡ ਦਿਖਾਏ (ਡਾਟਾ ਨਹੀਂ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ)। ਹੇਠਲੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ 117 ਅਤੇ 503 bp ਦੇ ਦੋ ਡੀਐਨਏ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਇੱਕ miniPCR® mini8 ਥਰਮਲ ਸਾਈਕਲਰ ਵਿੱਚ PCR ਲਈ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਜੋਂ cDNA ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨਾ:
\(117\,\hbox {bp}\) ਅਤੇ \(503\,\hbox {bp}\) ਲਈ ਪ੍ਰਾਈਮਰ M ਖੰਡ ਦੇ 1476-1575 ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਾਂ ਅਤੇ L ਖੰਡ ਦੇ 458-943 ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਾਂ, ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਐਸਿਡ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦੇ ਹਨ। .ਸਾਰੇ ਐਮਪਲੀਫਾਈਡ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਨੂੰ 1% ਐਗਰੋਸ ਜੈੱਲਾਂ 'ਤੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਜੀਨਜੇਟ ਜੈੱਲ ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ (ਥਰਮੋ ਫਿਸ਼ਰ ਸਾਇੰਟਿਫਿਕ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਐਂਪਲੀਫਾਈਡ ਟੀਚਾ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਸ਼ੁੱਧ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।
IIT ਮੁੰਬਈ ਕੈਂਪਸ (Powai Lake, Powai, Mumbai) ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਝੀਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਫੇਜ ਕਣਾਂ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਸੀ। ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਨੂੰ ਇੱਕ \({5}\,{\upmu \hbox {m}}\) ਝਿੱਲੀ ਰਾਹੀਂ ਫਿਲਟਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਮੁਅੱਤਲ ਕਣ, ਅਤੇ ਫਿਰ Phi6 ਫੇਜ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ। \(10^{6}\,{\hbox {PFU}/\hbox {ml}} ਦਾ \({1}\,{\hbox {ml}}\) ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ। \) ਤੋਂ \({100}\ ,{\hbox {ml}}\) ਫਿਲਟਰਡ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ, \({4}\,{^{\circle}\hbox {C}}\) ਵਿੱਚ।ਇੱਕ ਛੋਟਾ ਅਲੀਕੋਟ ਸੀ। ਪਲੇਕ ਅਸੇ ਦੁਆਰਾ ਵਾਇਰਲ ਲੋਡ ਮਾਪ ਲਈ ਰਾਖਵਾਂ। ਅਸੀਂ ਸਪਾਈਕਡ Phi6 ਵਾਇਰਸ ਕਣਾਂ ਨੂੰ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਦੋ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ: (1) ਐਲੂਮੀਨੀਅਮ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਾਈਡ ਸੋਸ਼ਣ-ਵਰਖਾ ਵਿਧੀ, 19 ਜਿਸ ਨੂੰ ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਕਈ ਲਿਫਾਫੇ ਵਾਲੇ ਆਰਐਨਏ ਵਾਇਰਸਾਂ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਲਈ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਤੇ (2) ) ਪੋਲੀਥੀਲੀਨ ਗਲਾਈਕੋਲ (ਪੀਈਜੀ) ਅਧਾਰਤ ਵਾਇਰਸ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਫਲੱਡ ਐਟ ਅਲ ਤੋਂ ਅਪਣਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ।20 .ਕਿਉਂਕਿ PEG-ਅਧਾਰਿਤ ਵਿਧੀ ਦੀ ਰਿਕਵਰੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਐਲੂਮੀਨੀਅਮ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਾਈਡ ਵਿਧੀ ਨਾਲੋਂ ਬਿਹਤਰ ਪਾਈ ਗਈ ਸੀ, PEG-ਅਧਾਰਿਤ ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ Phi6 ਕਣਾਂ ਨੂੰ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
ਵਰਤੀ ਗਈ PEG ਵਿਧੀ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੀ: PEG 8000 ਅਤੇ \(\hbox {NaCl}\) ਨੂੰ 8% PEG 8000 ਅਤੇ \(0.2\,\hbox {M} \) ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ Phi6-ਸਪਾਈਕ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। \ hbox {NaCl}\). ਨਮੂਨੇ ਇੱਕ ਸ਼ੇਕਰ \({4}\,{^{\circ }\hbox {C}}\)\({4}\,{\hbox {h}}\) 'ਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ), ਫਿਰ \(4700 \,\hbox {g}\) \({45}\,{\hbox {min}}\) 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਨੂੰ ਰੱਦ ਕਰੋ ਅਤੇ ਗੋਲੀ ਨੂੰ \({1}\,) ਵਿੱਚ ਮੁੜ ਸਸਪੈਂਡ ਕਰੋ। {\hbox {ml}}\) ਇੱਕੋ ਹੀ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਵਿੱਚ। ਸਾਰੇ ਸਪਾਈਕਿੰਗ ਅਤੇ ਵਾਇਰਸ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਪ੍ਰਯੋਗ ਤਿੰਨ ਗੁਣਾਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। ਇਕਾਗਰਤਾ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਪਲੇਕ ਅਸੇ ਦੁਆਰਾ ਰਿਕਵਰੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਦੇ ਮਾਪ ਲਈ ਇੱਕ ਛੋਟਾ ਅਲੀਕੋਟ ਰਾਖਵਾਂ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਪਹਿਲਾਂ ਵਰਣਨ ਕੀਤੇ ਅਨੁਸਾਰ ਅਲੱਗ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਕਿੱਟ-ਸਪਲਾਈ ਕੀਤੇ ਈਲੂਸ਼ਨ ਬਫਰ\({40}\,{\upmu \hbox {l}}\) ਵਿੱਚ। ਕਿਉਂਕਿ ਆਰਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨਮੂਨੇ ਤੋਂ ਲੈ ਕੇ ਨਮੂਨੇ ਤੱਕ ਤਿੰਨ ਪ੍ਰਤੀਕ ਵਿੱਚ ਵੱਖਰਾ ਹੋਵੇਗਾ, \({2}\,{\upmu \ RNA ਦਾ hbox {l}}\) ਨਮੂਨੇ ਦੇ cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਦੀ ਪਰਵਾਹ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ ਇਹਨਾਂ ਤਿੰਨਾਂ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। cDNA ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਪਹਿਲਾਂ ਦੱਸੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ।\({1}\,{\upmu \hbox {l}}\) cDNA \({20}\,{\upmu \hbox {l}}\) \(117\,\hbox {bp}\) ਅਤੇ \(503\,\hbox { ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਲਈ 35 ਚੱਕਰਾਂ ਲਈ PCR ਲਈ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। bp}\) ਟੁਕੜੇ। ਇਹ ਨਮੂਨੇ “1:1″ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਹਨ, ਭਾਵ ਪਤਲੇਪਣ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ। ਇੱਕ ਨੋ-ਟੈਂਪਲੇਟ ਕੰਟਰੋਲ (NTC) ਨੂੰ ਇੱਕ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦੇ ਤੌਰ ਤੇ ਸਥਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਸ਼ੁੱਧ ਫੇਜ਼ ਤੋਂ ਅਲੱਗ RNA ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਇੱਕ cDNA ਸੰਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਸਥਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ (ਪੀਸੀ) ਲਈ ਇੱਕ ਨਮੂਨੇ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ। ਕੁਆਂਟੀਟੇਟਿਵ ਪੀਸੀਆਰ (qPCR) ਨੂੰ ਬ੍ਰਿਲਿਅੰਟ III ਅਲਟਰਾ-ਫਾਸਟ SYBR ਗ੍ਰੀਨ QPCR ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ (ਐਜੀਲੈਂਟ ਟੈਕਨਾਲੋਜੀਜ਼) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਇੱਕ ਸਟ੍ਰੈਟੇਜੀਨ Mx3000P RT-PCR ਯੰਤਰ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਪ੍ਰਤੀਕਰਮਾਂ ਨੂੰ ਪਹਿਲਾਂ ਵਾਂਗ ਤੀਹਰੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਸੈੱਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਵਰਣਨ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ। ਸਾਰੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਚੱਕਰ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ (ਸੀਟੀ) ਰਿਕਾਰਡ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਪਤਲੇ ਨਮੂਨੇ \({1}\,{\upmu \hbox {l}}\) cDNA ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਫਿਲਟਰ ਕੀਤੇ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ 1:100 ਪਤਲੇ ਹੋਏ ਸਨ। \({20}\,{\upmu \hbox {l}}\) 35 ਚੱਕਰਾਂ ਲਈ PCR। ਇਹਨਾਂ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ “1:100″ ਵਜੋਂ ਦਰਸਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ।
PCB ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਨੂੰ ਵਾਧੂ ਗੋਲਡ ਪਲੇਟਿੰਗ ਦੀ ਲੋੜ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਇੱਕ ਵਪਾਰਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਉਪਲਬਧ ਘੱਟ ਕੀਮਤ ਵਾਲੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਲੇਸ ਨਿਕਲ ਇਮਰਸ਼ਨ ਗੋਲਡ (ENIG) ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਘੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ENIG PCB ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਕੰਮ ਵਿੱਚ ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਹਨ 11. ENIG PCB ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਲਈ, ਰਵਾਇਤੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਸਫਾਈ ਵਿਧੀਆਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪਿਰਾਨਹਾ ਘੋਲ ਜਾਂ ਸਲਫਿਊਰਿਕ ਐਸਿਡ ਸਾਈਕਲਿਕ ਵੋਲਟਮੈਟਰੀ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਨਹੀਂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ ਪਤਲੀ ਸੋਨੇ ਦੀ ਪਰਤ (ਮੋਟਾਈ \(\ਲਗਭਗ\) \(100\,\hbox {nm }\)) ਨੂੰ ਛਿੱਲਣ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਹੇਠਲੀ ਤਾਂਬੇ ਦੀਆਂ ਪਰਤਾਂ ਨੂੰ ਬੇਨਕਾਬ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ ਜੋ ਸੰਭਾਵਤ ਹਨ। 21, 22, 23, 24, 25। ਇਸਲਈ, IPA ਨਾਲ ਗਿੱਲੇ ਹੋਏ ਲਿੰਟ-ਮੁਕਤ ਕੱਪੜੇ ਨਾਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਨੂੰ ਸਾਫ਼ ਕਰੋ। ਟੈਸਟ ਕੀਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ \({50}\,{\upmu \hbox {M}} ਨਾਲ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ। }\) ਸੌਖੀ ਸੰਮਿਲਨ ਲਈ \({4}\,{^{\circ }\hbox {C}}\)\({ 1}\,{\hbox {h}}\) ਵਿੱਚ MB। ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਕੰਮ ਵਿੱਚ , ਅਸੀਂ ਦੇਖਿਆ ਕਿ ਸੈਂਸਰ ਦੀ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਰੇਖਿਕਤਾ ਨੂੰ MB ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਵਧਾ ਕੇ ਸੁਧਾਰਿਆ ਗਿਆ ਸੀ .ਸਾਡੇ ਪਹਿਲੇ ਕੰਮ ਵਿੱਚ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਅਨੁਕੂਲਨ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ, ਅਸੀਂ \({50}\,{\upmu \hbox {M}}\) MB ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਏਮਬੇਡ ਕਰਨ ਲਈ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ। ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਡੀਐਨਏ (ਡੀਐਸ-ਡੀਐਨਏ) ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਖੋਜ ਐਨੀਓਨਿਕ ਜਾਂ ਕੈਟੈਨਿਕ ਇੰਟਰਕਲੇਟਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਹਾਲਾਂਕਿ ਐਨੀਓਨਿਕ ਇੰਟਰਕਲੇਟਰਜ਼ ਬਿਹਤਰ ਚੋਣ ਨਾਲ ਡੀਐਨਏ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਰਾਤੋ-ਰਾਤ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਖੋਜ ਦਾ ਸਮਾਂ ਲੰਬਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਦੂਜੇ ਪਾਸੇ, ਕੈਟੈਨਿਕ ਇੰਟਰਕੇਲੇਟਰਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ MB ਨੂੰ ds-DNA6 ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਖੋਜ ਲਈ, ਲਗਭਗ \({1}\,{\hbox {h}}\) ਛੋਟੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਸਮੇਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਹਰੇਕ ਮਾਪ ਵਿੱਚ ਟੈਸਟ ਕੀਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਵੰਡਣਾ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ। ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ\({5}\,{{\upmu \hbox {l}}}\), ਫਿਰ ਇੱਕ ਹੋਰ ਨਮੂਨੇ ਨਾਲ ਅੱਗੇ ਵਧਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਇੱਕ IPA-ਨਿੱਘੇ ਰਾਗ ਨਾਲ ਸਾਫ਼ ਕਰੋ।ਇੱਕ ਮਾਪ। ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ ਦੀ 5 ਵੱਖ-ਵੱਖ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ 'ਤੇ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ ਜਦੋਂ ਤੱਕ ਕਿ ਹੋਰ ਨਹੀਂ ਦੱਸਿਆ ਗਿਆ। DPV ਅਤੇ CV ਮਾਪ ਇੱਕ PalmSens Sensit Smart potentiostat ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ, ਅਤੇ PSTrace ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ potentiostat ਸੰਰਚਨਾ ਅਤੇ ਡਾਟਾ ਪ੍ਰਾਪਤੀ ਲਈ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਸਿਖਰ ਮੌਜੂਦਾ ਗਣਨਾ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੀਆਂ ਸੈਟਿੰਗਾਂ ਵਰਤੀਆਂ ਜਾਂਦੀਆਂ ਹਨ। DPV ਅਤੇ CV ਮਾਪ ਲਈ:
DPV: ਸੰਤੁਲਨ ਸਮਾਂ = \(8\,\hbox {s}\), ਵੋਲਟੇਜ ਸਟੈਪ = \(3\,\hbox {mV}\), ਪਲਸ ਵੋਲਟੇਜ = \(25\,\hbox {mV}\) , ਪਲਸ ਦੀ ਮਿਆਦ = \(50\,\hbox {ms}\), ਸਕੈਨ ਦਰ = \({20}\,\hbox {mV/s}\)
CV: ਸੰਤੁਲਨ ਸਮਾਂ = \(8\,\hbox {s}\), ਵੋਲਟੇਜ ਸਟੈਪ = \(3\,\hbox {mV}\), ਸਵੀਪ ਰੇਟ = \({300}\,\hbox {mV/s }\)
\({50}\,{\upmu \hbox {M}}\) MB: (a) \(503\,\hbox {bp}\) DPV, (b) \ ਨਾਲ ਕੰਪਲੈਕਸ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਵੋਲਟੈਮੋਗ੍ਰਾਮ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਪੀਕ ਕਰੰਟਸ (503\,\hbox {bp}\) CV, (c) \(117\,\hbox {bp}\) DPV, (d) \(117\,\hbox {bp}\) CV।
DPV ਅਤੇ CV ਵੋਲਟੈਮੋਗ੍ਰਾਮ ENIG PCB ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਸ \({50}\,{\upmu \hbox {M}}\) MB DNA (10–\({20}\,{\ hbox {ng ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ) ਨਾਲ ਸੰਮਿਲਿਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ। }/{\upmu \hbox {l}}}\) ਭਾਵ 0.13–\({0.26}\,{\upmu \hbox {M}}\) \(117\,\hbox {bp}\ ) ਅਤੇ 0.03 ਲਈ –\({0.06}\,{\upmu \hbox {M}}\) \(503\,\hbox {bp}\) ਲਈ। ਪ੍ਰਤੀਨਿਧੀ ਵੋਲਟੈਮੋਗ੍ਰਾਮ ਪੂਰਕ ਜਾਣਕਾਰੀ ਵਿੱਚ ਚਿੱਤਰ S1 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਚਿੱਤਰ 2 ਨਤੀਜੇ ਦਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਜੈੱਲ-ਸ਼ੁੱਧ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ DPV ਅਤੇ CV ਮਾਪਾਂ (ਚੋਟੀ ਦੇ ਮੌਜੂਦਾ)। ਬਾਕਸਪਲਾਟ ਵਿੱਚ ਹਰੇਕ ਬਕਸੇ ਲਈ 5 ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਤੋਂ ਮਾਪ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਸਾਰੇ ਮਾਪ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ-ਤੋਂ-ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਪਰਿਵਰਤਨ ਦੇ ਕਾਰਨ ਮਾਪ ਦੀਆਂ ਗਲਤੀਆਂ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਦੇ ਇੱਕੋ ਸੈੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਅਸੀਂ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਘੱਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਲਈ DPV ਅਤੇ CV ਮਾਪੀਆਂ ਚੋਟੀ ਦੇ ਕਰੰਟਾਂ ਵਿੱਚ ਵੱਧ ਰਹੇ ਰੁਝਾਨ ਨੂੰ ਦੇਖਿਆ। , ਲੰਬੇ (\(503\,\hbox {bp}\)) \,\hbox {bp}\ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ \(117) ) ਟੁਕੜੇ। ਇਹ ਸਾਡੇ ਪਿਛਲੇ ਕੰਮ ਵਿੱਚ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਦੇ ਸੰਭਾਵਿਤ ਰੁਝਾਨ ਨਾਲ ਮੇਲ ਖਾਂਦਾ ਹੈ। MB-DNA ਕੰਪਲੈਕਸ ਦਾ ਸੋਸ਼ਣ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ 'ਤੇ ਚਾਰਜ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਦੀ ਸਹੂਲਤ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਪੀਕ ਕਰੰਟ ਦੇ ਵਾਧੇ ਵਿੱਚ ਯੋਗਦਾਨ ਪਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਹੋਰ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ MB-DNA ਇੰਟਰਕੈਲੇਸ਼ਨ 27,28,29,30 'ਤੇ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਆਕਾਰ ਅਤੇ ਕ੍ਰਮ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ। ਦੋ ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ (\(117\,\hbox {bp}\) ਅਤੇ \(503\,\hbox {bp}\)) ਦੀ ਸਾਇਟੋਸਾਈਨ (GC) ਸਮੱਗਰੀ ਲਗਭਗ 50% ਸੀ, ਜੋ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ ਕਿ ਨਿਰੀਖਣ ਦੇ ਅੰਤਰ ਕਾਰਨ ਹੈ। ਐਂਪਲੀਕਨ ਲੰਬਾਈ ਤੱਕ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਉੱਚ ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (\(>{2}\,{\hbox {ng}/{\upmu \hbox {l}}}\), \(503\,\hbox {bp} ਲਈ) \) ਅਤੇ \( >{10}\,{\hbox {ng}/{\upmu \hbox {l}}}\) \(117\,\hbox {bp}\) ਲਈ), ਅਸੀਂ ਦੋ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਦਾ ਨਿਰੀਖਣ ਕਰਦੇ ਹਾਂ। ਸਬਸ ਦੇ ਸਿਖਰ ਕਰੰਟ DPV ਅਤੇ CV ਦੋਵਾਂ ਮਾਪਾਂ ਵਿੱਚ ਘਟਾਏ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ਇਹ ਇਸ ਲਈ ਹੈ ਕਿਉਂਕਿ MB ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਬੇਸ ਜੋੜਿਆਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਸੰਤ੍ਰਿਪਤ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇੰਟਰਕੇਲੇਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ MB31,32 ਵਿੱਚ ਰੀਡੂਸੀਬਲ ਗਰੁੱਪ ਦੀ ਰੀਡੌਕਸ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੀ ਸਟੀਰਿਕ ਰੋਕ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
在存在 \(2\,\hbox {mM}\) \({\hbox {MgCl }_2}\): (a) \(503\,\hbox {bp}\) DPV, (b) \(503 \,\hbox {bp}\) CV, (c) \(117\,\hbox {bp}\) DPV，(d) \(117\,\hbox {bp}\) CV।
ਪੀਸੀਆਰ ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਲੂਣ MB ਅਤੇ DNA ਵਿਚਕਾਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਟੈਟਿਕ ਪਰਸਪਰ ਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਵਿਘਨ ਪਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਇਸਲਈ \(2\,\hbox {mM}\) \(\hbox {MgCl }_2\) \({50} \,{\) ਨਾਲ ਜੋੜ ਕੇ। upmu \hbox {M}}\) MB-DNA ਪਰਸਪਰ ਕਿਰਿਆ 'ਤੇ ਲੂਣ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਕਰਨ ਲਈ MB ਜੈੱਲ-ਸ਼ੁੱਧ ਉਤਪਾਦ। ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 3 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਅਸੀਂ ਦੇਖਿਆ ਹੈ ਕਿ ਉੱਚ ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (\(>{2}\,{\) ਲਈ hbox {ng}/{\upmu \hbox {l}}}\) (503\,\hbox {bp }\) ਅਤੇ \(>{10}\,{\hbox {ng}/{\upmu \hbox { l}}}\) ਲਈ \(117\,\hbox {bp} \)), DPV ਅਤੇ CV ਵਿੱਚ ਲੂਣ ਦੇ ਜੋੜ ਨੇ ਮਾਪਾਂ ਨੂੰ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ (ਪ੍ਰਤੀਨਿਧੀ ਵੋਲਟੈਮੋਗ੍ਰਾਮ ਲਈ ਪੂਰਕ ਜਾਣਕਾਰੀ ਵਿੱਚ ਚਿੱਤਰ S2 ਵੇਖੋ)। ਘੱਟ ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ, ਲੂਣ ਦੇ ਜੋੜ ਨਾਲ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਨਾਲ ਮੌਜੂਦਾ ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤਬਦੀਲੀ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦੀ। MB-DNA ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਅਤੇ ਇੰਟਰਕੈਲੇਸ਼ਨ ਉੱਤੇ ਲੂਣ ਦੇ ਸਮਾਨ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਪ੍ਰਭਾਵਾਂ ਨੂੰ ਪਹਿਲਾਂ ਹੋਰ ਖੋਜਕਰਤਾਵਾਂ ਦੁਆਰਾ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ33,34।\(\hbox { Mg}^{2+}\) ਕੈਸ਼ਨ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਫਾਸਫੇਟ ਰੀੜ੍ਹ ਦੀ ਹੱਡੀ ਨਾਲ ਬੰਨ੍ਹਦੇ ਹਨ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ MB ਅਤੇ DNA ਵਿਚਕਾਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਟੈਟਿਕ ਪਰਸਪਰ ਕ੍ਰਿਆ ਵਿੱਚ ਰੁਕਾਵਟ ਪਾਉਂਦੇ ਹਨ। ਉੱਚ ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ, ਰੇਡੌਕਸ-ਐਕਟਿਵ MBs ਦੇ ਸਟੀਰਿਕ ਰੋਕ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਹੇਠਲੇ ਚੋਟੀ ਦੇ ਕਰੰਟ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਇਸਲਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਸਟੈਟਿਕ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਸੰਵੇਦਕ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਨਹੀਂ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਮੁੱਖ ਨੁਕਤਾ ਇਹ ਹੈ ਕਿ ਇਹ ਬਾਇਓਸੈਂਸਰ ਉੱਚ ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਬਿਹਤਰ ਅਨੁਕੂਲ ਹੈ (ਬਹੁਤ ਹੀ ਘੱਟ \({\hbox {ng}/{\upmu \hbox {l}}}\) ਜਾਂ ਵੱਧ), ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸਵੈਚਾਲਤ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਲਈ, ਜਿੱਥੇ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਜੈੱਲ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਸੰਭਵ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕਦੀ।
\({50}\,{\upmu \hbox {M}}\) MB ਨਾਲ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਡੀਐਨਏ ਦੀਆਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸੰਘਣਤਾਵਾਂ ਲਈ ਤਰੰਗ-ਲੰਬਾਈ ਰੇਂਜ 600–700 \(\hbox {nm}\) ਲਈ ਸਮਾਈ ਕਰਵ ਦੇ ਅਧੀਨ ਖੇਤਰ: ( a ) \(503\,\hbox {bp}\) ਲੂਣ ਦੇ ਨਾਲ ਅਤੇ ਬਿਨਾਂ (\(2\,\hbox {mM}\) \(\hbox {MgCl}_2\)), (b) \( 117\, \hbox {bp}\) ਲੂਣ ਦੇ ਨਾਲ ਅਤੇ ਬਿਨਾਂ (\(2\,\hbox {mM}\) \(\hbox {MgCl}_2\))।\({0}\,{\hbox {pg}/ {\upmu \hbox {l}}}\) DNA ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ \({50}\,{\upmu \hbox {M}}\) MB ਨਮੂਨੇ ਕੋਈ DNA ਨਹੀਂ।
ਉਪਰੋਕਤ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਹੋਰ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਨ ਲਈ, ਅਸੀਂ UV/Vis ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ (ਥਰਮੋ ਸਾਇੰਟਿਫਿਕ ਮਲਟੀਸਕੈਨ ਜੀਓ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਆਪਟੀਕਲ ਮਾਪ ਕੀਤੇ, ਨਮੂਨੇ \({50}\,{{\upmu \hbox {l}}}\) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਮਾਪ। ਵਧਦੀ DNA ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਨਾਲ ਸਮਾਈ ਦਸਤਖਤ ਘਟਦੇ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਤਰੰਗ-ਲੰਬਾਈ ਰੇਂਜ \(600\,\hbox {nm}\) ਤੋਂ \(700\,\hbox {) ਲਈ ਸਮਾਈ ਵਕਰ ਦੇ ਅਧੀਨ ਖੇਤਰ ਦੇ ਰੁਝਾਨ ਤੋਂ ਦੇਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। nm}\), ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਚਿੱਤਰ 4 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ (ਪੂਰਕ ਜਾਣਕਾਰੀ ਵਿੱਚ ਚਿੱਤਰ S3 ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ)।\({1}\,{\hbox {ng}/{\upmu \hbox) ਤੋਂ ਘੱਟ ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਵਾਲੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ {l}}}\), DNA-ਰੱਖਣ ਵਾਲੇ ਅਤੇ MB-ਸਿਰਫ ਨਮੂਨਿਆਂ (\(503\,\hbox {bp}\ ਲਈ) ਅਤੇ \(117\,\hbox {bp}\ ਲਈ) ਵਿੱਚ ਕੋਈ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਅੰਤਰ ਨਹੀਂ ਸੀ। ) ਲੰਬਾਈ ਦੇ ਟੁਕੜੇ), ਰੇਡੌਕਸ-ਐਕਟਿਵ MB ਦੀ ਸਟੀਰਿਕ ਰੋਕ ਦੀ ਅਣਹੋਂਦ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹੋਏ। ਉੱਚ ਡੀਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ, ਅਸੀਂ ਸੋਖਣ ਵਾਲੇ ਸੰਕੇਤ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਹੌਲੀ ਹੌਲੀ ਕਮੀ ਵੇਖੀ ਅਤੇ ਲੂਣ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਵਿੱਚ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਘੱਟ ਕਮੀ ਨੋਟ ਕੀਤੀ। ਇਹਨਾਂ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਅਣੂ ਦੇ ਕਾਰਨ ਮੰਨਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਡੀਐਨਏ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡ ਵਿੱਚ ਬੇਸ ਸਟੈਕਿੰਗ ਦੇ ਨਾਲ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਅਤੇ ਸਟੀਰਿਕ ਰੋਕ। ਸਾਡੇ ਨਤੀਜੇ MB-DNA ਇੰਟਰਕੈਲੇਸ਼ਨ ਦੇ ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਸਕੋਪਿਕ ਅਧਿਐਨਾਂ ਬਾਰੇ ਸਾਹਿਤ ਵਿੱਚ ਰਿਪੋਰਟਾਂ ਦੇ ਨਾਲ ਇਕਸਾਰ ਹਨ ਜੋ \(\pi\)-\(\pi ^*\) ਵਿੱਚ ਘਟੇ ਹੋਏ ਊਰਜਾ ਪੱਧਰਾਂ ਨਾਲ ਹਾਈਪੋਕ੍ਰੋਮੈਟਿਕਤਾ ਨੂੰ ਜੋੜਦੇ ਹਨ। ) ਇੰਟਰਕੈਲੇਸ਼ਨ ਲੇਅਰਾਂ 36, 37, 38 ਦੇ ਕਾਰਨ ਇਲੈਕਟ੍ਰਾਨਿਕ ਪਰਿਵਰਤਨ।
ਫੇਜ ਫਾਈ6 ਦਾ ਐਗਰੋਸ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ: ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਲੰਬਾਈ \(117\,\hbox {bp}\) ਅਤੇ \(503\,\hbox {bp}\) ਦੇ PCR ਉਤਪਾਦ।M-DNA ਮਾਰਕਰ;NTC-ਨੋ-ਟੈਂਪਲੇਟ ਕੰਟਰੋਲ, ਅਨੁਸਾਰੀ ਐਂਪਲੀਕੋਨ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ;ਪੀਸੀ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ;1, 2, 3-ਅਨਡਿਲਿਊਟਿਡ (1:1) ਤਿੱਕੜੀ ਵਿੱਚ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨੇ। \(503\,\ ਵਿੱਚ ਅਣਵਰਤੇ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਕਾਰਨ ਇੱਕ ਬੈਂਡ \(\ਲਗਭਗ 50\,\hbox {bp}\) 'ਤੇ ਦਿਖਾਈ ਦਿੰਦਾ ਹੈ। hbox {bp}\) ਲੇਨ।
ਅਸੀਂ ਪਵਈ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਸੈਂਸਰ ਦੀ ਉਪਯੋਗਤਾ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕੀਤਾ ਜੋ Phi6 ਫੇਜ਼ ਨਾਲ ਸਪਾਈਕ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ। ਫੇਜ਼-ਸਪਾਈਕ ਵਾਲੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤੇ ਗਏ ਆਰਐਨਏ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 15.8–\({19.4}\,{\upmu \hbox {g}/\hbox} ਤੱਕ ਸੀਮਾ ਹੈ। ml}}\), ਜਦੋਂ ਕਿ ਸ਼ੁੱਧ ਫੇਜ਼ ਸਸਪੈਂਸ਼ਨਾਂ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤੇ ਗਏ RNA ਲਗਭਗ 1 ਦੀ ਰਿਕਵਰੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਦੇ ਨਾਲ \({1945}\,{\upmu \hbox {g}/\hbox {ml}}\) ਹੋਣ ਦਾ ਅਨੁਮਾਨ ਲਗਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। %.RNA ਨੂੰ cDNA ਵਿੱਚ ਉਲਟਾ ਰੂਪਾਂਤਰਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ ਅਤੇ PCR ਅਤੇ qPCR ਲਈ ਟੈਪਲੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਸੈਂਸਰ ਨਾਲ ਟੈਸਟ ਕਰਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਉਤਪਾਦ ਦੇ ਆਕਾਰ ਦੀ ਪੁਸ਼ਟੀ ਐਗਰੋਸ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ (ਚਿੱਤਰ 5) ਦੁਆਰਾ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਇਹ ਨਮੂਨੇ ਜੈੱਲ ਸ਼ੁੱਧ ਨਹੀਂ ਹਨ ਅਤੇ ਇਸ ਲਈ ਪੀਸੀਆਰ ਦੇ ਸਾਰੇ ਹਿੱਸੇ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਨਾਲ ਹੀ ਦਿਲਚਸਪੀ ਦੇ ਐਂਪਲੀਕੋਨ। qPCR (ਸਾਰਣੀ 1) ਦੌਰਾਨ ਰਿਕਾਰਡ ਕੀਤੇ ਗਏ Ct ਮੁੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸੰਬੰਧਿਤ ਸਪਾਈਕਡ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤੇ ਗਏ RNA ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਨਾਲ ਸਬੰਧ ਦਿਖਾਉਣ ਲਈ ਦਿਖਾਇਆ ਗਿਆ ਸੀ। Ct ਮੁੱਲ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਸਿਗਨਲ ਲਈ ਲੋੜੀਂਦੇ ਚੱਕਰਾਂ ਦੀ ਸੰਖਿਆ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਥ੍ਰੈਸ਼ਹੋਲਡ ਜਾਂ ਬੈਕਗ੍ਰਾਊਂਡ ਸਿਗਨਲ ਨੂੰ ਪਾਰ ਕਰੋ। ਉੱਚ Ct ਮੁੱਲ ਘੱਟ ਟੈਮਪਲੇਟ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਇਸ ਦੇ ਉਲਟ। NTC ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ Ct ਮੁੱਲ ਉਮੀਦ ਅਨੁਸਾਰ ਉੱਚੇ ਸਨ। \(\ਲਗਭਗ 3\) Ct ਮੁੱਲਾਂ ਵਿਚਕਾਰ ਅੰਤਰ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਅਤੇ ਟੈਸਟ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ਅੱਗੇ ਇਹ ਦਰਸਾਉਂਦਾ ਹੈ ਕਿ ਹਰੇਕ ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਲਗਭਗ 1% ਟੈਂਪਲੇਟ ਹੈ। ਅਸੀਂ ਪਹਿਲਾਂ ਚਰਚਾ ਕੀਤੀ ਹੈ ਕਿ ਲੰਬੇ ਐਂਪਲੀਕੋਨ ਬਿਹਤਰ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਵੱਲ ਲੈ ਜਾਂਦੇ ਹਨ। ਨੁਕਸਾਨਾਂ ਦੇ ਕਾਰਨ ਵਿਪਰੀਤ ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਅਲੱਗ ਕੀਤੇ ਲੰਬੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦਾ ਪ੍ਰਸਾਰ ਕਰਨਾ ਚੁਣੌਤੀਪੂਰਨ ਹੈ। ਘੱਟ ਵਾਇਰਲ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਡਿਗਰੇਡੇਸ਼ਨ। ਹਾਲਾਂਕਿ, ਸਾਡੇ ਵਾਇਰਸ ਸੰਸ਼ੋਧਨ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਨਾਲ, ਅਸੀਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਿੰਗ ਲਈ \(503\,\hbox {bp}\) ਟੁਕੜੇ ਨੂੰ ਸਫਲਤਾਪੂਰਵਕ ਵਧਾਉਣ ਦੇ ਯੋਗ ਸੀ।
ਚਿੱਤਰ 6 \(503\,\hbox {bp}\) ਫਰੈਗਮੈਂਟ ਐਂਪਲੀਕਨ ਦੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਰ ਨਤੀਜੇ ਦਿਖਾਉਂਦਾ ਹੈ, ਦੋਵੇਂ ਟੈਂਪਲੇਟ (1:1) ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ undiluted cDNA ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ (1:100) ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ 100-ਫੋਲਡ ਪਤਲੇ cDNA ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ PCR ਕੀਤਾ। , NTC ਅਤੇ PC ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ (ਪ੍ਰਤੀਨਿਧੀ ਵੋਲਟੈਮੋਗ੍ਰਾਮ ਲਈ ਪੂਰਕ ਜਾਣਕਾਰੀ ਵਿੱਚ ਚਿੱਤਰ S4 ਵੇਖੋ)। ਚਿੱਤਰ 6 ਵਿੱਚ ਬਾਕਸਪਲਾਟ ਵਿੱਚ ਹਰੇਕ ਬਕਸੇ ਵਿੱਚ 5 ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਾਂ ਤੇ ਤਿੰਨ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਮਾਪ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਦੇ ਕਾਰਨ ਗਲਤੀਆਂ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਸਾਰੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਮਾਪਣ ਲਈ ਇੱਕੋ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। -ਤੋਂ-ਇਲੈਕਟਰੋਡ ਪਰਿਵਰਤਨ।ਸੀਵੀ ਮਾਪਾਂ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ, DPV ਮਾਪ NTCs ਤੋਂ ਟੈਸਟ ਅਤੇ PC ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਲਈ ਬਿਹਤਰ ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਦਿਖਾਉਂਦੇ ਹਨ ਕਿਉਂਕਿ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਪਹਿਲਾਂ ਦੱਸਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਫਰਾਡਾਈਕ ਕਰੰਟ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਬੈਕਗ੍ਰਾਉਂਡ ਕੈਪੇਸਿਟਿਵ ਕਰੰਟ ਦੇ ਕਾਰਨ ਲੁਕੇ ਹੋਏ ਹਨ। ਲੰਬੇ ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਦੇਖਿਆ ਹੈ ਕਿ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ (NTC) ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ ਉੱਚ CV ਅਤੇ DPV ਪੀਕ ਕਰੰਟ ਨਿਕਲੇ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਅਤੇ ਅਨਡਿਲਿਊਟਡ ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੇ DPV ਪੀਕ ਕਰੰਟਸ ਦੇ ਸਮਾਨ ਸਿਖਰ ਉਚਾਈਆਂ ਨੂੰ ਦਿਖਾਇਆ। ਹਰੇਕ ਅਨਡਿਲਿਊਟਿਡ (1:1) ਲਈ ਮਾਪਿਆ ਗਿਆ ਮੱਧਮਾਨ ਅਤੇ ਮੱਧਮਾਨ ਮੁੱਲ ) ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਅਤੇ PC ਨੂੰ NTC ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਸੈਂਸਰ ਆਉਟਪੁੱਟ ਤੋਂ ਸਪਸ਼ਟ ਤੌਰ 'ਤੇ ਹੱਲ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ 1:100 ਪਤਲੇ ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਘੱਟ ਉਚਾਰਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। cDNA ਦੇ 100 ਗੁਣਾ ਪਤਲੇ ਹੋਣ ਲਈ, ਅਸੀਂ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੌਰਾਨ ਕੋਈ ਬੈਂਡ ਨਹੀਂ ਦੇਖਿਆ। (ਚਿੱਤਰ 5 ਵਿੱਚ ਨਹੀਂ ਦਿਖਾਈਆਂ ਗਈਆਂ ਲੇਨਾਂ), ਅਤੇ ਅਨੁਸਾਰੀ DPV ਅਤੇ CV ਪੀਕ ਕਰੰਟਸ NTC ਲਈ ਉਮੀਦ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਮਾਨ ਸਨ। \(117\,\hbox {bp}\) ਟੁਕੜੇ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਪੂਰਕ ਜਾਣਕਾਰੀ ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਏ ਗਏ ਹਨ। ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਨੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ 'ਤੇ ਮੁਫਤ MB ਦੀ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਅਤੇ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਨਾਲ MB ਦੇ ਪਰਸਪਰ ਪ੍ਰਭਾਵ ਕਾਰਨ PCB ਸੰਵੇਦਕ ਤੋਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਪ੍ਰੇਰਿਤ ਕੀਤਾ। ਇਸਲਈ, ਹਰ ਵਾਰ ਜਦੋਂ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਇੱਕ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਚਲਾਇਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਜਾਂ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਵਰਗੀਕ੍ਰਿਤ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਅੰਤਰ (ਰਿਸ਼ਚਿਤ) ਮਾਪ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕਰਨ ਲਈ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਿਖਰ ਦੇ ਕਰੰਟ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਵਿੱਚ ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦਾ ਸਿਖਰ ਕਰੰਟ 39,40 ਹੈ।
(a) DPV, ਅਤੇ (b) ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ \(503\,\hbox {bp}\) ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਖੋਜ ਲਈ CV ਪੀਕ ਕਰੰਟ। ਟੈਸਟ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਤਿੰਨ ਪ੍ਰਤੀਰੂਪ ਵਿੱਚ ਮਾਪੇ ਗਏ ਸਨ ਅਤੇ ਬਿਨਾਂ ਟੈਂਪਲੇਟ ਕੰਟਰੋਲ (NTC) ਅਤੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ (ਪੀਸੀ)
ਸਾਡੀਆਂ ਖੋਜਾਂ ਯੂਵੀ/ਵਿਸ ਸਪੈਕਟਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਆਪਟੀਕਲ ਮਾਪਾਂ ਦੁਆਰਾ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਦੇ ਨਾਲ, ਵੱਖ-ਵੱਖ ਡੀਐਨਏ ਲਈ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਲੰਬਾਈ ਦੇ ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ ਲਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਰਾਂ ਦੀ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਨ ਵਾਲੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਦਰਸਾਉਂਦੀਆਂ ਹਨ। ਸਾਡੇ ਨਿਰੀਖਣ ਇਸ ਸੂਝ ਨੂੰ ਰੇਖਾਂਕਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ ਕਿ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜੇ \(\ਲਗਭਗ\) ਤੱਕ ਲੰਬੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। \(500\,\hbox {bp}\) ਨੂੰ ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਨਾਲ ਖੋਜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਹ ਕਿ ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਲੂਣ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ DNA ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨਹੀਂ ਕਰਦੀ ਹੈ ਜੋ ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦੀ ਹੈ (ਬਹੁਤ ਹੀ ਘੱਟ \({\hbox {ng}/{\upmu \hbox {l}}}\) ਅਤੇ ਉੱਪਰ)। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਅਸੀਂ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਕਿਸਮਾਂ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵ ਦੀ ਜਾਂਚ ਕੀਤੀ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ DPV ਅਤੇ CV ਮਾਪਾਂ ਵਿੱਚ ਲੂਣ ਦੇ ਨਾਲ ਅਤੇ ਬਿਨਾਂ ਜੈੱਲ-ਪਿਊਰੀਫਾਈਡ ਐਂਪਲੀਕਨ, ਅਤੇ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ।ਅਸੀਂ ਦੇਖਿਆ ਹੈ ਕਿ DPV ਨੇ ਬਿਹਤਰ ਰੈਜ਼ੋਲਿਊਸ਼ਨ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤਾ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਬੈਕਗ੍ਰਾਊਂਡ ਕੈਪੇਸਿਟਿਵ ਕਰੰਟ ਵੀ CV ਮਾਪ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਨੂੰ ਘੱਟ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।
ਲੰਬੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦਾ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਵਾਇਰਲ ਜੀਨੋਮਿਕ ਆਰਐਨਏ ਦੀ ਇਕਸਾਰਤਾ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਕਈ ਅਧਿਐਨਾਂ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਹੈ ਕਿ ਵਾਤਾਵਰਣ ਵਿੱਚ ਆਰਐਨਏ ਦੇ ਨਿਘਾਰ ਅਤੇ ਅਲੱਗ-ਥਲੱਗ ਹੋਣ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਵੰਡਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਦੇ ਕਾਰਨ ਲੰਬੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦਾ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਹਮੇਸ਼ਾ ਕੁਸ਼ਲ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ ਹੈ11,41,42,43,44 .ਅਸੀਂ ਦੇਖਿਆ ਹੈ ਕਿ ਪੀਈਜੀ-ਅਧਾਰਤ ਵਾਇਰਸ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਵਿਧੀ ਐਲੂਮੀਨੀਅਮ ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਾਈਡ-ਅਧਾਰਿਤ ਵਾਇਰਸ ਸੰਘਣਤਾ ਵਿਧੀ ਨਾਲੋਂ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਫੇਜ ਫਾਈ-6 ਨੂੰ ਧਿਆਨ ਕੇਂਦਰਿਤ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਵਧੇਰੇ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਸੀ। ਕਈ ਛੋਟੀਆਂ ਲੰਬਾਈ ਦੇ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਅਤੇ ਅੰਤਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣ ਲਈ।
ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਨਮੂਨੇ ਬਹੁਤ ਘੱਟ ਹਨ, ਇਸਲਈ ਇੱਕ ਬਾਇਓਸੈਂਸਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕਰਨ ਦੀ ਜ਼ਰੂਰਤ ਹੈ ਜਿਸ ਲਈ ਟੈਸਟਿੰਗ ਲਈ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ। ਇਸ ਅਧਿਐਨ ਵਿੱਚ ਵਰਤੇ ਗਏ ENIG PCB ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਸ ਦੀ ਹੀ ਲੋੜ ਹੈ \({5}\,{{\upmu \hbox {l}}}\ ) ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਖੇਤਰ ਨੂੰ ਕਵਰ ਕਰਨ ਲਈ ਜਾਂਚ ਲਈ ਨਮੂਨੇ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਅਗਲੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਵੰਡਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਸਫਾਈ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਉਸੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਦੀ ਦੁਬਾਰਾ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਵਿਸਤ੍ਰਿਤ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਮਿਥਾਈਲੀਨ ਨੀਲੇ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ ਕਿਸੇ ਹੋਰ ਰਸਾਇਣ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਇੱਕ ਸਸਤਾ ਹੈ। ਅਤੇ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਰਸਾਇਣ। ਕਿਉਂਕਿ ਹਰੇਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਨੂੰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਲਗਭਗ $0.55 (ਜਾਂ INR 40) ਦੀ ਲਾਗਤ ਆਉਂਦੀ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਇਹ ਬਾਇਓਸੈਂਸਰ ਮੌਜੂਦਾ ਖੋਜ ਤਕਨੀਕਾਂ ਦਾ ਇੱਕ ਲਾਗਤ-ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਵਿਕਲਪ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਸਾਰਣੀ 2 ਸਾਹਿਤ ਵਿੱਚ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਰਿਪੋਰਟ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹੋਰ ਸੈਂਸਰਾਂ ਨਾਲ ਇਸ ਕੰਮ ਦੀ ਤੁਲਨਾ ਦਰਸਾਉਂਦੀ ਹੈ। ਵਿਭਿੰਨ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜੇ।
ਇਹ ਦੇਖਦੇ ਹੋਏ ਕਿ MB-ਅਧਾਰਿਤ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਖੋਜ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਪੀਸੀਆਰ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਇਸ ਵਿਧੀ ਦੀ ਇੱਕ ਵੱਡੀ ਸੀਮਾ ਵਿਭਿੰਨ ਨਮੂਨਿਆਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਗੰਦੇ ਪਾਣੀ ਅਤੇ ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ ਜਾਂ ਘੱਟ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਦੀ ਸੰਭਾਵਨਾ ਹੈ। ਨਾ-ਸੋਧੇ ਹੋਏ ENIG PCB ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਅਸ਼ੁੱਧ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੀ ਡੀਐਨਏ ਖੋਜ ਲਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਖੋਜ ਵਿਧੀਆਂ, ਨਾ-ਵਰਤੇ dNTPs ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੁਆਰਾ ਪੇਸ਼ ਕੀਤੀਆਂ ਗਈਆਂ ਗਲਤੀਆਂ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਢੰਗ ਨਾਲ ਸਮਝਣ ਲਈ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸਥਿਤੀਆਂ ਅਤੇ ਪਰਖ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲਾਂ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਜ਼ਰੂਰੀ ਹੈ। ਵਾਧੂ ਭੌਤਿਕ ਕੈਮੀਕਲ ਮਾਪਦੰਡ ਜਿਵੇਂ ਕਿ pH, ਤਾਪਮਾਨ, ਅਤੇ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਮਾਪ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੂੰ ਬਿਹਤਰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਆਕਸੀਜਨ ਦੀ ਮੰਗ (BOD) ਨੂੰ ਵੀ ਮਾਪਣ ਦੀ ਲੋੜ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਸਿੱਟੇ ਵਜੋਂ, ਅਸੀਂ ਵਾਤਾਵਰਣ (ਝੀਲ ਦੇ ਪਾਣੀ) ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਵਾਇਰਸ ਦੀ ਖੋਜ ਲਈ ਇੱਕ ਘੱਟ ਲਾਗਤ ਵਾਲੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ENIG PCB ਸੈਂਸਰ ਦਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵ ਕਰਦੇ ਹਾਂ। ਡੀਐਨਏ ਸੈਂਸਿੰਗ ਲਈ ਸਥਿਰ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਸ ਜਾਂ ਕਸਟਮ ਸਬਸਟਰੇਟਾਂ ਦੇ ਉਲਟ ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਬਣਾਈ ਰੱਖਣ ਲਈ ਕ੍ਰਾਇਓਜੇਨਿਕ ਸਟੋਰੇਜ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, 53,54 ਸਾਡੀ ਤਕਨੀਕ ਅਣਸੋਧਿਤ PCB ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਲੰਬੇ ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ ਵਾਲੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਸ ਅਤੇ ਕੋਈ ਖਾਸ ਸਟੋਰੇਜ ਲੋੜਾਂ ਨਹੀਂ ਹਨ ਅਤੇ ਇਸ ਲਈ LMICs ਵਿੱਚ ਤਾਇਨਾਤ ਸਵੈਚਲਿਤ ਨਮੂਨਾ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਦੇ ਨਾਲ ਮਾਪ ਦੇ ਹੱਲਾਂ ਦੇ ਵਿਕਾਸ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਹੈ। ਬਾਇਓਸੈਂਸਰ ਟੀਚੇ ਦੇ ਐਂਪਲੀਕਨਾਂ ਦੀ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਖੋਜ ਕਰਨ ਲਈ ਸਸਤੇ ਡੀਐਨਏ-ਇੰਟਰਕਲੇਟਿੰਗ ਰੇਡੌਕਸ ਡਾਈਜ਼ (ਐਮਬੀ) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਵਾਤਾਵਰਣ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਆਮ MBs ਦੇ ਸਿੰਗਲ- ਅਤੇ ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਦੇ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਬਾਈਡਿੰਗ ਦੇ ਕਾਰਨ ਇਸ ਸੰਵੇਦਨਾ ਵਿਧੀ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ। ਇਸਲਈ, ਇਸ ਟੈਸਟ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ ਦੇ ਅਨੁਕੂਲਤਾ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ। ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਸੀ.ਵੀ. ਅਤੇ ਟੈਸਟ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ DPV ਪੀਕ ਕਰੰਟਾਂ ਨੂੰ ਹਰੇਕ ਟੈਸਟ ਲਈ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ (NTC) ਤੋਂ ਪ੍ਰਾਪਤ ਜਵਾਬਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਸਮਝਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਕੰਮ ਵਿੱਚ ਪੇਸ਼ ਕੀਤੇ ਗਏ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਅਤੇ ਵਿਧੀਆਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸਵੈਚਾਲਿਤ ਅਤੇ ਘੱਟ ਵਿਕਸਤ ਕਰਨ ਲਈ ਆਟੋਸੈਂਪਲਰਾਂ ਨਾਲ ਏਕੀਕ੍ਰਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। - ਲਾਗਤ ਦਾ ਹੱਲ ਜੋ ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਵਾਇਰਲੈਸ ਤਰੀਕੇ ਨਾਲ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਵਿੱਚ ਵਾਪਸ ਭੇਜ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਕੈਸ਼ਡੋਲਰ, ਜੇ. ਐਂਡ ਵਾਈਮਰ, ਐਲ. ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਤੋਂ ਵਾਇਰਸਾਂ ਦੀ ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਲਈ ਵਿਧੀਆਂ: ਤਾਜ਼ਾ ਅਧਿਐਨਾਂ ਦੀ ਸਮੀਖਿਆ ਅਤੇ ਮੈਟਾ-ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ. ਜੇ.Application.microorganism.115, pp. 1-11 (2013).
Gall, AM, Mariñas, BJ, Lu, Y. & Shisler, JL ਵਾਟਰਬੋਰਨ ਵਾਇਰਸ: ਪੀਣ ਵਾਲੇ ਸੁਰੱਖਿਅਤ ਪਾਣੀ ਲਈ ਰੁਕਾਵਟਾਂ। PLoS ਪੈਥੋਜਨਸ.11, E1004867 (2015)।
ਸ੍ਰੇਸ਼ਠ, ਐਸ. ਐਟ ਅਲ. ਘੱਟ ਅਤੇ ਮੱਧ-ਆਮਦਨੀ ਵਾਲੇ ਦੇਸ਼ਾਂ ਵਿੱਚ ਕੋਵਿਡ-19 ਦੀ ਲਾਗਤ-ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਵੱਡੇ ਪੈਮਾਨੇ ਦੀ ਨਿਗਰਾਨੀ ਲਈ ਵੇਸਟਵਾਟਰ ਮਹਾਂਮਾਰੀ ਵਿਗਿਆਨ: ਚੁਣੌਤੀਆਂ ਅਤੇ ਮੌਕੇ। ਵਾਟਰ 13, 2897 (2021)।
ਪਾਲੇਸੇਕ, ਈ. ਅਤੇ ਬਾਰਟੋਸਿਕ, ਐਮ. ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮਿਸਟਰੀ. ਕੈਮੀਕਲ. ਰੇਵ.112, 3427–3481 (2012)।
ਟੈਨੀ, ਏ., ਥਾਮਸਨ, ਏਜੇ ਐਂਡ ਬੱਟ, ਜੇਐਨ ਮਿਥਾਈਲੀਨ ਬਲੂ ਸੋਨੇ ਦੇ ਸਬਸਟਰੇਟਾਂ 'ਤੇ ਸਥਿਰ ਸਿੰਗਲ- ਅਤੇ ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਓਲੀਗੋਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡਸ ਦੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਵਿਤਕਰੇ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ। ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕ 126, 1756-1759 (2001)।
Wong, EL, Erohkin, P. & Gooding, JJ Comparison of Cation and Anion Intercalators for Electrochemical Transduction of DNA Hybridization by Long-range Electron Transfer.Electrochemistry.comminicate.6, 648–654 (2004).
ਵੋਂਗ, ਈਐਲ ਅਤੇ ਗੁਡਿੰਗ, ਜੇਜੇ ਡੀਐਨਏ ਦੁਆਰਾ ਚਾਰਜ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ: ਇੱਕ ਚੋਣਵੇਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਡੀਐਨਏ ਬਾਇਓਸੈਂਸਰ.ਅਨੁਸ.ਕੈਮੀਕਲ.78, 2138–2144 (2006)।
Fang, TH et al. ਸਮਕਾਲੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਖੋਜ ਦੇ ਨਾਲ ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਮਾਈਕ੍ਰੋਫਲੂਇਡਿਕ ਡਿਵਾਈਸ. ਜੀਵ-ਵਿਗਿਆਨਕ ਸੰਵੇਦਕ. ਬਾਇਓਇਲੈਕਟ੍ਰੋਨਿਕਸ.24, 2131–2136 (2009)।
Win, BY et al. ਸਿਗਨਲਿੰਗ ਵਿਧੀ ਦਾ ਅਧਿਐਨ ਅਤੇ ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਨਾਲ ਮਿਥਾਈਲੀਨ ਬਲੂ ਦੇ ਪਰਸਪਰ ਕ੍ਰਿਆ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ ਇੱਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਕਾਰਗੁਜ਼ਾਰੀ ਦੀ ਤਸਦੀਕ। ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਕ 136, 1573–1579 (2011)।
ਰਮੀਰੇਜ਼-ਚਵਾਰਰੀਆ, ਆਰਜੀ ਐਟ ਅਲ. ਲੂਪ-ਮੀਡੀਏਟਿਡ ਆਈਸੋਥਰਮਲ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ-ਆਧਾਰਿਤ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਰ ਗੰਦੇ ਪਾਣੀ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਵਿੱਚ ਸਾਰਸ-ਕੋਵ-2 ਦੀ ਖੋਜ ਲਈ।ਵਾਤਾਵਰਣ.ਕੈਮੀਕਲ.ਬ੍ਰਿਟੇਨ.10, 107488 (2022)।
ਕੁਮਾਰ, M. et al. PCB ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡਸ ਨਾਲ SARS-CoV-2 amplicons ਦੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਕੈਮੀਕਲ ਸੈਂਸਿੰਗ। ਸੈਂਸਰ ਸਰਗਰਮ ਹੈ।B ਕੈਮਿਸਟਰੀ.343, 130169 (2021)।
Kitamura, K., Sadamasu, K., Muramatsu, M. & Yoshida, H. wastewater.science.general environment.763, 144587 (2021) ਦੇ ਠੋਸ ਹਿੱਸੇ ਵਿੱਚ SARS-CoV-2 RNA ਦੀ ਕੁਸ਼ਲ ਖੋਜ।
Alygizakis, N. et al. ਗੰਦੇ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ SARS-CoV-2 ਖੋਜ ਲਈ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣਾਤਮਕ ਢੰਗ: ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਅਤੇ ਭਵਿੱਖ ਦੇ ਦ੍ਰਿਸ਼ਟੀਕੋਣ.TraC ਰੁਝਾਨ anal.Chemical.134, 116125 (2020)।
Fedorenko, A., Grinberg, M., Orevi, T. & Kashtan, N. ਸ਼ੀਸ਼ੇ ਦੀਆਂ ਸਤਹਾਂ 'ਤੇ ਜਮ੍ਹਾ ਕੀਤੇ ਵਾਸ਼ਪੀਕਰਨ ਥੁੱਕ ਦੀਆਂ ਬੂੰਦਾਂ ਵਿੱਚ ਲਿਫਾਫੇ ਵਾਲੇ ਬੈਕਟੀਰੀਓਫੇਜ ਫਾਈ6 (SARS-CoV-2 ਲਈ ਇੱਕ ਸਰੌਗੇਟ) ਦਾ ਸਰਵਾਈਵਲ।science.Rep.10, 1–10 (2020)।
Dey, R., Dlusskaya, E. & Ashbolt, NJ ਫ੍ਰੀ-ਲਿਵਿੰਗ ਅਮੀਬਾ ਵਿੱਚ ਇੱਕ SARS-CoV-2 ਸਰੋਗੇਟ (Phi6) ਦੀ ਵਾਤਾਵਰਨ ਸਥਿਰਤਾਪਾਣੀ ਦੀ ਸਿਹਤ 20, 83 (2021)।
Mindich, L. ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਬੈਕਟੀਰੀਓਫੇਜ\(\varphi\)6.microorganism.Moore.biology.Rev. ਦੇ ਤਿੰਨ ਜੀਨੋਮਿਕ ਟੁਕੜਿਆਂ ਦੀ ਸਟੀਕ ਪੈਕੇਜਿੰਗ।63, 149-160 (1999)।
ਪਿਰਟੀਮਾ, ਐਮਜੇ ਅਤੇ ਬੈਮਫੋਰਡ, ਡੀਐਚ ਆਰਐਨਏ ਫੇਜ\(\ਵਰਫੀ\)6 ਪੈਕੇਜਿੰਗ ਖੇਤਰ ਦੀ ਸੈਕੰਡਰੀ ਬਣਤਰ।ਆਰਐਨਏ 6, 880–889 (2000)।
ਬੋਨੀਲਾ, ਐਨ. ਐਟ ਅਲ. ਫੇਜਜ਼ ਆਨ ਦ ਟੈਪ - ਬੈਕਟੀਰੀਓਫੇਜਸ ਦੇ ਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਸਟਾਕ ਨੂੰ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ ਇੱਕ ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਕੁਸ਼ਲ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ। ਪੀਰਜੇ 4, ਈ2261 (2016)।